AFP、DCP和AFP-L 3%联合检测对肝细胞肝癌的诊断价值

张明跃，陈浩

保定市传染病医院临床基因扩增检验实验室，河北保定071000

肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是一种恶性程度较高、进展较快的恶性肿瘤，其病死率居全球恶性肿瘤的第3位[1]。影像学检查和血清甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）检测是HCC的常用诊断方法，其中影像学检查对早期HCC的诊断较困难。20世纪70年代AFP开始应用于HCC的诊断，但其灵敏度不高，而且部分慢性肝炎和肝硬化患者的AFP也可能升高[2]。临床检测的AFP实际上是总AFP蛋白，包括AFP-L1、AFP-L2、AFPL3。AFP-L1来源于良性肝病细胞，AFP-L2来源于孕妇，AFP-L3来源于癌变肝细胞，其中AFP-L3与HCC的发生直接相关[3]。AFP-L3异质体比率（ratio of AFP-L3 isoform，AFP-L3%）和异常凝血酶原（des-gamma-carboxy prothrombin，DCP）是近年来发现的与HCC高度相关的肿瘤标志物，是诊断HCC的重要指标。本研究分析AFP、DCP及AFP-L3%对HCC的诊断价值，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择2012年5月至2013年12月于保定市传染病医院就诊的364例门诊及住院的慢性肝炎、原发性胆汁性肝硬化或HCC患者。纳入标准：所有患者均有明确的诊断结果，慢性肝炎诊断标准参考《病毒性肝炎防治方案》[4]，HCC诊断标准参考《原发性肝癌规范化病理诊断方案专家共识》[5]，原发性胆汁性肝硬化诊断标准参考《自身免疫性肝病诊断和治疗指南》[6]。排除标准：①合并其他感染的患者；②孕期及哺乳期患者。纳入的364例患者中，男201例，女163例；平均年龄（52.6±12.3）岁；慢性肝炎患者86例（慢性肝炎组），原发性胆汁性肝硬化患者133例（原发性胆汁性肝硬化组），HCC患者145例（HCC组）。本研究经保定市传染病医院医学伦理委员会审批通过，所有患者均对本研究知情并签署知情同意书。

1.2 研究方法及观察指标

采集所有患者的血清，保存于-80℃冰箱。采用全自动化学发光免疫分析仪，严格按照说明书操作检测AFP、DCP和AFP-L3水平，仪器自动计算AFP-L3占AFP的比率，即AFP-L3%。分别比较慢性肝炎组、原发性胆汁性肝硬化组和HCC组患者的AFP、DCP水平及AFP-L3%。

分别以 AFP≥7 ng/ml、DCP≥40 ng/ml和 AFPL 3%≥10%为阳性；联合诊断HCC时，以上任意一个指标阳性即判断为阳性。以临床诊断结果为标准，灵敏度=真阳性例数/（真阳性+假阴性）例数×100%，特异度=真阴性例数/（真阴性+假阳性）例数×100%，阳性预测值=真阳性例数/（真阳性+假阳性）例数×100%，阴性预测值=真阴性例数/（真阴性+假阴性）例数×100%。

根据血清AFP水平，将145例HCC患者分为3个亚组：阴性组（0≤AFP＜7 ng/ml）、阳性低浓度组（7 ng/ml≤AFP＜ 400 ng/ml）和阳性高浓度组（AFP≥400 ng/ml）。比较3个亚组HCC患者的AFP-L3%和DCP阳性率。

1.3 统计学方法

采用SPSS 16.0软件对数据进行统计分析。计数资料以例数和率（%）表示，组-间比较采用χ2检验；计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用LSD-t检验或单因素方差分析；采用Kappa检验进行一致性分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 AFP、DCP水平及AFP-L 3%的比较

慢性肝炎组、肝硬化组及HCC组患者的AFP、DCP水平及AFP-L3%比较，差异均有统计学意义（P＜0.01）。HCC组患者的AFP、DCP水平及AFPL3%均高于慢性肝炎组和肝硬化组患者，肝硬化组患者的DCP水平和AFP-L3%均高于慢性肝炎组患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表1）

表1 不同组别肝病患者AFP、DCP水平及AFP-L 3%的比较（±s）

表1 不同组别肝病患者AFP、DCP水平及AFP-L 3%的比较（±s）

注：a与慢性肝炎组比较，P＜0.05；b与肝硬化组比较，P＜0.05

组别慢性肝炎组（n=86）肝硬化组（n=133）HCC组（n=145）F值P值AFP（ng/ml）60.76±30.53 70.34±30.72 507.12±100.74a b 1835.786 0.000 DCP（ng/ml）18.25±5.68 39.44±14.73a 209.17±60.43a b 903.447 0.000 AFP-L3%（%）6.02±2.41 7.63±3.67a 14.47±5.64a b 131.877 0.000

2.2 AFP、DCP及AFP-L 3%单独及联合检测对HCC的诊断价值

与AFP、DCP及AFP-L3%单独诊断比较，AFP、DCP及AFP-L3%联合诊断HCC的灵敏度、阴性预测值和约登指数较高。分别将几种诊断方法与临床诊断结果进行一致性检验，结果显示，联合诊断的Kappa值最高。（表2）

表2 AFP、DCP、AFP-L 3%单独及联合检测对HCC的诊断价值

2.3 不同AFP浓度HCC患者AFP-L 3%和DCP阳性率的比较

阴性组、阳性低浓度组和阳性高浓度组HCC患者分别为63例、40例和42例。阳性低浓度组和阳性高浓度组患者的AFP-L3%和DCP阳性率均高于阴性组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。阳性低浓度组和阳性高浓度组患者的AFP-L3%和DCP阳性率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。（表3）

表3 不同AFP浓度HCC患者AFP-L 3%和DCP阳性率的比较[n（%）]

3 讨论

HCC的早期诊断与患者的长期生存密切相关，早期发现和治疗可显著延长患者的生存期。AFP是诊断HCC最主要的血清学标志物，有研究显示，AFP诊断HCC的灵敏度仅为39%～65%，特异度为76%～91%[7]。DCP于1984年首次被描述为肿瘤标志物，是维生素K缺乏或拮抗剂-Ⅱ诱导产生的蛋白，是一种在HCC中升高的异常凝血酶原，但在慢性活动性肝炎和转移性肝癌中并不升高。

本研究结果显示，HCC组患者的AFP、DCP水平及AFP-L3%均高于慢性肝炎组和肝硬化组患者，肝硬化组患者的DCP水平和AFP-L3%均高于慢性肝炎组患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。表明慢性肝炎和原发性胆汁性肝硬化患者的血清AFP-L3%较低，而HCC患者的血清AFPL3%较高，提示AFP-L3检测有助于良恶性肝病的鉴别诊断，且不受AFP水平的影响。研究表明，HCC患者血清AFP-L3水平升高可较影像学检查阳性提前几个月甚至几年出现[8-9]。

研究表明，DCP与AFP并无相关性，二者对HCC的诊断具有互补性，联合诊断时，其灵敏度和特异度均高于单独诊断的结果[10-11]。本研究结果显示，与AFP、DCP及AFP-L3%单独诊断比较，AFP、DCP及AFP-L3%联合诊断HCC的灵敏度、阴性预测值和约登指数较高。李鲁平等[12]研究发现，血清AFP水平为5～40 ng/ml的HCC患者，AFP-L3%阳性率为46.2%，AFP-L3检测可以提高低浓度AFP的HCC患者的诊断率。Carr等[13]研究发现，AFP、DCP、AFP-L3%单独诊断HCC的灵敏度分别为67.7%、72.7%和61.6%，AFP、DCP及AFP-L3%联合诊断HCC的灵敏度可提高至85.9%。

本研究结果显示，阳性低浓度组和阳性高浓度组患者的AFP-L3%和DCP阳性率均高于阴性组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。提示随着AFP浓度的升高，AFP-L3%和DCP阳性率也逐渐升高。对于AFP阴性的HCC患者，AFP-L3%和DCP也有较高的阳性率，可在一定程度上减少AFP阴性HCC的漏检率。秦文燕等[14]研究认为，AFP-L3%随着AFP水平的升高逐渐升高。Toyoda等[15]研究发现，在Ⅰ～Ⅳ期HCC患者中，AFP、AFP-L3%、DCP均随临床分期逐渐升高，但DCP升高更为显著。

HCC患者的血清AFP和DCP均可用于监测治疗效果及预测肿瘤的复发风险。DCP阳性患者肝内转移、门静脉侵袭和肝静脉血栓形成以及包膜浸润的发生率较高。目前，国内外多个肝病协会均已将AFP、AFP-L3%和DCP列为HCC诊断的重要指标[4,16-17]。

AFP、DCP及AFP-L3%联合检测能提高HCC的诊断效能度，可有效避免低浓度AFP的HCC患者的漏诊，适合临床广泛开展。