槐杞黄颗粒对传染性单核细胞增多症患儿免疫失衡的干预作用

黄闪 李慧霞 董慧 刘江华 杨莉 孙红启

传染性单核细胞增多症（infectious mononucleosis，IM）是一种急性单核-巨噬细胞增生性疾病，一般由EB 病毒（Epstein-Barr Virus，EBV）感染致淋巴细胞急性或亚急性增生引起，是儿童常见的感染性疾病之一，临床以发热、淋巴结肿大、外周血淋巴细胞增高、出现异常淋巴细胞为特征[1]。流行病学显示，近年IM的发病率有明显升高趋势。IM的发病机制尚不完全清楚，可能与EB病毒感染机体后致免疫系统异常相关，且免疫功能低下的儿童患IM后病情进展快，死亡率高[2]。中成药槐杞黄颗粒具有益气养阴的效果，是重要的免疫调节剂[3]。本研究观察槐杞黄颗粒对传染性单核细胞增多症患儿免疫功能的干预作用，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料选择2015年1月～2017年1月我科诊断的104例初发传染性单核细胞增多症患儿入选本研究。槐杞黄治疗组58例，其中男30例，女28例，年龄2.5～14.3岁；常规治疗组46例，男25例，女21例，年龄2.5～14.3岁。两组患儿年龄、性别、身高和免疫功能等因素差异均无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 诊断标准传染性单核细胞增多症患儿的诊断标准[4]：①临床表现为发热、咽峡炎和浅表淋巴结肿大，并合并咽痛、皮疹、肝大、脾大和肝功能异常中任何一项；②外周血异常淋巴细胞≥10%；③血嗜异性凝集试验阳性；④EBV抗体阳性。符合前两项，并排除化脓性扁桃体炎、巨细胞感染、病毒性肝炎、HIV感染、白血病和淋巴瘤等，即可作出临床诊断；如具备后两项中的任何一项即可明确诊断。

1.3 排除与剔除标准排除标准：1年内静脉注射脾多肽、胎盘多肽或口服匹多莫德口服液/转移因子口服液等免疫调节剂的患儿；原发性免疫缺陷患儿；合并其他系统疾病的患儿，如心肌炎、肺炎、消化道感染、中枢神经系统感染等；不能配合治疗的患儿。剔除标准：观察期间服用药物能影响观察指标的患儿；治疗期间合并并发症且不能继续观察的患儿；噬血细胞增多症；慢性活动性EB病毒感染；自行退出或失访的患儿。

1.4 治疗常规治疗组患儿给予阿昔洛韦抗病毒，10mg·kg-1·次-1，q8h 治疗 2 周，辅以清热、对症支持治疗等常规治疗，合并细菌感染者予抗感染治疗，总疗程为2～3周。槐杞黄治疗组除接受常规治疗外，体温正常后加用槐杞黄颗粒联合治疗（商品名：还尔金，启东盖天力药业有限公司，批准文号：国药准字 B200220074，规格：10g/袋）。用法：3岁以下5g/次，每日2次；3～12岁者10g/次，每日2次，口服，连服3月。

1.5 观察指标及方法

1.5.1 血清IgA、IgG、IgM水平检测所有患儿入院时和治疗3月后分别采集静脉血5ml，分离血清，采用免疫投射比浊法进行检测，由我院多学科试验室按照试剂盒（FASC Calibur，Becton Dickinson 公司，美国）操作说明进行检测。

1.5.2 血CD4+T、CD8+T、CD19+、CD16+CD56+淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+比值及中性粒细胞/淋巴细胞（NLR）比值检测 所有患儿入院后和治疗后3月采集清晨空腹外周EDTA抗凝静脉血3ml，由专人严格按照操作说明采用全自动流氏细胞分析仪（FASC Calibur，Becton Dickinson公司，美国）检测CD4+T、CD8+T、CD19+、CD16+CD56+淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+比值，同时采用全自动五分类血液分析仪检测血常规，计算中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）。

1.6 统计学方法应用SPSS 19.0统计软件对数据进行统计学分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用两样本t检验；两组治疗前后比较采用配对样本t检验。计数资料以率（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患儿血清IgA、IgG、IgM水平比较两组患儿治疗前血清IgA、IgG、IgM水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗3月后两组患儿血清IgA、IgG、IgM水平均较治疗前明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。槐杞黄治疗组血清IgA、IgG、IgM水平明显高于常规治疗组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组血清免疫球蛋白的变化（±s，mg/L）

表1 两组血清免疫球蛋白的变化（±s，mg/L）

注：与治疗前比较，*P＜0.05；与槐杞黄组比较，#P＜0.05

组别 IgG IgM IgA治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后槐杞黄治疗组 10.56±2.37 16.58±3.23* 1.03±0.46 1.56±0.58* 0.98±0.49 1.26±0.35*常规治疗组 11.02±3.12 14.35±2.89*# 1.06±0.38 1.20±0.36*# 1.02±0.53 1.15±0.47*#

2.2 两组患儿外周血淋巴细胞亚群检测结果比较两组患儿治疗前外周血CD4+T、CD8+T、CD19+、CD16+CD56+淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗3月后，两组患儿外周血CD4+T、CD19+、CD16+CD56+淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+比值较治疗前明显升高（P＜0.05）；CD8+T细胞百分比较治疗前明显降低（P＜0.05）；槐杞黄治疗组外周血CD4+T、CD19+、CD16+CD56+淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+比值明显高于常规治疗组（P＜0.05）；CD8+T细胞百分比明显低于常规治疗组（P＜0.05）。见表2。

表2 两组淋巴细胞亚群的变化（±s）

表2 两组淋巴细胞亚群的变化（±s）

注：与治疗前比较，*P＜0.05；与槐杞黄治疗组比较，#P＜0.05

组别 CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ CD19+ CD16+CD56+治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后槐杞黄治疗组 19.56±6.58 32.54±4.36* 58.98±8.61 25.63±8.31* 0.64±0.43 1.32±0.68* 5.17±3.68 15.67±4.25* 8.35±3.87 11.63±4.20*常规治疗组 20.15±7.63 28.10±5.62*#56.78±8.93 30.20±7.65*#0.59±0.67 1.23±0.37*# 6.42±4.23 11.32±5.38*# 8.98±3.04 10.02±2.84*#

2.3 两组患儿中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）比较治疗前常规治疗组患儿NLR比值为0.29±0.23，槐杞黄治疗组患儿NLR比值为0.32±0.17，两组患儿NLR比值差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后常规治疗组患儿NLR比值为0.58±0.13，槐杞黄治疗组患儿NLR比值为0.62±0.20，治疗后两组患儿NLR明显高于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）。槐杞黄治疗组NLR稍高于常规治疗组，但差异无统计学意义（P=0.12）。

2.4 两组患儿不良反应发生情况比较槐杞黄治疗组3例患儿发生腹泻，总发生率5.17%（3/58），常规治疗组2例发生腹泻，总发生率4.35%（2/46），两组患儿不良反应发生率差异无统计学意义（P=0.5648）。

3 讨论

传染性单核细胞增多症是机体感染EB病毒后引起的全身性疾病，是一种非肿瘤性增殖性疾病。EB病毒是人疱疹病毒γ亚科DNA病毒的一种，其感染在全球范围内广泛存在，约90%成人体内EB病毒抗体阳性[5]。EB病毒可侵袭宿主的T细胞、B细胞和NK细胞，导致机体免疫失衡。槐杞黄颗粒是由槐耳菌质为君，枸杞和黄精共为臣组成的一种真菌类免疫调节剂，可激活巨噬细胞、中性粒细胞和NK细胞，调节Th/Ts，上调Treg细胞表达，刺激IL-2等细胞因子产生，发挥免疫调节作用[6]。槐耳菌质所含的槐耳多糖具有较高的免疫活性，可促进吞噬细胞功能，增强溶菌酶活性；枸杞养肝、滋肾、润肺，其所含枸杞多糖可增强非特异性免疫，抑制肿瘤生长及突变；黄精可提高小鼠脾脏指数和巨噬细胞的吞噬功能[7]。国内多项研究显示[8，9]，槐杞黄颗粒具有抗炎、抗过敏效果，可减少小儿呼吸道感染的次数，明显改善肾脏疾病患儿的免疫状态，减少肾脏疾病的复发[10]。

B细胞是EB病毒感染的主要靶细胞，因其表面表达EBV特异性受体CD21[11]。EB病毒感染B细胞后随着EB病毒的扩增，B细胞表面表达多种抗原，经抗原提呈细胞提呈后激活CD8+T细胞，产生细胞毒效应，杀灭感染的B细胞[12]。B细胞的主要功能是产生并分泌免疫球蛋白，IM急性期B细胞被大量杀灭，其分泌的免疫球蛋白亦随之减少，提示IM急性期机体体液免疫严重失衡。本研究显示IM急性期两组患儿外周血CD19+细胞百分比明显降低，血清IgA、IgG、IgM水平明显降低，治疗后IM恢复期两组患儿外周血CD19+细胞百分比升高，血清IgA、IgG、IgM水平较前明显升高，槐杞黄治疗组明显高于常规治疗组，该结果说明槐杞黄颗粒具有调节体液免疫失衡的作用。

调节性 B 细胞（regulatory B cell，Breg）是近年发现的一类具有免疫调节功能的B细胞，它可分泌IL-10、TGF-β等抑制性细胞因子，IM急性期时分泌的抑制性细胞因子减少，有利于细胞毒性T细胞产生选择性克隆扩增，杀灭感染的B细胞，IM恢复期Breg细胞功能恢复，抑制细胞毒性T细胞功能及炎症因子释放，避免过度免疫反应[13]。T淋巴细胞包括 CD4+的辅助性 T 细胞（helper T cell，Th）和CD8+的细胞毒性 T 细胞（cytotoxic T cell，Tc）和抑制性 T 细胞（suppressor T cell，Ts）。国内外多项研究显示[14]，IM急性期CD4+T淋巴细胞百分比和CD4+/CD8+比值明显降低，且与EBV-DNA拷贝呈明显负相关，CD8+T细胞百分比明显高于正常，与本研究结果一致。NK细胞为自然杀伤细胞，不依赖抗体杀伤靶细胞，本研究结果显示，IM急性期CD16+CD56+细胞百分比较低，说明IM急性期机体存在严重的细胞免疫失衡。两组患儿治疗3月后CD4+T、CD19+、CD16+CD56+细胞百分比和CD4+/CD8+比值较治疗前明显增高，CD8+T淋巴细胞百分比较治疗前降低，提示患儿免疫功能均有恢复，槐杞黄治疗组优于常规治疗组，说明槐杞黄颗粒可激活巨噬细胞、自然杀伤细胞，促进CD4+T细胞分裂、增殖、分化，调节免疫失衡，增强细胞免疫功能。

中性粒细胞/淋巴细胞比值（neutrophil-lymphocyte ratio，NLR）是系统性炎症反应的特异性指标之一，可反应机体的免疫状态。多项研究显示，NLR与肿瘤（如肝癌、肺癌、胃癌等）的治疗效果、预后和复发密切相关[15]，NLR升高是胃癌患者总生存期缩短的独立预后因素[16]，Fan等[17]发现外周血NLR增高与慢性肝病急性变相关，但仍有研究表明，乙型肝炎肝硬化患儿的NLR明显低于健康儿童[18]。因此NLR是否可反映疾病治疗效果及预后仍存在争议。本研究发现，IM急性期NLR明显降低，治疗后恢复期NLR较前升高，同时槐杞黄治疗组明显高于常规治疗组。同时NLR在IM中的明确作用及与预后的关系有待进一步研究。

综上所述，槐杞黄颗粒可以提高传染性单核细胞增多症患儿血清中IgA、IgG、IgM等免疫球蛋白水平，提高 CD4+T、CD19+、CD16+CD56+细胞百分比、CD4+/CD8+比值及NLR比值，降低CD8+T淋巴细胞百分比，调节传染性单核细胞增多症急性期免疫失衡，增强患儿抗病能力，提高临床疗效，同时不良反应小，安全有效，是临床治疗传染性单核细胞增多症的重要辅助药物。但本研究样本数量较少，需进行多中心联合研究以验证本实验结果的可靠性。