公共场所军团菌污染情况的分析及研究

阎 秋

（辽阳市卫生健康服务中心，辽宁 辽阳 111000）

军团菌为诱发军团菌病的一类急性呼吸道传染病病原体，在自然界中广泛存在。最近几年中，国内很多城市报道存在军团菌污染的状况。伴随着我国城市经济的快速发展，大型建筑建设规模不断拓展，中央空调的使用数量也相应提升。当下，已有研究指出[1]，空调系统冷却水是造成军团菌扩散与流行的根源。本次研究以13家大型公共场所的中央空调为检测对象，检测军团菌的污染状况，初步探究影响其生长繁殖的因素。

1 对象与方法

1.1 研究对象：选择某市13家大型公共场所的中央空调为目标对象，其中医院2家、宾馆7家、商场4家。

1.2 主要仪器与试剂：数字温湿度计、便携式浊度计、便携式pH计、沙氏培养基、营养琼脂培养基等。

1.3 方法

1.3.1 现场调查与收集样品：实地考察空调的使用年限、清洁与卫生状况。采集每个采样点冷却塔500 mL水样，现场测量pH值、水体温度与浊度3个指标，后续操作在实验室中进行。使用无纺布采集风管内的积尘，并将其装到密封袋内，为后续检查提供样本原料。细菌、真菌溶液应用6级筛孔空气撞击式采样器采集，采样点通常安设在与风口下风方向相距15～20 cm。

1.3.2 军团菌检测：取0.1 mL样本，接种在GVPC平板上，在2.5% CO2培养箱中培养。从第3天开始每天观察可疑菌落产生状况，对其进行筛选，分别和BCYE、BCYE-Cys培养基接种，于35 ℃温度下下培养

2 d。针对在BCYE培养基上生长但BCYE-Cys上停止生长的可疑军团菌，建议开展血清学检查工作。

1.3.3 统计学方法：用SPSS16.0软件包处理实验数据，（±s）表示计量资料，独立样本t检验。差异检测标准：P=0.05。

2 结 果

2.1 水温、pH值、浊度调查结果：集中空调冷却水的水温为24.3～31.8 ℃，其中27.2～30.1 ℃范围内居多，有5家，占53.85%；pH值为7.40～7.92，其中7.52～7.82区间居多，共计8家，占61.54%；浊度为3～10 NTU，其中为7 NTU的4家，占30.77%。

2.2 积尘与微生物污染状况：参与本次调查研究的13家大型公共场所的集中空调积尘量为0.2～2.4 g/m2。细菌总数为2～581 cfu/ cm3，真菌总数为2～682 cfu/ cm3（表1）。结合空调通风系统送风口卫生管理的相关要求：积尘量＜20 g/m2，细菌与真菌总数均≤500 cfu/ cm3。本次调查发现13积尘量均与卫生管理相关标准匹配；真菌总数有3家不符，细菌总数有2家不符。

表1 积尘与微生物污染状况调查结果统计

2.3 军团菌检出状况：采集的水样经由GVPC平板初步分离后，用BCYE、BCYE-Cys培养基对可疑菌落进一步认证。将集中空调冷却水涂擦在GVPC平板与BCYE平板上有典型菌落生成，但其在BCYE-Cys培养基不生长，经血清学检查诊断为军团菌Lp1型，提示该份水样军团菌阳性。本次研究中，共5份水样军团菌呈阳性，占38.46%。其中空调设备使用时间＞5年占57.14%（4/7），＜5年占16.67%（1/6）。经统计学软件分析，差异有明显的统计学意义（P＜0.01）。

3 讨 论

结合《公共场所集中空调通风系统卫生规范》（WS-394-2012）中的相关要求[2]，集中空调冷凝水与冷却水，杜绝出现嗜肺军团菌检出的状况。本次研究所选择的13例应用集中空调的大型公共场所，军团菌共检出5家，占38.46%，尽管低于有关研究，但其也提示在冷却水系统内，军团菌污染较为严重的问题。

有研究指出，90.0%以上的军团菌感染是嗜肺军团菌引发的，当下共发现嗜肺军团菌种有16种血清型，其中以I型（LP1）军团菌肺炎最为常见，占85.0%[3]。诱发军团菌感染的病原菌类型多样，且广泛分布于自然环境中，在地区之间存在一定差异。目前，军团菌肺炎已被WHO纳入至传染病的行列内。在本次研究中，13份水样有5份分离出军团菌，检出率约为38.46%，且所检出菌株均是LP1型，这与 Lp1型嗜肺军团菌是军团菌的主要致病菌的结论相一致，同时也提升了冷却水对人体生命健康水平有潜在性危害。

在本次研究中，分析了水温、pH值、浊度与军团菌检出率之间的相关性，发现13份水样中水温、pH值较为相近，和军团菌检出率无明显相关性，而浊度越高，军团菌检出率越大，提示冷却水浊度的变化是干扰军团菌检出率的主要因素之一，与报道一致[4]。另外，送风口积尘量均符合卫生管理的相关要求，而真菌总数有3家不符，细菌总数有2家不符，这提示当下采用的常规空调清洁方法难以实现有效杀灭军团菌的目标，当下我国很多学者在空调清洁方法方面做出深入研究。另外，孔田设备使用年限和军团菌的检出率呈正相关性，这可能和设备安装时间长、元器件陈旧化、清洁杀菌工作难度大等相关[5]。虽然当下相关部门已加大对空调冷却水清洗换水方面的管理力度，但未推行消毒干预措施，进而对军团菌检出率产生一定影响，笔者认为在空调设备日常卫生管理过程中，需加强对集水池等设施的清洗，在有效去除生物膜、沉积物等污物基础上，也需严格落实消毒工作，进而实现对军团菌的全面控制。综上，空调冷却水的浊度与空调使用年限可能是滋生军团菌的重要因素，应加强空调冷却水卫生管理，并加强设备使用管理，以将军团菌污染对公共健康构成的危害降至最低水平。