慢性痛风急性发作患者TNF-α、IL-2、IL-6变化水平及与肾功能相关性研究

黄楚泉，蔡 奕，林揆斌，林曼娜，郑裕彬，胡郁刚，李 帆

(广东省潮州市人民医院，广东 潮州 521000)

痛风性关节炎的发生可以促进患者关节持续性损害的发生，研究显示，痛风性关节炎的发病率可达(223～445)/10万左右[1，2]。细胞生物学相关因子的改变，可以通过促进炎性细胞的聚集，如单核细胞、巨噬细胞等，加剧关节滑膜组织的损伤，促进关节功能的衰退[3，4]。炎性因子可加快巨噬细胞、单核细胞等的聚集而进一步加重关节损伤[5，6]，参与痛风发作的炎性因子有：环氧化酶2(COX2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)等，它们在痛风急性发作的患者中存在表达水平的异常及变化，对痛风的发病及靶器官的损害中起到关键作用，对本病及其并发症的预防及治疗有临床指导意义及科学依据，本研究选取我院80例急性痛风患者，探讨不同指标的表达及其与患者肾功能的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料2015年6月至2018年3月我院风湿免疫科确诊的慢性痛风急性发作期患者80例(A组)，同时选取40例慢性痛风稳定期患者(B组)、40例来院的健康体查者作为对照组。A组男71例，女9例，年龄(51.1±12.3)岁，病程(5.1±1.8)年，症状表现为关节红肿热痛、躁动不安，睡眠差。B组男35例，女5例，年龄(52.3±11.2)岁，病程(4.8±2.1)年，症状表现为关节轻度的疼痛、能够正常生活和睡眠。对照组男33例，女7例，年龄(49.5±12.1)岁。3组或者性别及年龄比较，差异均无统计学意义。纳入标准：①患者均符合2010年ACR/EULAR 原发性痛风的诊断标准，急性发作期患者表现为关节红肿、压痛、活动受限、苔黄、舌质红暗等；②年龄18～75岁；急性发作时间48 h以内；③慢性痛风稳定期是指患者症状消失的期间，即临床上患者未出现任何症状；④30 d内未服用止痛、降酸等药物治疗，未使用对肾功能有影响的药物；⑤半年内未采用激素类药物的治疗；⑥所有患者均签知情同意书；⑦经潮州市人民医院伦理委员会批准。排除标准：①继发性痛风；②伴冠心病、高血压、脑梗死等疾病，造血系统异常、肝肾功能异常；③糖尿病等内分泌疾病；④精神障碍；⑤存在恶性肿瘤；⑥伴有原发性肾脏疾病、高血压肾损伤等。

1.2方法A、B组均进行低嘌呤饮食，并服用碳酸氢钠片，均未予降酸治疗。A组第一天抽完血标本后均口服秋水仙碱片(云南省西双版纳药业有限责任公司，国药准字H53021369)0.5 mg/次，2次/日，塞来昔布胶囊(辉瑞制药有限公司，国药准字J2014D072)0.2/次，1次/日。

1.3观察指标比较三组血清TNF-α、IL-2、IL-6及COX2、β2微球蛋白(β2-MG)、尿微量白蛋白(mAlb)、尿酸(UA)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、胱抑素C(Cys-C)。采集空腹静脉血约5 ml并分作两份，一份自然抗凝后以3000 r/min离心10 min，取上清液采用酶联免疫吸附法测定血清中TNF-α、IL-2、IL-6及COX2水平，检测试剂盒购自北京中杉金桥生物有限公司，部分炎症因子送广州南方医科大学华银检验中心检测，具体检测步骤严格按照试剂盒说明书进行操作；另一份置于枸橼酸钠抗凝管内，加入mAlb、UA、Scr、BUN、Cys-C检测试剂盒后，利用胶体金法检测mAlb、UA、Scr、BUN、Cys-C水平，试剂盒购自上海奥普生物医药有限公司，具体操作程序按照各种试剂盒的相关说明进行。

1.4统计学方法采用SPSS 16.0统计软件处理数据。计量资料比较采用单因素方差分析法及LSD-t检验；重复测量数据采用多变量方差分析；相关性分析采用Pearson相关分析。P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1三组炎症相关指标比较三组血清TNF-α、IL-2、IL-6、COX2表达水平比较，A组高于B组及对照组，B组高于对照组(P< 0.05)。见表1。

表1 三组炎症相关指标比较

#与B组比较，P< 0.05，*与对照组比较，P< 0.05

2.2三组肾功能指标比较三组mAlb、UA、BUN、Scr、Cys-C水平比较，A组高于B组及对照组，B组高于对照组(P< 0.05)，见表2。

表2 三组肾功能指标比较

#与B组比较，P< 0.05，*与对照组比较，P< 0.05

2.3A组血清炎症指标及肾功能指标变化情况治疗第7、14天时A组血清TNF-α、IL-2、IL-6及COX2水平及mAlb、UA、Scr、Cys-C水平均较治疗第1天降低(P< 0.05)，见表3。

表3 A组血清炎症指标及肾功能指标变化情况

*与治疗第1天比较，P< 0.05

2.4TNF-α、IL-2、IL-6与肾功能相关性分析GFR与IL-2呈正相关，与TNF-α、IL-6呈负相关；SCr与IL-2呈负相关，与TNF-α、IL-6呈正相关(P< 0.05)。见表5。

表5 TNF-α、IL-2、IL-6与肾功能相关性分析 (r)

*P< 0.05

3 讨论

痛风性关节炎的发生，主要与体内尿酸结石形成导致的机械性关节损伤有关，特别是在合并有自身免疫性或者代谢性疾病的人群中，痛风性关节炎的发病率更高，临床预后更差。痛风性关节炎的发生发展，可以在下列方面影响到患者的远期预后[7，8]：①疾病可以导致关节部位的变形，促进关节畸形、僵硬、结缔组织增生等病理生理改变；②痛风性关节炎的发生，促进了关节功能退行性病变的发生，导致关节功能的丧失。而通过对于痛风性关节炎发病过程中相关生物学机制的研究，可以为抑制关节病变的持续性损害，改善关节功能预后等方面提供积极的临床依据。IL-2、IL-6等，能够在激活ROCH信号通路的同时，促进下游单核细胞对于关节软组织的浸润，促进患者关节周围纤维结缔组织细胞膜完整性损伤等，进而导致关节部位不良预后的发生。近年来基础方面的研究也证实，IL-2、IL-6等炎症因子的激活，能够造成局部组织的免疫紊乱，加剧氧化应激反应，导致痛风性关节炎患者糖皮质激素治疗敏感性的下降[9，10]；COX2能够促进关节腔或者滑膜等组织代谢，从而增加关节外基质的分解或者软骨组织的持续性损害。部分研究认为高表达的COX2或者IL-2及IL-6等，能够促进患者关节软骨基底膜组织的持续性损害，降低关节腔液体的缓冲保护功能[11，12]，但缺乏对于其与痛风性关节炎患者肾脏损伤的关系研究。

本研究发现，在痛风性关节炎患者血清中多种炎症因子表达水平异常，TNF-α、IL-2、IL-6、COX2等炎症因子明显升高，与对照组比较差异有统计学意义，进一步证实TNF-α、IL-2、IL-6及COX2等参与痛风性关节炎的发病，从机制上考虑，不同的因子对于疾病的影响可能与下列几个方面的因素有关：①TNF-α、IL-2及IL-6等炎性因子的异常表达，促进了患者体内局部关节腔内的关节炎的炎症因子富集，加剧了单核细胞或者巨噬细胞等对于关节滑膜上皮组织细胞的损害；②TNF-α、IL-2、IL-6及COX等的高表达，加剧了下游自然杀伤性T淋巴细胞等对于关节软骨组织的损害作用，促进了软骨组织基底膜完整性的破坏。苟静等[13，14]在探讨了112例不同病情的痛风性关节炎患者的体内不同生物学因子的表达过程中发现，TNF-α等的上升幅度可达55%以上，且患者的关节损伤越为严重，关节功能预后越差，相关炎症因子指标的上升越为明显。在急性发作期患者的体内，不同的生物学因子的表达浓度上升更为明显，提示了细胞炎症因子的异常表达与患者的病情具有密切的关系，这可以为临床上评估患者慢性痛风性关节炎急性发作的风险提供依据，并为临床上疾病的治疗预后随访研究提供可靠的参考指标。

在临床上，mAlb、UA、Scr、BUN、Cys-C等指标均是评估患者肾功能损伤的重要指标，肾小球滤过率的下降或者肾小管重吸收功能的损害等，均可以促进体内循环血中不同因子的高表达，加剧mAlb、UA、Scr、BUN、Cys-C等的上升。本研究发现，慢性痛风急性发作患者的TNF-α、IL-2、IL-6及COX2水平及mAlb、UA、Scr、Cys-C在治疗后不同的时间节点都出现明显降低，差异有统计学意义，提示急性发作患者通过控制炎症后，炎症因子水平下降，相应地，其评估肾功能损害的相关指标同样改善。提示细胞炎症因子或者肾功能指标可能在评估痛风患者的病情转归情况过程中具有一定的潜在作用，同时提示肾功能得到了一定的保护，体内炎症因子均得到了一定的抑制。最后，相关关系分析显示，体内的肾功能损伤指标与患者体内的细胞炎症因子的表达具有密切的关系，提示生物学因子如TNF-α、IL-2等可能在加剧肾脏损伤方面发挥了重要作用。Choe等研究证实，痛风患者的尿液呈酸性，而尿酸浓度越高则越容易产生肾结石。由于痛风是嘌呤及尿酸代谢出现障碍而产生，尿酸又属于嘌呤代谢的产物，若患者未及时有效治疗痛风，则其体内的尿酸浓度不算上升，形成结晶体或尿酸盐，沉积于肾小管，产生结石。而患者长期的药物服用会使机体肾小管及肾小球发生实质性的改变，最终引起肾功能障碍[15]。而痛风患者的TNF-α、IL-2、IL-6在进行治疗时均呈现一定幅度的波动，在治疗过程中，肾功能中的GFR与SCr也得到不断改善，有学者认为TNF-α、IL-2、IL-6与肾功能具有一定的相关性[16]。本研究中GFR与IL-2呈正相关，与TNF-α、IL-6均呈负相关；SCr与IL-2呈负相关，与TNF-α、IL-6均呈正相关，均提示患者病情好转，与上述结论基本相符。

本次研究的创新性在于探讨了TNF-α、IL-2等细胞因子在急性及慢性痛风性关节炎患者血清中的差异性表达及相应的肾功能异常变化。综上所述，慢性痛风急性发作期患者血清TNF-α、IL-2、IL-6、COX2的水平升高明显，并且与患者的肾功能损伤具有一定的关系。