左家自然保护区圈养鹿寄生虫感染情况调查与防治※
2019-04-22甄晶博高渊博黄宇男唐艳芳李沐森
●甄晶博 赵 轩 张 冕 高渊博 黄宇男 唐艳芳 曲 琳 李沐森
(吉林农业科技学院动物科技学院 吉林 吉林 132109)
●林安彬(吉林省抚松县林业局 吉林 白山 134500)
我国对鹿的饲养已有两百年的历史,东北地区将鹿茸视为东北三宝之一,且不乏养殖能人与饲养经验。然而鹿对多种寄生虫疾病敏感,常见的寄生虫有绦虫、线虫、球虫及吸虫。寄生虫疾病对鹿的危害不可忽视,它们会对鹿造成以下危害:夺取营养物质、机械性损伤、毒副作用及引入其他病原体。
左家自然保护区属半山区,是长白山余脉向松嫩平原的过渡地带,位于吉林市昌邑区西北部,林地面积众多,有丰富的资源。中国农业科学院特产研究所与吉林农业科技学院动物科技学院联合开发了左家自然保护区4个鹿场,共计养殖鹿1 000多只。通过对寄生虫的调查与防治,有效地了解了鹿感染消化系统寄生虫与体表寄生虫的种类和数量,为左家自然保护区鹿场提供免疫防控计划,制定资料参考,以减少经济损失,提高鹿养殖的经济效益。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验器械 玻璃烧杯、玻璃试管、试管夹、试管架、玻璃棒、胶头滴管、火柴、酒精灯、载玻片、盖玻片、镊子、离心机、光学显微镜、锦纶筛兜、40目金属筛、60目金属筛。
1.1.2 试验试剂 10%的氢氧化钠溶液、饱和蔗糖溶液、50%的甘油水溶液、煤油。
1.1.3 样本的采集 根据左家自然保护区的中国农业科学院特产研究所鹿场、吉林农业科技学院鹿场、左家镇鹿场及小塘村鹿场的养殖环境特点,在2018年6~11月采用自然采集的445只鹿的新鲜粪便以及40多份脱落的体表皮屑和毛发,进行了寄生虫感染状况检查。
1.2 检查方法
1.2.1 消化道寄生虫检查
1.2.1.1 直接涂片检查法。在载玻片上用胶头滴管滴1滴清水或者1滴50%的甘油水溶液,之后用镊子夹取2g鹿的粪便,放置在载玻片上的清水或50%的甘油水溶液内,用镊子将二者混合均匀,再用镊子将其中大的草屑和残渣去除,之后将盖玻片的一端倾斜放置于液滴一端,缓慢地盖在液滴上,以减少气泡的产生,随后将玻片放置于光学显微镜下,用低倍镜观察是否有寄生虫虫卵或幼虫。
1.2.1.2 饱和蔗糖溶液漂浮法。取鹿粪便10g放入玻璃烧杯中,用玻璃棒将其捣碎,随后加入100mL的饱和蔗糖溶液,用玻璃棒搅拌均匀后,将杯中液体倒入放置了40目金属筛的烧杯中,反复2次,再将滤液倒入试管架上的5支试管中,等到试管快满时,用胶头滴管滴加滤液至液面凸起,静置35min左右,用载玻片蘸取凸起的液面,随后立即将载玻片翻转过来,将盖玻片的一端倾斜放置于液滴一端,缓慢地盖在液滴上,以减少气泡的产生,随后将玻片放置于光学显微镜下,用低倍镜观察是否有寄生虫虫卵或幼虫。
1.2.1.3 离心沉淀法。取鹿粪便10g置于玻璃烧杯中,用镊子将粪便弄碎,之后向烧杯中加入100mL清水,用玻璃棒搅拌均匀,将杯中的液体倒入放置了40目金属筛的烧杯中,然后将40目金属筛冲洗干净,放置于干净的烧杯上,再将滤液倾倒其中,如此重复4次。之后用胶头滴管分别向两支离心管内加入滤液至离心管的1/2高度处,将离心管对称放置于离心机中,以2000r/min的功率离心3min。将离心管从离心机中取出,用胶头滴管吸弃掉离心管中的上清液,再向其中加入清水至离心管1/2高度处,将其混合均匀再次离心,反复进行2次,最后用胶头滴管弃去部分上清液,将剩下的上清液和沉淀物吹吸均匀,吸取少量混合液体滴于载玻片上,盖上盖玻片后放置于光学显微镜下,用低倍镜观察其中是否含有寄生虫虫卵或幼虫。
1.2.1.4 锦纶筛兜淘洗法。取鹿粪便10g置于玻璃烧杯中,用玻璃棒将其捣碎,再加入100mL清水,用玻璃棒搅拌均匀,将杯中液体倒入放置了60目金属筛的烧杯中,反复3次后将滤液倒入锦纶筛兜中,然后将锦纶筛兜放置于烧杯中,向烧杯中加入清水,用玻璃棒边搅拌边淘洗,然后将烧杯中的脏水倒掉,再加入清水淘洗,反复多次直至烧杯中的水清澈透明为止。用玻璃棒蘸取尼龙兜下层物质和清水的混合物,滴于载玻片上,之后将盖玻片的一端倾斜放置于液滴一端,缓慢地盖在液滴上,然后放置于光学显微镜下,用低倍镜观察其中是否含有寄生虫虫卵或幼虫。
1.2.2 体表寄生虫检查
1.2.2.1 温水检查法。取少量鹿皮屑浸入盛有45~60℃温水的玻璃皿中,螨虫受热会在水面游动,用镊子夹住放置于载玻片上,固定好后放置于光学显微镜下,用低倍镜观察螨虫。
1.2.2.2 加热法。取鹿皮屑或毛发置于载玻片上,用试管夹夹住载玻片一端,在火焰上慢慢加热至35~40℃,此时螨虫由于受热便会从皮屑中爬出,用镊子夹住放置于载玻片上,将其固定好后置于光学显微镜下,用低倍镜观察螨虫。
1.2.2.3 煤油浸泡法。取少量的鹿皮屑置于载玻片上,用胶头滴管滴一滴煤油于其上,然后加盖上另一片载玻片于其上,用手搓动两片载玻片使皮屑透明,置于光学显微镜下镜检。
1.2.2.4 皮屑溶解法。取少量的鹿皮屑或毛发加入到玻璃试管中,再向玻璃试管中加入适量10%的氢氧化钠溶液,放置于酒精灯火焰上,一边加热一边呈8字形匀速晃动玻璃试管,等待皮屑溶解,之后弃去上清液,用胶头滴管吸取少量沉淀滴于载玻片上,盖上盖玻片后放置于光学显微镜下,用低倍镜检查是否有螨虫或者虫卵。
2 试验结果
2.1 寄生虫虫卵形态特征(见下图)
2.2 通过对鹿毛发和脱落的皮屑检查,没有发现体表寄生虫和蠕形螨的寄生。
2.3 结果分析
检查结果表明,4个鹿场养殖的鹿均患有寄生虫,粪样中的线虫卵有两种,分别为蛔虫卵和捻转血茅线虫卵;吸虫卵有两种,分别为肝片吸虫卵、双腔吸虫卵;绦虫虫卵有两种,分别为曲子宫绦虫卵和贝氏莫尼茨绦虫卵;原虫感染为球虫卵囊一种。各鹿场饲养鹿只寄生虫卵感染情况见表1至表4。
表1 小塘村鹿场鹿寄生虫卵感染情况
表2 左家镇鹿场鹿寄生虫卵感染情况
表3 吉林农业科技学院鹿场鹿寄生虫卵感染情况
表4 中国农业科学院特产研究所鹿场鹿寄生虫卵感染情况
3 分析与讨论
3.1 通过对4个鹿场鹿只粪便进行直接涂片法、饱、蔗糖溶液漂浮法、离心沉淀法和淘洗法检测,及对鹿皮屑采用皮屑溶解法、煤油浸泡法、加热法和温水检查法等方法检测,得出以下结论:4个鹿场均不同程度地被有肝片吸虫、双腔吸虫、捻转血矛线虫、贝氏莫尼茨绦虫、曲子宫绦虫、球虫等寄生虫感染,其中以绦虫感染最为严重,球虫与吸虫次之。因为有些粪便是在地面上采集的,检出的寄生虫卵不一定全是鹿体内排出的。
3.2 从4个鹿场寄生虫感染情况来看,左家镇与小塘村鹿场饲养的鹿寄生虫感染情况较为严重,主要原因是该鹿场有一批小鹿,没及时饲喂驱虫药,也没有进行寄生虫的感染状况监控。吉林农业科技学院鹿场在学校附近,采样方便,采样初期学校刚刚从外地引入一批鹿,没有进行驱虫,寄生虫感染较严重,后来经过给药驱虫,后期寄生虫感染较轻。中国农业科学院特产研究所鹿场养殖规模及存栏数量较大,养殖管理较为完善,并且定期进行驱虫管理,所以检测出的寄生虫感染较少。
4 防治措施
4.1 治疗方案
吸虫、线虫及绦虫等都属于蠕虫,可用其共同的驱虫药丙硫咪唑治疗,每千克体重给药20mg,拌料饲喂。
4.1.4 吸虫 可用三氯苯唑(肝蛭净),每千克体重给药15mg,拌料饲喂。
4.1.2 绦虫 可用吡喹酮每千克体重给药15mg,拌料饲喂。
4.1.3 线虫 可用1%的伊维菌素注射液,以每千克体重0.02mL的剂量皮下注射一次,对线虫有较好的疗效。
4.1.4 球虫 可用氨丙啉,每千克体重给药10~15mg,拌料饲喂,连用4~5d为一个疗程。
4.2 预防措施
4.2.1 每年春、秋季定期驱虫 丙硫咪唑片或伊维菌素对蠕虫病均有较好的治疗效果。可加大驱虫的力度,增加驱虫的次数,并根据鹿场成鹿或幼鹿患有的寄生虫种类进行联合用药。
4.2.2 要做好饲料检验工作 被某些寄生虫污染的饲料可作为寄生虫病传播的载体,因此在检疫过程中发现被寄生虫污染的饲料,应按照有关规定做无害化处理后方可饲喂,或拒绝喂给。
4.2.3 要做好环境卫生工作 鹿的寄生虫随粪便排出体外,会污染环境,需及时清扫鹿舍,并做好定期的笼舍消毒,可有效减少寄生虫感染的概率。粪便要堆积在远离鹿舍的干燥区域,让其发酵以产生生物热用来杀死虫卵。可定期对鹿舍进行火焰消毒,以杀死圈舍内的寄生虫虫卵。
4.2.4 确保无病再合栏 对引进的新鹿先进行隔离观察,确保没有传染性疾病,健康状态良好才可与原先的鹿合栏饲养。