平凉地区女性人乳头瘤病毒亚型与子宫颈病变的关系

夏 苗，拜荣祥

（甘肃省医学院附属医院（平凉市人民医院），甘肃 平凉 744000）

人乳头瘤病毒（Human papilloma virus ,HPV）是一种嗜上皮性且定向感染人体皮肤及黏膜鳞状上皮并可使其发生增生性病变的双链DNA小分子病毒，流行病学及生物学资料已证实HPV感染是子宫颈上皮内病变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）及宫颈癌的主要治病因素[1-3]。宫颈癌是仅次于乳腺癌严重危害女性健康的第二大恶性肿瘤，我国每年新发宫颈癌病例13万余人，占全世界新发病例的28.8%，发病趋于年轻化[4]。研究表明，HPV基因分型具有明显的年龄和地区分布特点，因此，本文回顾性研究平凉地区5336例宫颈上皮细胞HPV感染和基因分型分布情况，分析HPV分型与宫颈病变的相关性，指导本地区的癌前筛查和治疗，为宫颈癌的防治提供较可靠的依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选择在平凉市人民医院妇产科就诊并进行HPV分型检测的5336例患者，年龄14～76岁。其中HPV分型（包括17种高危亚型、9种低危亚型）检测呈阳性者872例，对于阳性者，建议做宫颈活体组织学检查，最终有237例HPV阳性者接受了宫颈活体组织检查。

1.2 方法

1.2.1 标本采集

均由专科医生用生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物后，将宫颈刷置于宫颈口，顺时针旋转5周，将所有标本置于有细胞保存液中，密闭送检病理科。

1.2.2 试剂及仪器

HPV分型检测试剂盒购自港龙生物技术（深圳）有限公司，可检测26种个HPV型别，包括高危型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、53、67、73，低危型：6、11、40、42、43、44、54、55、57；仪器为Hema 3200基因扩增仪。

1.2.3 步骤方法

按照人乳头瘤病毒分析检测试剂盒（基因芯片法）说明书步骤进行DNA提取、PCR扩增、DNA杂交、显色及检测分析。

1.2.4 检测分析

用HPV分型基因芯片检测系统对基因芯片检测、扫描及分析。检测结果（INS）的阳性判断值为11.0，大于或等于11.0判断为阳性，小于11.0判断为阴性。

1.2.5 阴道镜下活检

根据阴道镜下特征及所有信息的综合评判，在阴道镜下对醋酸试验异常区、异常血管区及碘试验阴性区进行宫颈活检术，准确取材。所取标本送病理学检测，以病检结果作为宫颈疾病诊断的金标准。

1.3 统计学方法

所有数据结果由双人进行双录入并做有效性核查，对不一致的数据查阅原始资料进行核实。采用SPSS 13.0统计软件进行数据分析，定性资料用率(百分比%)表示，计数资料采用x2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 研究结果

2.1 人乳头瘤病毒单一感染亚型检测结果

在5336例检查者中收集到HPV分型检测阳性者872例，阳性检出率为16.34%，其中高危型阳性率为13.66%，占阳性标本的83.60%；低危型阳性率为2.68%，占阳性标本的16.40%。常见高危型HPV亚型前5位为HPV16、58、51、18、39，见表1。

表1 HPV单一感染亚型分布

2.2 人乳头瘤病毒感染率在不同年龄段的分布

HPV感染有较明显的年龄分布特点，表现为两个年龄高峰，分别是≤20岁和＞61岁年龄段。其中≤20岁年龄段感染率为37.50%，＞61岁年龄段感染率为27.45%，均高于21～30岁、31～40和41～50岁年龄段（P均＜0.05）；HPV感染率在≤20岁和≥61岁年龄段之间HPV总感染率最高（37.50%），位居第二位的为31～40岁年龄段（29.47%），两者比较具有统计学意义（P＜0.05），详见表2。

表2 HPV感染率在不同年龄段的分布

2.3 宫颈病变检出及不同宫颈病变中HPV亚型分布情况

237例HPV检测阳性者人接受宫颈活体组织检查，宫颈病变检出情况见表3。结果显示，宫颈CINI级阳性检出率为48.1%，位居第一位，在宫颈CINI级病变中常见HPV亚型（前三种）依次为HPV16(14.34%)、HPV18(5.48%)及HPV58(5.48%)。原位癌检出例数13例，均由HPV16感染所致。浸润癌6例，由HPV16及HPV18感染所致。所有宫颈病变中常见HPV亚型第一种为HPV16，第二种为HPV18，第三种为HPV58。

3 讨 论

在女性人群中，宫颈癌是最常见的恶性肿瘤之一，在全世界范围内位居第三[5]。研究表明高危型HPV感染是诱发宫颈上皮内病变及宫颈癌的主要因素[6]，HPV感染子宫颈粘膜后存在以下两种状态[7]，（1）游离状态：HPV-DNA 作为独立的外源性染色体游离于细胞核内，鳞状上皮细胞依然具有分化能力而且能够帮助病毒合成衣鞘蛋白。这是所有亚型HPV感染子宫颈粘膜后都要经历的一过性状态；（2）整合状态：HPV-DNA会整合到宿主细胞染色体的脆性部位，导致HPV病毒基因表达的失调、宿主基因的不稳定，甚至细胞癌基因的激活。HPV整合到人体DNA是子宫颈癌发生的重要环节[8]。

表3 宫颈病变检出情况及不同宫颈病变中HPV亚型分布情况

国际癌症研究中心(fIARC)公布的常见HPV亚型前5位为HPV16、18、45、31及HPV33[9]。我国咸阳地区3573例女性宫颈标本中，共检出HPV阳性标本966例，阳性率为20.04%，高危型常见亚型依次为HPVl6、52、58、18、33[10]。西安市841例女性宫颈标本中，共检出HPV阳性标本639例，阳性率22.49%，高危型常见亚型依次为HPV52、58、16、51、53，低危型以HPV6、11为最多见[11]。本研究结果显示常见HPV感染及亚型分布存在地理差异:平凉地区5336例女性宫颈标本中，共检出HPV阳性标本872例，阳性率为16.34%，高危型常见亚型依次为HPV16、58、51、18、39，低危型以HPV54、55为最多见，总体感染率低于西安及咸阳地区，这可能与人群及地区差异有关，高危型常见感染亚型与国际癌症研究中心及西安咸阳地区相似但不尽相同，这可能与人群地域性和标本取材或研究对象都有一定关系。

本地区HPV感染有较明显的年龄分布特点，≤20岁及≥61岁为两个年龄高峰，≤20岁年龄组高感染率可能与性活动旺盛、卫生条件不良、免疫系统未经致敏等因素有关[12]，而≥61岁者其卵巢功能下降，雌激素水平降低，对外界有害因素的抵抗力减弱，较易发生HPV感染[13]。本研究显示41-50岁年龄组HPV阳性感染率为14.08%，低于≤20岁年龄组及≥61岁年龄组，但是41-50岁年龄组HPV感染数量为327例，总感染率37.50%，位居首位，这可能与此年龄段HPV检测总人数增加有关。

此研究显示，HPV16型与宫颈上皮内病变及宫颈癌密切相关，这表明HPV16在宫颈癌的发生和发展中起着关键性作用。这与相关研究结果一致[14-15]，再次证实了HPV16在宫颈病变发生中的重要性。HPV18和HPV58在宫颈上皮内病变及宫颈癌中位居第2，且HPV16、18、58在各级别宫颈病变中均系优势型别，具有较高的致病性，这3种型别HPV的持续性感染是引起本地就诊患者发生宫颈鳞状上皮内病变及宫颈癌的最主要原因之一，因此应对这3种型别HPV病毒感染高度重视。

通过本次研究，我们了解到了平凉地区女性宫颈人乳头瘤病毒感染状况、亚型及年龄分布特点、宫颈病变中人乳头瘤病毒亚型感染特点，此次调查可帮助建立本地区HPV监测体系，为开展宫颈癌的防治及疫苗的选择提供重要的参考资料和依据。