冠心病患者外周血中CD36表达水平及与Toll样受体4信号的相关性分析

张 震

（右江民族医学院附属医院，广西百色533000）

冠心病（coronary heart disease，CHD）是我国最常见的心血管疾病之一，随着我国老龄化人口的不断扩大，CHD的发病率及死亡率均呈现逐年上升趋势，且发病率逐渐由老年群体转向中青年人群发展，该病已经成为危害人类健康的“第一杀手”[1]。国外研究发现，CD36与单核细胞泡沫化有关，且近年来有学者认为免疫应答在CHD的发生发展中起重要作用，Toll样受体属介导天然免疫的跨膜信号传递受体家族，是联系天然免疫与获得性免疫的桥梁[2]。临床对 CD36、Toll样受体 4（TLR4）与 CHD 相关性研究较多，但对其在冠心病中，CD36与TLR4之间的相关性研究较少，本研究现探讨冠心病患者外周血中CD36表达水平及与TLR4的相关性，报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究经过我院伦理委员会批准，研究对象为150例CHD患者及150例健康体检者，均为我院2014年2月-2017年2月期间所收治，患者均已签署知情同意书，冠心病患者中男74例，女76例，年龄 50-70岁，平均（59.21±5.14）岁，其中急性心肌梗死（AMI）74例，稳定性心绞痛（ASP）44例，不稳定型心绞痛（UAP）32例。健康体检者中男77例，女73例，年龄 51-70岁，平均（59.25±5.17）岁，CHD 患者与健康体检者在性别、年龄等基础信息上无差异（P＞0.05）。

1.2 方 法

1.2.1 试剂与仪器 CD36检测试剂盒由武汉CUSABIO公司提供（批号：V08134635）；酶标仪选择美国赛默飞世尔科技公司的Thermo multiskan MK3。

1.2.2 CD36与TLR4检测 CD36：采集研究对象4mL晨起空腹静脉血，其中AMI于入院当时采集静脉血4mL。置真空采血管中，分离血清后，-20℃保存。采用ELISA法检测CD36，均严格按照试剂盒说明书操作。

TLR4：采集研究对象4mL晨起空腹静脉血，以密度梯度离心法获取外周血白细胞，以外周血白细胞总RNA为模板，引物为上海生工生物工程技术服务有限公司设计，合成的cDNA稀释后，以荧光定量PCR法进行TLR4检测。

1.3 观察指标

探究不同患者CD36、TLR4表达水平，探究CD36、TLR4之间相关性。

1.4 统计学处理

本研究中计量资料表示方法为（均数±标准差），用t检验，计数资料用%表示，使用χ2检验，采用SPSS19.0统计软件，对所有实验结果进行数据分析，以P值是否＜0.05为判断标准。

2 结果

2.1 比较研究对象CD36、TLR4表达

冠心病患者相比健康体检者在CD36、TLR4上显著较高（P＜0.05），且呈 ASP＜UAP＜AMI趋势，AMI在CD36、TLR4上显著比其他类型的CHD患者高（P＜0.05），参考表 1。

表1 比较研究对象CD36、TLR4表达（±s）

表1 比较研究对象CD36、TLR4表达（±s）

注：*表示与健康体检者相比存在显著差异P＜0.05，#表示与ASP相比存在显著差异P＜0.05，&表示与UAP相比存在显著差异 P＜0.05。

组别健康体检者（n=150）ASP（n=44）UAP（n=32）AMI（n=74）F值P值CD36（pg/ml）3.78±0.35#&17.45±1.67*&23.62±2.51*#27.38±2.35*#&4336.75 0.000 TLR4（拷贝/μgRNA）1.27±0.12#&3.74±0.21*&4.29±0.25*#4.97±0.35*#&5343.76 0.000

2.2 相关性

CD36与 TLR4互为正相关（P＜0.05），TLR4升高，CD36也会升高，反之，CD36降低，TLR4也会降低，参考表2。

表2 CD36与TLR4相关性

3 讨 论

冠心病的发病原因至今未明，但唯一确定的是冠状动脉硬化是该病发生的先决条件，若未得到及时的治疗，将增加心脏负担，危急患者生命安全。炎症与动脉粥样硬化的关系正受到人们的广泛关注[3]。

动脉粥样硬化斑块中表达多种脂蛋白受体，CD36就是其中之一，该物质又被称为糖蛋白Ⅳ，能识别、吞噬氧化低密度脂蛋白，是B类清道夫受体家族的一员，使巨噬细胞形成泡沫细胞[4]。CD36广泛存在于巨噬细胞膜上，对脂质的转运内吞和信号传导非常重要，通过病原体结合使巨噬细胞吞噬细菌内毒素、凋亡细胞片段[5]。本次研究显示，CD36在正常动脉壁上的巨噬细胞内表达很低，但随着冠心病病情发展，呈显著上升趋势，这表明CD36不仅参与冠心病的发生发展，且可能在动脉粥样硬化斑块的不稳定及斑块破裂过程中发挥重要作用。近年来研究证实，肺炎衣原体感染与冠心病的发生明显相关，而TLRs家族在诱导病源微生物感染过程中具有重要作用，在诱导相关炎症性损害中具有非常重要的作用。本次研究结果显示，随着冠心病病情发展，TLR4呈显著上升趋势。表明TLR4可能提供了一种潜在的连接脂质、感染和动脉粥样硬化的途径。本次研究结果中，冠心病患者相比健康体检者在CD36、TLR4 上显著较高（P＜0.05），且呈 ASP＜UAP＜AMI趋势，AMI在CD36、TLR4上显著比其他类型的冠心病患者高（P＜0.05），CD36与 TLR4互为正相关，因此，CD36与TLR4均可以作为冠脉粥样斑块不稳定的指标，也可作为判断冠心病严重度的敏感指标。

综上所述，外周血中CD36表达水平及与TLR4在冠心病中呈互为正相关，可作为预测冠心病炎症的2个指标。