北方地区针叶树外生菌根真菌样本的采集与保存

肖巍

(辽宁省沙地治理与利用研究所，辽宁 阜新 123000)

菌根是土壤中高等植物根系与菌根真菌菌丝的结合，是一种常见的植物共生现象。在长期的生存过程中，这不仅有利于菌根真菌的生存，也有利于提高植物在恶劣环境的抵抗力[1]。菌根能扩大宿主植物的根系的吸收面积，增加营养物质的吸收，产生生长素，促进寄主植物的生长，改善植物的根际环境，提高的抗病性[2]。正是需要深入研究的重要基础性工作，通过开展样品采集和保存，收集相关的数据，为相关研究奠定基础。

1 外生菌根的调查

1.1 一般调查

在一定区域内，当原始资料相对较少且对菌根状况不了解的情况下，通常先进行一般调查。调查时间一般选在雨季初期，6-8月是林地内菌根真菌子实体大量出现的季节。调查内容主要包括菌根菌种类、多度以及树种感染菌根菌的情况等。对生境情况也要做详尽的记录，如植被情况、立地条件、宿主植物等。一般调查法随机性较强，调查范围大且具有一定的代表性。

1.2 重点调查

在一般调查基础上，可以针对具体问题进行重点调查。如菌根真菌在生态系统演替中的变化规律、不同季节菌根真菌的侵染情况等。

1.2.1 设置标准地 重点调查需要根据具体情况设置标准地。如果面积较小，可进行全面踏查。如果面积较大，可设置若干个样方。一般情况下，标准地面积应占调查总面积1%。每个样地需要设立标志，编排序号。

1.2.2 定期进行调查 重点调查需要定期进行。子实体大多数在雨季生长，秋季降雨减少后停止生长。调查时间一般在春季开始观测，秋季停止观测，期间每隔一定时间调查或观测取样一次。非雨季可以在15～20 d观测一次，由于雨季内种类变化较大，可以适当缩短，如5～10 d观测一次。

1.2.3 调查内容 一般应包括真菌种类、生态习性、生长情况、多度等。与其相关的地形地貌、土壤环境、植被情况、林分组成等也应一一记录，并做好现场影像资料的记录。如真菌种类调查，则应重点记录真菌种类，如季节性变化观测则重点记录种类变化及生长情况。

2 菌根标本的采集

标本是研究工作最基本、最重要的实物资料之一，标本的质量对研究工作有着重要意义。

2.1 菌根标本的采集

菌根样品的采集可用铁锹或土壤刀挖取，也可根据具体情况用土钻或者其他特制取样器取样。取出的根系会携带大量泥土，可用小刀将表面泥土剥去，需要小心处理，切忌碰掉菌根，用水浸泡或者漂洗。清洗好的菌根标本可立即进行观察记录，也可装入塑料袋带回室内观测。塑料袋内要有松软保湿的填充物或者充气保存，不至于挤压损坏和萎蔫。

2.2 菌根菌标本的采集

菌根真菌子实体通常具有较高的含水量，子实体组织易于受到破坏[3]。而子实体的结构等特征又是重要的分类依据，所以要求采集完整、有代表性的子实体。对于带有菌索的菌类，应继续进行追踪检查。对采集到的标本要及时处理，以防标本腐烂或虫蛀。首先观察和记录，并采取现场进行影像记录，以准确记录其形态特征。仔细去除样品表面的泥沙后，表面附吸水纸，并把它放入纸袋，不要水洗。若后续进行分离培养，采集时要酌情增加样本数量。也可携带装好培养基的试管，现场进行分离保存。

3 菌根标本的保存

菌根标本可在恒温50～60 ℃条件下干燥12～24 h后，取出烘干标本，用塑料薄膜压制，或按蜡叶标本制作法用台纸保存。要注意保护根部的菌根，以免脱落。子实体标本需要用快速烘干法，以尽可能保持原状。

对于微观结构观测，可以制作切片标本。对于菌根真菌有进一步生理研究，可以分离子实体到相应培养基中，分离提纯以保存菌种，待下一步研究使用。

4 小结与讨论

4.1 调查工作很重要，可以了解掌握菌根真菌资源以及对生境的敏感变化情况；重视采集和保存工作，用好方式方法，做好工具选择、温湿度控制等每个细节，以确保菌根真菌标本的质量，是菌根研究的基本技能。

4.2 随着对菌根研究的深入，菌根技术在林业生产中的应用越来越受到人们的高度重视，如引种育苗、逆境造林等。在我国北方部分地区，生态脆弱，气候干旱，土壤贫瘠，而油松、红松、落叶松、樟子松等松科树种是我国北方的主要针叶造林树种。就立地条件而言，不同的立地条件适合于一定种类菌种的生长；就树种而言，不同的树种适合使用不同的菌种。所以，需要进一步加强菌根技术研究以及在林业中的应用推广，进而更加有效地解决生产实际中的问题。