2017年四川省家禽H7N9流感调查

陈斌，邵靓，张毅，裴超信，丁梦碟，梁璐琪

（四川省动物疫病预防控制中心，四川 成都 610041）

1 调查目的

H7N9流感是一种新型甲型流感，2013年3月底在上海和安徽两地首次发现[1]，是全球首次发现的新亚型流感病毒[2]。该病毒可感染人，早期出现发热等上呼吸道临床症状，后期可致人死亡，目前尚未证实该病毒是否具有人传染人的特性[3]。2016年底和2017年初，该病毒发生变异，出现了对禽致死率很高的高致病性毒株，给养禽业造成重大损失[4]。为进一步了解H7N9流感在四川省禽间流行和变异的情况，我们在全省范围内开展了H7N9流感病毒的监测和流行病学调查，为科学防控和预防人感染H7N9流感提供重要的预警信息[5]。

表1 全省各市州H7N9调查情况汇总

2 调查方法

2.1 调查范围 2017年四川省有人感染H7N9流感病例的地区（14个市州）和未发现人感染H7N9流感病例的地区（7个市州）。全省各市州监测情况见表1。

2.2 调查对象 规模养禽场、活禽交易市场（含农贸市场和中转场），野鸟栖息地，散养户。

2.3 采样数量与要求 每个场（点）同时采集血清和咽喉/泄殖腔拭子不少于30份（存栏低于30羽的全采）；在大型农贸市场采集环境样品和运输笼具上的粪污样品30份，小型农贸市场每个摊位采集环境样品10份。咽喉/泄殖腔拭子放于同一管中，保存于病毒样品保存液中（样品保存液含青、链霉素各500 U/mL、10%甘油、0.01 M pH值7.4的PBS或5%DMEM）。

2.4 血清学检测 按照《高致病性禽流感诊断技术》[6]，采用血凝抑制（HI）试验检测 H7流感抗体。

2.5 病原学检测 按照《禽流感病毒RT-PCR检测方法》[7]，检测H7N9病毒核酸。

2.6 阳性样品复核及致病性、同源性分析 检出的H7N9病毒核酸阳性样本送国家禽流感参考实验室进行复核及序列同源性分析，以我国2013年报道的2株H7N9毒株为参考株（上海株4664T和浙江株PA-DTID-ZJU01）进行比较。

3 调查结果

3.1 调查数量 共调查1827个场点，采集样本82 362份，其中血清学样本45 451份，病原学样本36911份。调查样本种类及数量见表2。

表2 H7N9调查样本种类及数量汇总

3.2 调查结果 采集血清样本45451份，检出H7流感抗体阳性79份，阳性率0.17%。部分阳性血清抗体滴度较高，但对应病原学检测均为阴性。

采集病原学样本36 911份，其中含环境水样、粪样等6800份，共检出病原学阳性26份，病原学阳性率0.07%（26/36911）。病原学阳性样本均来自于6个农贸市场和2个家禽中转场的环境中（表 3）。

表3 H7N9调查场点汇总

3.3 阳性样品复核及致病性、同源性分析 根据国家禽流感参考实验室复核，26份疑似样品均确定为H7N9阳性，这26份阳性样品均来自6个农贸市场和2个中转场，其中2个中转场为同一经销商所有。26份阳性样本共检出7株H7N9病毒毒株，其中成都2株、南充2株、阿坝2株和自贡（中转场）1株。7株H7N9病毒核酸的测序结果显示：7个四川毒株两两间相比，HA基因同源性为 98.4%～99.9%，NA基因同源性为 96.9%～100%，同源性非常高，推测可能来自同一毒株。与2013年浙江、上海H7N9毒株相比，HA基因同源性为 97.3%～97.7%，NA基因同源性为97.1%～98.1%，同源性也较高，不排除四川省H7N9流感病毒和2013年外省病毒为同一毒株的可能。所有毒株均未发现裂解位点有氨基酸增加，属于低致病性H7N9流感病毒。

4 讨论分析

从调查数据来看，H7N9血清学阳性率仅为0.17%，个别抗体滴度较高，离散度较大，但均未检测到H7N9病毒，推测可能曾经感染过。经过流行病学调查，我们发现血清学阳性的养殖场多分布在水网密集地区、候鸟停留水域或无防鸟措施的地方，不排除野鸟迁徙过程中接触感染导致。

从病原学检测结果来看，H7N9病原学阳性率仅为0.07%（26/36911），均为环境样品，养殖场中未检出病毒核酸阳性，提示市场环境中的H7N9病毒可能是导致人感染发病的重要隐患。同时，检出的环境H7N9病毒阳性样本与2013年我国首次发现的H7N9毒株高度同源，未发现裂解位点有氨基酸增加，无毒力变异现象，均属于低致病性H7N9流感病毒。

由于四川省存在活禽销售和消费的传统模式，个别地方还有将未销售的活禽暂养在市场或中转场的习惯，这极易导致交叉感染，造成“中转场-养殖场”的循环传播，也极易加快H7N9流感病毒的重组和变异，给禽间H7N9流感的防控带来较大风险。因此，必须进一步加强活禽市场的防疫管理措施，切实阻断H7N9病毒通过市场环节在禽间和人间的感染和传播。