文心兰的茎尖及花梗组织培养和快速繁殖探讨

马 兰

（西安文理学院，生物与环境工程学院，陕西 西安 710065）

文心兰别称舞女兰，属兰科文心兰属，开花周期较长，外形娇小美观、花姿优雅，花香淡雅清新。文心兰一般采用常规的分株方法进行花种繁殖，但是繁殖速度较慢，受限于生产数量，而不能规模化生产[1]，不能满足顾客及市场的需求。所以，我们采用对文心兰茎尖及花梗组织培养和快速繁殖的方法，在较短时间内繁殖生产出大量的配种苗木。并通过后期对苗木的养护与细心栽培，提升苗木质量，从而使文心兰在数量生产的同时保证较高的质量，从而获得社会效益与生产方面的经济效益。

1 材料与方法

1.1 出材料

供试材料选取自蝴蝶兰2年生花梗，时间为2月。

1.2 试验方法

剪取整枝花梗，首先应用毛刷沾肥皂水之后刷洗花梗的表面，然后应用自来水反复冲洗，并且将花梗切成数段。在此基础上用0.1%氯化汞溶液进行表面灭菌，持续10min，用无菌水反复冲洗3次。花梗剪为2cm长带腋芽，基部往下插入到MS+BA5培养基当中，设定条件28℃、1000x、光照12h/d。蝴蝶兰叶片培养之后将丛生芽切成8mm×8mm，基本培养基1/3MS+Hyponex5g/L，添加 KT 以及 NAA，条件 23℃、800lx、光照12/d。

蝴蝶兰茎尖以及腋芽培养方面，剥取160d腋芽以及茎尖3mm，接种成分：培养基MS添加BA、椰乳。原球茎培养由叶片、腋芽生成的原球茎，在切成小块之后应用增殖培养基培养。本试验应用的原球茎均粒径为3mm。培养基是1/3MS+BA2+KT0.5++椰乳200mL。条件为23℃、1000x、光照12h/d 1当原球茎顶端长出小叶后应用生根培养基完成生根培养。

2 结果与分析

蝴蝶兰幼叶不同位置分化原球茎能力不同。在接种80d后之后数据见表1。幼叶原球茎能力整叶优于片叶,叶中优于叶基,叶尖最差。原因推测是受外植体营养物质以及发育水平影响。

试验结果提示，激素用量为KT10以及NAA0.1时，分化率为55%，激素水平差距越大，分化率越低，具体见表2。因此在叶片培养中，激素配比以及用量有重要意义。

在20℃时，光培养或者暗培养，叶片都无法伸出原球茎，具体见表3。

表1 培养基中6-BA浓度对文心兰苗木茎尖和花梗外植体分化繁殖所需天数的影响（单位：d）

表2 6-BA浓度对于文心兰苗木继代增殖繁育量的影响

表3 温度、光照对原球茎形成的影响（%）

3 结论

在文心兰的培养过程中需要注重对肥料、激素的使用以及病虫害的防治。可以采取以下2种措施：（1）控制苗木水分。成熟开花期的文心兰花茎部积累了大量的水分以及养分来供给自身下一步进行生长与繁殖的需求，所以这个时间段应该尽量减少浇水次数。（2）激素的使用。在大约8月份文心兰花朵败落之前，将花茎基部7～15cm外剪除，并用1.0%～1.5%的6-BA和0.120%～0.20%的GA混合使用涂抹在花梗的切口处。另外，在文心兰的培育过程中常见的病症有软腐病、炭疽病等，下面针对病症给出防治措施。

（1）软腐病。在软腐病的初期，文心兰叶片上呈现出水渍状的斑点，叶肉组织表面充水，并且表面呈现透明状，之后斑点范围扩大，叶肉腐烂，严重时，导致植株死亡。针对这种病症应该及时剪除出现斑点的叶片，并且在切口处涂抹木炭粉进行消毒处理。

（2）炭疽病。这种病症一般出现在花心兰的花瓣上，由于通风不良而引起炭疽病的发生，在通风环境良好的环境下由于夜间温度的突然降低，也会增加炭疽病的发病率。具体的防治措施是加强通风，提高植株的夜间温度，合理降低湿度，加强光照，喷洒多菌灵500倍液进行预防。

不同的兰科品种对于培养基的选择种类存在着很大区别，但同时它们有着共同的特点，具体表现为：所属幼苗继代增值与苗木生根所需要的肥料种类与激素的浓度和种类组合大致相同，可以持续使用同样的培养基对其幼苗进行生长与繁殖处理。可以在接入原球茎后根据相同时间内的芽与原球茎的体积比的比值作为进行培养基调配的主要指标。从繁殖试验中可以看出适当的6-BA培养基溶液浓度可以促进文心兰芽的快速繁殖与生长；同时抑制原球茎数量的增长，所以在实际的文心兰茎尖以及花梗组织的快速繁殖与培养过程中，应该结合适当浓度6-BA培养基的使用，保证幼苗繁育的数量与质量。在文心兰幼苗生长初期由于茎部及叶片需要快速生长，此时在植株内的营养与水分大量流失，所以需要及时对植株进行水分补充，同时施加具有高氮含量的化肥，保障茎叶的快速生长；在花期，由于本身茎叶已经生长健全，此时注意对植株内部水分的保留，尽量减少植株的浇灌次数，此时使用含磷、钾量较高的化肥，减少含氮化肥的使用，从而促进花瓣的开放；在文心兰幼苗的培育过程中同样要注意对植株病虫害的防治措施，在此方面多采用药剂防护与剪除茎叶的方法。在文心兰的茎尖及花梗组织的培养与快速繁殖过程中，需要将继代植株放入适量浓度的6-BA培养基中进行培育繁殖，在后期的生长过程中应该加以细心呵护，从而保证文心兰植株繁殖的数量与质量。