金银花等多味中药对鸡胚中新城疫病毒复制的抑制效果研究

乔月琴

（东台市动物卫生监督所，江苏 东台 224200）

鸡新城疫病又称亚洲鸡瘟，由新城疫病毒引起，家禽发病后致死率较高，给养殖户造成重大重大的经济损失。中草药具有良好的抑菌能力，阻断病毒的吸附、穿入、复制、转染等环节起到直接抗病毒作用，还可调动机体的应激能力、提高机体免疫功能和抗病防御机能。王世英，张登荣等人研究表明中草药对新城疫疾病的预防有一定作用，赵永福，吴达琪以及陈松焕等人在临床实践中应用中草药治疗鸡新城疫疾病也得到了很好的作用。

中药一般副作用较小，不易产生抗药性，且在机体内残留小、对环境污染小。笔者希望通过中草药对鸡胚中NDV复制的抑制实验，来进一步证实中草药对NDV的抑制作用，为临床上预防和治疗提供更为有力度参考依据。

1 实验方法

1.1 试剂配置

1.1.1 抗凝剂称取枸橼酸钠3.21g，加去离子水溶解到50ml烧杯中，最后定容到100ml。高温高压灭菌后室温或4℃保存。

1.1.2 PBS KH2PO40.24g，Na2HPO41.44g，NaCl 8g，KCl 0.2g，加去离子水约800ml充分搅拌溶解，后加入浓盐酸调pH至7.4，最后定容到1L。高温高压灭菌后室温或4℃保存。

1.1.3 1%鸡红细胞吸入抗凝剂约1ml的灭菌采血器，分别采集3只健康成年公鸡约5ml，1200转/min离心15min，PBS洗涤3次，去白细胞等以彻底洗净红细胞。准确观察刻度离心管中红细胞体积，加入99倍体积的PBS，配成1%鸡红细胞，4℃保存，备用。

1.1.4 中草药液的制备 分别将金银花、板兰根、连翘、黄芩加水适量煎煮，煮沸20min后，过滤，再以煮沸蒸发法浓缩成终浓度为每毫升含生药1g的药液，高压灭菌，备用。

1.1.5 制备病毒液 将NDV用PBS液作1∶5稀释，并加入青、链霉素各1000ū/ml，放置4℃作用1h，备用。

1.2 实验分组和接种

NDV强毒组； NDV强毒+阳性血清组；NDV强毒+药液组；中草药液对照组；PBS对照组

表1 各试验组鸡胚死亡情况

1.3 培养和血凝试验

鸡胚孵化温度36℃，孵化湿度55%。每12h照蛋一次，并记录鸡胚死亡情况，直到108h试验结束。

无菌收集各试验组所有鸡胚尿囊液，按微量凝集法检测每组鸡胚尿囊液内病毒的血凝效价。记录各实验组尿囊液血凝价，并计算其平均值。

2 结果

2.1 各试验组鸡胚死亡情况

实验结果表明黄芩对病毒复制抑制效果极显著，金银花和板兰根的抑制效果次之，连翘最差（见表1）。

2.2 不同中草药对鸡胚尿囊液中NDV血凝效价的影响

结果显示，尿囊液中的病毒含量显著低于强毒组表明金银花、板兰根、黄芩和连翘对病毒的复制都有很强的抑制作用（见表2）。

3 小结

实验结果能够表明中草药在阻断病毒的吸附、穿入、复制、转染等环节起到直接杀灭病毒的作用。临床应用中结合中医清热解毒、凉血冷血和西医的组织修复，消炎止血等理念，应该可以提高新城疫疫病的治疗效果。

表2 不同中草药对鸡胚尿囊液中NDV血凝效价的影响