GSH和AsA引发对混合盐处理敖汉苜蓿种子发芽和幼苗生长的影响

毛培胜，张 晔，赵美琦，毛春力，韩 旭，艾尔肯·达吾提

(1.中国农业大学草业科学系，草业科学北京市重点实验室，北京 100193；2.河北省承德市国营鱼儿山牧场，河北 承德 068359；3.新疆草原总站，新疆 乌鲁木齐 830049)

随着我国现代草业生产规模和草食家畜饲养水平的迅速提高，尤其是振兴奶业苜蓿发展行动计划的实施，紫花苜蓿(Medicago sativa)在我国东北、华北和西北地区的种植规模也迅速扩大，但种植地区土壤盐碱危害对于苜蓿草地成功建植和牧草高产稳产带来一定风险.我国各类盐碱地面积总计9913万hm2，约占世界盐渍地总面积的10%，主要分布于西北、华北和东北的干旱和半干旱地区[1].此外，在不同地区土壤盐碱含量和类型也不相同，主要含有 NaCl、Na2SO4、NaHCO3、Na2CO3和钾盐.我国内陆地区的盐碱地通常是中性盐和碱性盐混合存在，而且以NaCl、Na2SO4等为主的中性盐胁迫与以NaHCO3、Na2CO3等为主的碱性盐胁迫有着本质的不同，碱性盐胁迫比中性盐胁迫具有更大的作用[2].

敖汉苜蓿(M.sativa cv.Aohan)是在20世纪50年代由甘肃省引种到内蒙古赤峰市敖汉旗种植，经过多年的栽培驯化，成为适应当地气候土壤条件的一个地方品种，具有抗旱、抗寒、抗风沙、耐瘠薄等抗逆性[3-4].苜蓿品种耐盐性研究表明，随着NaCl浓度的不断增加，对苜蓿种子萌发胁迫作用明显，种子发芽率下降明显，并且敖汉苜蓿耐盐性最弱[5-6].但在不同浓度 NaCl、NaHCO3与 NaCl、Na2SO4、NaHCO3、Na2CO3混合盐处理中，敖汉苜蓿的耐盐性表现也不相同[7-8].因此，研究掌握混合盐对苜蓿种子萌发的作用规律，改善种子萌发的抗逆性对于敖汉苜蓿的种植和推广具有积极意义.种子引发处理可以加快种子的萌发速率，增强种子活力，提高幼苗抗逆性.已有研究利用KNO3-KH2PO3、水、PEG-6000、KNO3、CaCl2和 GA3进行紫花苜蓿种子引发，比较分析在NaCl胁迫下的种子萌发和幼苗生长规律[9-10].但采用抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸(AsA)进行种子引发，探讨增强盐胁迫条件下种子萌发的相关研究却很少.本试验采用敖汉苜蓿种子进行GSH和AsA引发，研究NaCl、Na2SO4、NaHCO3、Na2CO3混合盐处理对种子发芽和幼苗生长特性的影响，探索适宜的抗氧化剂在改善盐碱胁迫的作用效果，为促进种子萌发的耐盐性提供依据和指导.

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验材料为敖汉苜蓿种子(表1)，2015年收获于内蒙古赤峰市敖汉旗.

表1 敖汉苜蓿种子样品信息Table 1 The information of Aohan alfalfa seeds sample

1.2 试验设计与处理

选取均匀一致的敖汉苜蓿种子进行引发处理，AsA溶液浓度分别为2、4 mmol·L-1，GSH溶液浓度分别为0.25、0.50 mmol·L-1.选取100粒种子，重复4次，在4℃黑暗下，分别在15 ml上述引发溶液中浸泡6 h、12 h.浸泡结束后，用蒸馏水快速冲洗种子10次，用滤纸将种子表面的水分吸干，然后回干至种子原始含水量，作为试验材料.

盐胁迫处理采用混合盐溶液和碱性盐溶液.将NaCl、Na2SO4、NaHCO3、Na2CO3粉末按照 1：1：1：1 的摩尔比混合，配制成100mL混合盐溶液，设置2个浓度，依次为 25、50 mmol·L-1，分别记为 25S、50S(表2).NaHCO3、Na2CO3粉末按照 1：1 的摩尔比混合，配制成100mL碱溶液，设置2个浓度，依次为25、50 mmol·L-1，分别记为 25J、50J，对照为 0 mmol·L-1，记为CK(表2).

表2 盐溶液的盐分组成、摩尔比及pHTable 2 Salt composition，molar ratio and pH of solutions for salt mixture

1.3 发芽试验

参照牧草种子检验规程GB/T 2930.4—2001，选取均匀饱满一致的紫花苜蓿种子，将其放入置有3层滤纸的培养皿(规格为11.5 cm×11.5 cm)中，每皿放置100粒，重复4次.将培养皿置于光照培养箱(GXZ-300A)中，在20℃恒温、光照8 h和黑暗16 h条件下培养.试验中，每个培养皿加入15 mL相应盐溶液，并采取称重的方法保持溶液浓度不变.初次计数为第4 d，末次计数为第10 d，每日记录胚根伸出种皮2 mm的种子数，最终统计正常种苗数、每日新发芽的种子数(胚根伸出种皮至少2 mm)，按以下公式计算种子发芽率、平均发芽时间.

发芽率＝(发芽期间全部正常种苗数/供试种子数)×100%

平均发芽时间(d)＝∑nt/∑n

其中，n为在时间t时新发芽种子数(胚根伸出种皮至少2 mm)，t为从设置发芽开始的时间(d).

1.4 种苗生长指标测定

发芽10 d结束后，每个重复随机选取20株种苗测量种苗长度(cm)和鲜重(g)，重复4次.

1.5 数据统计分析

试验数据通过使用SPSS 13.0进行单因素方差分析(ANOVA)后做平均值多重比较(Duncan)，显著水平为0.05.

2 结果与分析

2.1 GSH和AsA引发对盐溶液处理胁迫敖汉苜蓿种子发芽率的影响

通过GSH和AsA引发，苜蓿种子经盐溶液处理后测定结果表明(表3)，种子发芽率变化受引发浓度和引发时间的影响，但GSH引发和AsA引发种子发芽率对于盐溶液处理效果不同.

当GSH 引发6 h 时，0.25、0.50 mmol·L-1GSH 引发种子发芽率均在盐溶液处理25S最高，处理50J种子发芽率最低，且盐溶液处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理(25J和50J)比相应的混合盐处理(25S和50S)显著(P＜0.05)抑制种子的发芽率，尤其是处理 50J平均发芽率下降 47%.此外，与0.25mmol·L-1GSH 引发相比，0.50 mmol·L-1GSH 引发可以显著(P＜0.05)提高处理25S和50J种子的发芽率.当AsA引发6 h时，2、4mmol·L-1AsA引发种子发芽率均在盐溶液处理25J最高，处理50J种子发芽率最低，且盐溶液处理间差异显著(P＜0.05)，只有处理25S与CK种子发芽率没有显著差异(P＞0.05).2mmol·L-1AsA引发种子发芽率在处理50S和50J时显著(P＜0.05)低于处理25J，下降了58%，且处理50S和50J间种子发芽率没有显著差异(P＞0.05).4 mmol·L-1AsA引发种子发芽率虽然在处理50S和50J时显著(P＜0.05)低于处理25J，但50S处理种子发芽率仅下降了5%，50J处理则下降了57%.此外，与2 mmol·L-1AsA引发相比，4 mmol·L-1AsA引发可以显著(P＜0.05)提高CK、处理25S和50S种子的发芽率.

当 GSH 引发12 h时，0.25、0.50 mmol·L-1GSH引发种子发芽率均在CK最高，处理50J种子发芽率最低，且盐溶液处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理(25J和50J)比相应的混合盐处理(25S和50S)显著(P＜0.05)抑制种子的发芽率，其中处理50J平均发芽率下降20%.此外，与0.25 mmol·L-1GSH引发相比，0.50 mmol·L-1GSH引发可以显著(P＜0.05)提高处理25J种子的发芽率.当AsA引发12 h时，2、4 mmol·L-1AsA引发种子发芽率均在盐溶液处理25S最高，处理50J种子发芽率最低.碱性盐处理(25J和50J)比相应的混合盐处理(25S和50S)显著(P＜0.05)抑制种子的发芽率.2 mmol·L-1AsA引发种子发芽率在处理50S和50J间没有显著差异(P＞0.05).4 mmol·L-1AsA引发种子发芽率下降缓慢，在处理50J时发芽率仍高于60%.此外，与2 mmol·L-1AsA引发相比，4 mmol·L-1AsA引发可以显著(P＜0.05)提高处理25S和50S、50J种子的发芽率.

通过比较不同引发时间各盐处理种子发芽率结果(表3)，与引发6 h相比，GSH引发12 h后处理50J的种子发芽率显著(P＜0.05)提高，而处理25S、25J和50S的种子发芽率显著(P＜0.05)下降.AsA引发12 h后处理50J的种子发芽率显著(P＜0.05)提高，处理25J种子发芽率显著(P＜0.05)下降，但在处理50S中对于引发浓度的反应正好相反.GSH和AsA引发12 h可以有效缓解高pH碱性盐的胁迫.

表3 GSH和ASA引发对盐胁迫敖汉苜蓿种子发芽率(%)的影响Table 3 Effects of GSH and AsA priming on germination percentage(%)of Aohan alfalfa seeds under different saline treatments

2.2 GSH和AsA引发对盐溶液处理敖汉苜蓿种子平均发芽时间(MGT)的影响

通过GSH和AsA引发，苜蓿种子经盐溶液处理后测定结果表明(表4)，种子MGT变化受引发浓度和引发时间的影响，呈现类似的变化规律.

当GSH 引发6 h 时，0.25、0.50 mmol·L-1GSH 引发种子MGT均在盐溶液处理50J达到最长，CK种子MGT最短，与其他盐溶液处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理50J种子MGT却比混合盐处理50S显著(P＜0.05)延长，但在0.50 mmol·L-1GSH引发时处理25J种子MGT比处理25S显著(P＜0.05)缩短.此外，与0.25 mmol·L-1GSH引发相比，0.50 mmol·L-1GSH引发可以显著(P＜0.05)缩短处理25J种子的MGT.当 AsA 引发6 h时，2、4 mmol·L-1AsA引发种子MGT均在盐溶液处理50J最长，CK种子最短，且盐溶液处理50S和50J与其他处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理50J种子MGT却比混合盐处理50S显著(P＜0.05)延长，但在4 mmol·L-1AsA引发时处理25J种子MGT比处理25S显著(P＜0.05)延长.此外，与2 mmol·L-1AsA引发相比，4 mmol·L-1AsA引发可以显著(P＜0.05)缩短处理25S、50S和50J种子的MGT.

当 GSH 引发12 h时，0.25、0.50 mmol·L-1GSH引发种子MGT均在盐溶液处理50J达到最长，CK种子MGT最短，且各盐溶液处理间MGT差异显著(P＜0.05).碱性盐处理25J、50J种子MGT却比混合盐处理25S、50S显著(P＜0.05)延长.此外，与0.25 mmol·L-1GSH引发相比，0.50 mmol·L-1GSH引发对种子MGT没有显著(P＞0.05)影响.当AsA引发12 h时，2、4 mmol·L-1AsA引发种子MGT均在盐溶液处理50J最长，CK种子最短，且盐溶液处理50S和50J种子MGT差异显著(P＜0.05)，但处理25S和25J间种子MGT无显著(P＞0.05)差异.此外，与2 mmol·L-1AsA引发相比，4 mmol·L-1AsA引发可以显著(P＜0.05)缩短处理25S、50S种子的MGT.

通过比较不同引发时间各盐处理种子MGT结果(表3)，与引发6 h相比，GSH引发12 h后处理50S和50J种子MGT显著(P＜0.05)延长，而处理25S、25J种子MGT显著(P＜0.05)缩短.AsA引发12 h后处理50S和50J种子MGT显著(P＜0.05)延长，而处理25S、25J种子MGT显著(P＜0.05)缩短.GSH和AsA引发12 h可以有效缓解低浓度混合盐的胁迫.

表4 GSH和ASA引发对盐胁迫敖汉苜蓿种子平均发芽时间(d)的影响Table 4 Effects of GSH and ASA priming on mean germination time(d)of Aohan alfalfa seeds under different saline treatments

2.3 GSH和AsA引发对盐溶液处理敖汉苜蓿种苗长度的影响

通过GSH和AsA引发，苜蓿种子经盐溶液处理后测定结果表明(表5)，种苗长度变化受引发浓度和引发时间的影响，呈现类似的变化规律.

当GSH 引发6 h 时，0.25、0.50 mmol·L-1GSH 引发种子的种苗长度均在CK中达到最长，处理50J种苗长度最短，与其他盐溶液处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理25J、50J种苗长度均比混合盐处理25S、50S显著(P＜0.05)缩短.此外，与0.25 mmol·L-1GSH引发相比，0.50 mmol·L-1GSH引发可以显著(P＜0.05)延长处理25S、25J和CK种子的种苗长度.当AsA引发6 h时，2、4 mmol·L-1AsA引发种子的种苗长度均在在CK中达到最长，处理50J种苗长度最短，与其他盐溶液处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理25J、50J种苗长度均比混合盐处理25S、50S显著(P＜0.05)缩短.此外，与2 mmol·L-1AsA引发相比，4 mmol·L-1AsA引发可以显著(P＜0.05)延长处理50S和CK种子的种苗长度.

当 GSH 引发12 h时，0.25、0.50 mmol·L-1GSH引发种子的种苗长度变化与引发6 h相似，均在CK中达到最长，处理50J种苗长度最短，与其他盐溶液处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理25J、50J种苗长度均比混合盐处理25S、50S显著(P＜0.05)缩短.此外，与 0.25 mmol·L-1GSH引发相比，0.50 mmol·L-1GSH引发可以显著(P＜0.05)延长处理25S和CK种子的种苗长度.当AsA引发12 h时，2、4 mmol·L-1AsA引发种子的种苗长度变化与引发6 h相似，均在在CK中达到最长，处理50J种苗长度最短，与其他盐溶液处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理25J、50J种苗长度均比混合盐处理25S、50S显著(P＜0.05)缩短.此外，与2 mmol·L-1AsA引发相比，4 mmol·L-1AsA引发可以显著(P＜0.05)延长处理25S、25J、50S和CK种子的种苗长度.

通过比较不同引发时间各盐处理种子的种苗长度结果(表5)，与引发6 h相比，0.25 mmol·L-1GSH引发12 h后各处理种苗长度显著(P＜0.05)延长，而0.50 mmol·L-1GSH引发种子仅在处理50S、50J和CK中种苗长度显著(P＜0.05)延长.4 mmol·L-1AsA引发12 h后，除了处理25S外，各处理种苗长度显著(P＜0.05)延长.2 mmol·L-1AsA引发12 h后，除了处理25J外，各处理种苗长度显著(P＜0.05)延长.GSH和AsA引发12 h可以有效促进高浓度混合盐胁迫后的种苗生长.

表5 GSH和ASA引发对盐胁迫敖汉苜蓿种苗长度(cm)的影响Table 5 Effects of GSH and ASA priming on seedling length(cm)of Aohan alfalfa under different saline treatments

2.4 GSH和AsA引发对盐溶液处理敖汉苜蓿种苗鲜重的影响

通过GSH和AsA引发，苜蓿种子经盐溶液处理后测定结果表明(表6)，种苗鲜重变化受引发浓度和引发时间的影响，呈现不同的变化规律.

当GSH 引发6 h 时，0.25、0.50 mmol·L-1GSH 引发种子的种苗鲜重均在CK中达到最高，处理50J种苗鲜重最低，除了处理25J和50S外，各盐溶液处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理25J、50J种苗鲜重均比混合盐处理25S、50S显著(P＜0.05)降低.此外，与 0.25 mmol·L-1GSH 引发相比，0.50 mmol·L-1GSH引发可以显著(P＜0.05)提高处理25S、25J种子的种苗鲜重.当AsA引发6 h时，2、4 mmol·L-1AsA引发种子的种苗鲜重均在在CK中达到最高，处理50J种苗鲜重最低，除了处理50S和50J外，各盐溶液处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理50J种苗鲜重比混合盐处理50S显著(P＜0.05)降低.此外，与2 mmol·L-1AsA引发相比，4 mmol·L-1AsA引发仅可以显著(P＜0.05)提高处理50J种子的种苗鲜重.

当 GSH 引发12 h时，0.25、0.50 mmol·L-1GSH引发种子的种苗鲜重变化与引发6 h相似，均在CK中最高，处理50J种苗鲜重最低，与其他盐溶液处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理25J、50J种苗鲜重均比混合盐处理25S、50S显著(P＜0.05)降低.此外，与 0.25 mmol·L-1GSH 引发相比，0.50 mmol·L-1GSH引发可以显著(P＜0.05)提高处理50S种子的种苗鲜重.当AsA引发12 h时，2、4 mmol·L-1AsA引发种子的种苗鲜重变化与引发6 h相似，均在在CK中达到最高，处理50J种苗鲜重最低，除了处理25J和25S外，各盐溶液处理间差异显著(P＜0.05).碱性盐处理50J种苗鲜重比混合盐处理50S显著(P＜0.05)降低.此外，与2 mmol·L-1AsA 引发相比，4 mmol·L-1AsA引发可以显著(P＜0.05)提高处理25S种子的种苗鲜重.

通过比较不同引发时间各盐处理种子的种苗鲜重结果(表6)，与引发6 h 相比，0.25、0.50 mmol·L-1GSH引发12 h后处理25S、25J和CK中种苗鲜重显著(P＜0.05)提高.AsA引发12 h后，各处理种苗鲜重无显著(P＞0.05)差异.GSH引发12 h可以有效促进低浓度混合盐胁迫后的种苗鲜重，但AsA引发12 h对于盐溶液处理后的种苗鲜重没有影响.

表6 GSH和ASA引发对盐胁迫敖汉苜蓿种苗鲜重(g)的影响Table 6 Effects of GSH and ASA priming on seedling fresh weight(g)of Aohan alfalfa under different saline treatments

3 讨论

GSH和AsA(也称维生素C)作为植物体内重要的抗氧化剂和自由基清除剂，在大分子化合物合成、物质运输、酶活性及新陈代谢等多种生物反应过程中起着重要的作用，而且在清除自由基和调节抗逆性方面发挥作用，有关植物抗逆作用的研究仍然是科技人员关注的热点.在盐碱、温度、重金属、干旱等非生物胁迫条件下，通过外源GSH和AsA处理对植物抗氧化系统影响的研究表明，GSH和AsA可以缓解受损细胞的损伤和老化，增强细胞抵抗逆境胁迫的能力和调控种子萌发的作用[11-13].

种子引发技术由于具有改变种子萌发进程的作用而逐渐应用于种植业生产实践中.通过种子缓慢吸水并逐渐回干的过程，播种后的种子在获得充足水分时，可以迅速吸胀，缩短播种至出苗的时间，加速萌发与出苗[14].研究表明，敖汉苜蓿[15]、小麦(Triticum aestivum)[16]、黄芩(Scutellaria baicalensis)[17]等种子通过AsA处理后，可以缓解NaCl胁迫，提高种子的发芽率.但在这些试验中，采用的是添加外源AsA进行溶液处理，而非采用种子引发处理.燕麦(Avena sativa)种子在1.0 mmol·L-1AsA引发后，发芽率最高，对于100～200 mmol·L-1NaCl胁迫的缓解效果最好[18].在本试验中，通过不同浓度的GSH和AsA引发，对于中性盐和碱性盐胁迫的作用效果是不一样的.0.50 mmol·L-1GSH引发6 h后可以显著(P＜0.05)提高处理25S和50J种子的发芽率，引发12 h后可以显著(P＜0.05)提高处理25J种子的发芽率.并且与引发6 h相比，GSH引发12 h后处理50J的种子发芽率显著(P＜0.05)提高，而处理25S、25J和50S的种子发芽率显著(P＜0.05)下降.4 mmol·L-1AsA引发6 h后可以显著(P＜0.05)提高处理25S和50S种子的发芽率，引发12 h后可以显著(P＜0.05)提高处理25S和50S、50J种子的发芽率.与引发6 h相比，AsA引发12 h后处理50J的种子发芽率显著(P＜0.05)提高，处理25J种子发芽率显著(P＜0.05)下降.表明，0.5 mmol·L-1GSH 和 4 mmol·L-1AsA引发12 h可以有效缓解高pH碱性盐(50J)的胁迫，但加剧低浓度碱性盐(25J)处理种子发芽率的下降.此外，GSH引发抑制中性盐(25S和50S)处理种子发芽率，AsA引发却没有作用.

平均发芽时间(MGT)是反映种子活力水平的重要指标之一，其值越小，表明种子活力和田间出苗率越高，可以预测田间出苗和幼苗生长情况[19].沙引发显著缩短紫花苜蓿种子的MGT，提高0.8%NaCl溶液胁迫下种子的活力[20].燕麦种子在AsA引发后，随着NaCl溶液浓度的增加，种子MGT不断增长，同时，随着AsA引发浓度的提高，种子MGT也呈现逐渐延长的趋势[18]，显示在NaCl胁迫条件下AsA引发没有促进种子萌发速率的提高.本试验中，GSH引发浓度对MGT的影响较少，仅仅在0.50 mmol·L-1GSH引发6 h后可以显著(P＜0.05)缩短处理25J种子的MGT.而AsA引发浓度影响较大，4 mmol·L-1AsA引发6 h后可以显著(P＜0.05)缩短处理25S、50S和50J种子的MGT，引发12 h后可以显著(P＜0.05)缩短处理25S、50S种子的MGT.另外，不同引发时间相比，GSH和AsA引发12 h可以显著缩短(P＜0.05)低浓度混合盐处理(25S、25J)种子MGT，引发6 h可以显著缩短(P＜0.05)高浓度混合盐处理(50S、50J)种子MGT.可见，GSH和AsA引发苜蓿种子MGT的变化与盐的种类有关.由于有关GSH和AsA引发对种子萌发作用的相关研究较少，需要开展深入研究以探索种子萌发速率与种子引发的关系.

在盐碱条件下，种子萌发能力受到影响，而且盐胁迫将抑制幼苗的生长.通过抗氧化剂AsA处理可以增强苜蓿种子在萌发过程中对于NaCl溶液胁迫的适应性.用维生素C浸种紫花苜蓿后，其幼苗苗高均大于对照组，NaCl浓度高于0.4%时与对照组相比苗高有极显著(P＜0.01)提高[21].小麦种子经过50 mg·L-1AsA浸种4.5 h后，在75～150 mmol·L-1NaCl溶液中，AsA均能够促进种苗的生长，尤其在不超过100 mmol·L-1NaCl浓度时效果更明显(唐瑞和吴瑜，2007).在本试验中不同浓度的GSH和AsA引发结果中，0.50 mmol·L-1GSH引发6 h、12 h后可以显著(P＜0.05)延长处理25S种子的种苗长度.与引发6 h相比，0.25、0.5 mmol·L-1GSH 引发12 h后处理50S、50J中种苗长度显著(P＜0.05)延长.4 mmol·L-1AsA引发6h、12h可以显著(P＜0.05)延长处理50S种子的种苗长度.与引发6 h相比，2、4 mmol·L-1AsA引发12 h后，均可促进处理50S和50J的种苗长度显著(P＜0.05)增加.可见，不同浓度的GSH和AsA引发12 h后显著促进高浓度混合盐胁迫后的种苗生长.此外，种苗鲜重是表征植物幼苗生长状态的常用指标之一，对于环境胁迫较为敏感.小麦种子在维生素C浸种后对于增加幼苗鲜重的效果不同，维生素C处理可以显著(P＜0.05)提高低于100 mmol·L-1NaCl胁迫种子的幼苗鲜重，但对100 mmol·L-1NaCl胁迫种子的幼苗鲜重没有影响[16].在NaCl浓度为0.4～1.0%时维生素C浸种可以显著(P＜0.05)提高敖汉苜蓿幼苗鲜重[21].在本试验中，0.50 mmol·L-1GSH引发6 h可以显著(P＜0.05)提高处理25S、25J的种苗鲜重.引发12 h可以显著(P＜0.05)提高处理50S的种苗鲜重.与引发 6 h相比，0.25、0.50 mmol·L-1GSH引发12 h后可以显著(P＜0.05)提高处理25S、25J种苗鲜重.而对于AsA引发则与GSH引发效果不同，4 mmol·L-1AsA引发6 h仅可以显著(P＜0.05)提高处理50J的种苗鲜重，引发12 h可以显著(P＜0.05)提高处理25S的种苗鲜重.AsA引发6h与引发12 h相比，各处理种苗鲜重无显著(P＞0.05)差异.表明GSH引发12h可以有效促进低浓度混合盐胁迫后的种苗鲜重，但AsA引发12 h对于盐溶液处理后的种苗鲜重没有影响.引发剂种类、引发浓度、引发时间等均会对混合盐胁迫苜蓿幼苗生长造成不同的影响，需要研究确定适宜的引发时间和浓度，将有助于深入了解苜蓿种子萌发特性.

综上所述，GSH和AsA引发后，混合盐处理25S中种子发芽率、幼苗长度和鲜重均最高，MGT则最低，在处理50J中种子发芽率、幼苗长度和鲜重均最低，MGT则最高，苜蓿种子在高浓度高pH混合盐胁迫条件下发芽和幼苗生长受到严重影响.0.50 mmol·L-1GSH引发6 h可以有效缓解低浓度混合盐(25S、25J)的抑制作用，提高种子发芽率、幼苗长度和鲜重，缩短种子 MGT;而0.25、0.50 mmol·L-1GSH引发12 h却进一步降低混合盐(25S、25J)处理的种子发芽率和幼苗鲜重，延长种子MGT.4 mmol·L-1AsA引发6 h、12h可以显著提高中性混合盐(25S、50S)处理中的种子发芽率和幼苗长度，缩短种子MGT.