类风湿关节炎患者血清IL-27水平及外周血PLR检测与疾病活动度的相关性研究*

赵 芬，张爱萍，赵楠楠，栾希英

(1.滨州医学院免疫学教研室，山东烟台 264003；2.烟台市福山区人民医院检验科，山东烟台 265500)

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种病因不明、以关节滑膜炎症为主的自身免疫性疾病，以自身抗体触发的慢性炎症为主要临床特征[1]，会引起机体多种免疫功能的紊乱，若不及时诊断治疗，可破坏关节及其周围组织，导致关节畸形和功能减退[2]，最终可致残。准确及时地评估病情能够最大限度地使患者的病程得到缓解和控制[3]。而目前用于RA病情活动性评估的实验室指标类风湿因子(rheumatoid factors，RF)、抗环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide，CCP)抗体、C反应蛋白(C-Reactive Protein，CRP)和红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate，ESR)等对RA病情活动性评估的灵敏度和特异度都比较低，因此寻找更合适、更多与病情活动度相关的炎性指标尤为重要。本研究通过检测不同活动期RA患者血清IL-27水平及外周血PLR值，分析其与疾病活动度的相关性，继而探讨血清IL-27水平与PLR联合在RA病情活动度评估中的价值。

1 材料与方法

1.1 研究对象 活动期RA患者96例，为烟台市福山区人民医院2017年10月～2018年10月门诊和住院患者，均符合2010年ACR/EULAR制定的RA分类标准[4]，排除其他风湿病、感染、肿瘤、心脑血管疾病等，其中男性36例，女性60例，年龄26～73岁，平均年龄49.9±11.2岁，依据28个关节疾病活动性评分[5](DAS28评分)将RA组分为高度活动组(DAS28>5.1)32例、中度活动组(3.2

1.2 试剂和仪器 人IL-27 ELISA试剂盒购自美国Abcam公司；RT-6000 酶标仪购自雷杜公司；XN1000五分类血细胞分析仪及原装配套试剂(稀释液、白细胞分类溶血素、鞘液、清洗液)购自日本希森美康公司；魏氏红细胞沉降率架及管购自东西仪(北京)科技有限公司；Abbott C16000全自动生化分析仪、Abbott i2000全自动免疫分析仪及RF，抗CCP抗体、hs-CRP原装试剂购自美国雅培公司。

1.3 方法

1.3.1 标本采集：采集所有受试者静脉血，2 ml置于EDTA-K2抗凝管用于检测血细胞检测；2 ml置于枸橼酸钠抗凝管用于检测ESR；4 ml置于常规生化管，3 000 r/min离心15 min，收集血清后-80℃冷冻保存备用。

1.3.2 检测方法：采用ELISA试剂盒检测血清IL-27水平，严格按照说明书操作；Sysmex XN1000血细胞分析仪进行血细胞检测，计算PLR；魏氏法检测ESR；透射免疫比浊法检测hs-CRP和RF；化学发光法检测抗CCP抗体。

2 结果

2.1 活动期RA患者与对照组血清IL-27水平、PLR值比较 活动期RA患者血清IL-27水平、PLR值(17.74±8.58 pg/ml，165.50±39.26)明显高于对照组(5.70±1.43 pg/ml，101.49±18.80)，差异有统计学意义(t=10.665，9.802，均P=0.000)。

2.2 活动期RA患者活动度越高，血清IL-27水平、PLR值越高 见图1。

A：不同活动组IL-27水平；B：不同活动组PLR水平。

分析发现，高度活动组血清IL-27水平、PLR值明显高于中度活动组及轻度活动组(P<0.05)，中度活动组IL-27水平、PLR值明显高于轻度活动组(P<0.05)。

2.3 活动期RA患者血清IL-27水平和PLR值的相关性分析 采用Pearson相关性分析发现，活动期RA患者血清IL-27水平与PLR值呈显著正相关(r2=0.208 8，P=0.000 1)。

2.4 活动期RA患者血清IL-27水平、PLR值与ESR，hs-CRP，RF，CCP相关性分析 见表1。采用Spearman相关性分析发现，活动期RA患者血清IL-27水平、PLR值均与ESR，hs-CRP显著正相关，与RF，CCP无明显相关性。

表1 活动期RA患者血清IL-27水平、PLR值与ESR，hs-CRP，RF，CCP相关性分析

3 讨论

RA作为一种慢性、破坏性、累及多关节滑膜炎症的自身免疫性疾病，其主要表现为关节的病变，以及血管翳的形成、皮下结节、神经性病变和肢体肿胀僵硬等[6]。RA多见于女性，男女比例约为1∶3，30～50岁为发病高峰，我国RA患病率为0.33%左右[7]，是发病率最高的风湿免疫性疾病，若不及时治疗，最终将导致关节功能障碍甚至残疾，因此对RA的早期诊断和病情评估尤为重要。目前，常用于RA诊断的检验指标中唯一对RA灵敏度高的RF特异度却不高，特异度高的抗CCP抗体对病情检测的灵敏度又偏低，为更好反映病情，2010年美国风湿病协会(American College of Rheumatology，ACR)和欧洲抗风湿联盟(European League Against Rheumatism，EULAR)制定的RA新诊断标准中引入了CRP和ESR两种非特异性炎性指标来评估RA病情活动性，但这两种炎性指标不但能在RA患者中检测出来，也能在其他自身免疫性疾病患者中检测出来，并不能准确地反映RA患者的病情，因此，寻找更合适的评估指标尤为重要。

IL-27是Pflanz在2002年发现的细胞因子，属于IL-12 家族[8]，由p28，EBI3(EB病毒诱导基因3)组成的二聚体，最初主要由抗原递呈细胞(antigen presenting cell，APC)：树突状细胞、巨噬细胞、单核细胞等分泌，与众多自身免疫病的发生发展有关。近年来IL-27与RA的研究陆续增多，包括动物实验和临床试验，但关于IL-27在RA中表达的报道结果不尽统一。在RA的胶原诱导性动物模型关节炎(CIA)中，局部IL-27的表达既能降低滑膜厚度又可延缓软骨的破坏[9]。而临床实验表明IL-27可通过介导未成熟的T细胞向Th1细胞分化，产生Th1型反应并促进IFN-γ的产生从而加重RA炎症反应。赖晓霏等[10]的实验提示 IL-27可能与RA病情变化有关。但不同活动期RA患者IL-27水平与疾病活动度的关系尚未见报道。

PLR是一种简单易得、又同时把炎症、免疫及凝血途径涵盖在内的综合指标。近年来PLR被认为是一种全新的反映全身炎症的生物标志物。目前已有研究报道PLR可能与RA慢性炎症状态相关[11]。Wang等[12，13]证实，PLR作为一种简单、全面的炎症指标，可在肿瘤治疗前有效预测肿瘤化疗疗效，且能够反映肿瘤患者或慢性炎症患者体内的炎症状态。Salman等[14]研究表明，PLR与中性粒细胞/淋巴细胞比率联合可判断溃疡性结肠炎病情活动度。

本研究检测了不同活动期RA患者血清IL-27水平、PLR值，发现和对照组相比，活动期RA患者血清IL-27水平、PLR值均显著升高，表明IL-27，PLR可能与RA活动度相关。分析不同活动期RA患者IL-27水平、PLR值发现，活动度越高，血清IL-27水平、PLR值越高，提示IL-27，PLR可能在RA病情加重过程中起作用。该研究进一步分析发现活动期RA患者血清IL-27水平与PLR呈显著正相关，且血清IL-27水平、PLR均与疾病活动度指标ESR，hs-CRP呈显著正相关，这可提示二者联合对RA病情活动性评估具有潜在价值。

舒铭等[15]报道抗CCP抗体与RA的病情严重程度具有明显相关性，但本研究中RA血清IL-27水平、PLR与抗CCP抗体均无明显相关性，考虑可能与本研究纳入的患者例数较少，研究的样本量偏少，造成了误差，需要加大标本量进一步证实。

综上所述，本研究分析了活动期RA患者血清IL-27水平、PLR与类风湿关节炎疾病活动度指标的关系，证明有显著相关性，初步提示二者检测联合可能会成为评估RA病情活动度的更合适指标。但由于本研究标本量偏少，存在一些局限性，故有待更多的临床试验进一步探究。