sCD163在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液鉴别诊断中的应用价值

张珍珍 李丹 宋磊 孙立燕 王莹 丁会

(吉林大学白求恩第一医院呼吸内科， 吉林 长春 130021)

胸腔积液为各种原因引起的液体过多渗出或漏出并积聚在胸膜腔的病理现象。依据其性质可分为漏出性胸腔积液和渗出性胸腔积液。在临床工作中漏出性胸腔积液常见于低蛋白血症、心力衰竭等疾病，依据Light诊断标准，同时结合患者原发疾病较易诊断；而渗出性胸腔积液常见于结核、肿瘤，且两者均表现为淋巴细胞性胸腔积液,鉴别困难。目前临床中对结核性胸腔积液(TPE)与恶性胸腔积液(MPE)的检测手段主要有：①胸水沉渣中找到抗酸杆菌和癌细胞，敏感度仅30%～60%〔1,2〕；②胸水行结核杆菌培养，培养周期长；③胸膜活检术行病理学检查，有创，阳性率约69%〔3〕。④其他如腺苷脱氨酸(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH)等生化指标，干扰因素较多。TPE与MPE早期诊治将对疾病的病程及预后起到重要作用，目前对二者的鉴别手段始终存在敏感性及特异性不能兼顾的问题，因此更加灵敏有效的检测手段亟需发现。本文拟通过检测胸腔积液中游离型CD163(sCD163)蛋白的表达水平，以探究其在胸腔积液病因鉴别诊断中的价值及其与机体炎症反应的相关性。

1 材料和方法

1.1研究对象 入组患者为2017年4月至2018年1月于吉林大学白求恩第一医院进行诊治的78例初治型胸腔积液患者，年龄58～72岁。其中TPE 38例；MPE 40例。TPE组男18例，女20例，平均年龄(56.5±9.53)岁。MPE组男20例，女20例，平均年龄(59.67±9.45)岁。TPE患者均为经痰液或胸腔积液涂片找到结核分枝杆菌或胸腔镜下病理回报为结核或试验性抗结核治疗有效者；MPE患者均为胸腔积液、痰液中找到癌细胞或胸腔镜下病理回报恶性者。所有患者应排除既往或近期接受过正规抗结核、化疗、规律抗炎治疗或使用免疫抑制剂者，除外严重肝脏疾病、肾脏疾病、心脏疾病、免疫系统疾病等影响sCD163表达的相关疾病。

1.2标本收集 收集初治胸腔积液患者起始段胸腔积液10 ml，保存于4℃恒温条件下。于30 min内给予胸腔积液处理，于1 500 r/min离心5 min，分装上清液；于4 000 r/min再次离心上清液10 min，用Ep管1 ml/管分装上清液，储存于-80℃冰箱备用。

1.3主要试剂及仪器 人sCD163酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(RD Systems)，酶标仪(BioTek，ELx800)。

1.4检测方法 ①测定样本蛋白水平时将上清解冻，严格按照ELISA试剂盒说明书进行操作。用酶标仪在450 mm处测各样品的OD值，根据标准品绘制标准曲线，计算各样品浓度。②患者胸腔积液常规检查由我院检验科完成。

1.5统计学方法 采用SPSS18.0软件进行t检验、非参数秩和检验。利用受试者工作特征(ROC)曲线评价sCD163对胸腔积液的诊断价值。使用Pearson线性相关分析法进行组内sCD163与肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)的相关性。

2 结 果

2.1两组sCD163、IL-1β、TNF-α、CRP及ESR水平比较 TPE组胸腔积液中IL-1β、TNF-α及sCD163水平明显高于MPE组(P<0.05)，血清CRP水平明显高于MPE组织，ESR明显快于MPE组(P<0.01)，见表1。

表1 两组胸腔积液患者sCD163、IL-1β、CRP与ESR比较

sCD163、IL-1β、TNF-α为胸腔积液浓度；CRP为血清浓度

2.2sCD163对TPE和MPE的诊断价值 sCD163鉴别TPE与MPE的ROC曲线下面积为0.888,最佳临界值为1 640.11 ng/ml，灵敏度为76.3%，特异度为85%(P<0.01)。如图1。

图1 SCD163及TPE与MPE鉴别诊断的ROC曲线

2.3TPE、MPE组中各指标相关性 利用Pearson线性相关的方法进行分析，发现TPE组中sCD163与血清CRP(r=0.136,P=0.415 7)、ESR(r=-0.035,P=0.835 5)、胸腔积液TNF-α(r=0.304,P=0.063 8)无相关性，在MPE组中sCD163与血清CRP(r=0.174,P=0.282 6)、ESR(r=0.024,P=0.143 1)、胸腔积液TNF-α(r=0.040,P=0.807 4)无相关性，与胸腔积液IL-1β在TPE组弱相关(r=0.490，P=0.001 8),在MPE组无相关(r=0.068，P=0.676 7)。

3 讨 论

据不完全统计，世界范围内每年死于结核者约1 800万人，结核性胸膜炎占胸腔积液病因的44.1%〔4〕，是继结核性淋巴结炎外第二常见肺外表现，我国是仅次于印度的结核大国，结核感染者众多， 5%会表现出相应临床症状，其中表现为胸腔积液者占结核病总数的2.5%。差异蛋白作为胸腔积液病因鉴别诊断的生物学标志物具有较高的临床价值，研究发现sCD163〔5～7〕在TPE与MPE的鉴别诊断中意义显著。

CD163为具有9个胞外区的跨膜糖蛋白，分子量为130 kD，属于富含半胱氨酸的清道夫超家族一员〔8〕。CD163主要表达于成熟组织的单核巨噬细胞膜表面，尤其是M2型巨噬细胞〔9～11〕。近年研究发现CD163在抗炎、抗菌方面作用显著〔12,13〕。在炎症或其他刺激条件下，Toll样受体激活，巨噬细胞发挥作用的同时巨噬细胞表面的CD163可经蛋白的切割作用释放入周围体液，形成sCD163〔14〕。因此sCD163可作为巨噬细胞活化的标志物〔15〕。本研究与其报道一致，考虑M2型巨噬细胞在活动性结核病中活性显著增强，此与既往报道M2型巨噬细胞在结核性肉芽肿的发生发展中起到主导作用〔16〕相符。本文ROC曲线分析发现sCD163诊断结核性胸腔积液的最佳临界值时相应的敏感度与特异度分别为76.3%与85.0%，与触珠蛋白取最佳诊断值时相比敏感度较低，特异度相似。本研究结果表明sCD163在TPE组与IL-β弱相关，而在MPE组与IL-β无明显相关性，考虑在可能与标本含量较小造成一定误差有关。

本研究中所检测标本均为起始段胸水，未经抗炎及抗肿瘤等治疗，排除了肝肾、免疫系统、循环系统等可能影响sCD163表达的疾病因素及药物干扰因素，考虑在反映与疾病相关性较为准确。但样本含量较小，可能存在一定偏差，在今后的研究中可扩大样本继续研究。