调宗气组方对慢性间歇性缺氧大鼠颏舌肌动脉血气及肌张力的影响

张丽秀 杨海淼 欧喜燕 朱同刚 邹权 李驰坤 丁云录 孙永亮 张琳琳 刘铁军

(长春中医药大学附属医院，吉林 长春 130021)

目前已证实许多危险因素参与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的发病和进展，以颏舌肌为主的上气道扩张肌结构和功能障碍是OSAHS的主要致病因素之一〔1～3〕。综合古代、现代医家论述及临床调研与课题组多年临床实践并结合实验，证明调宗气组方可改善大鼠颏舌肌功能，从而对OSAHS患者的治疗起到积极的意义。

1 材料与方法

1.1实验动物 实验选取健康Wistar大鼠，雄性，体重220～250 g，50只。所有实验操作严格按照Guide for the Care and Use of Laboratory Animals(NIH颁布，No.85-23)要求执行。

1.2药品与相应试剂 药物组成：黄芪，党参，石菖蒲，黄芩，丹参，川芎，地龙，薄荷，郁金等(合计224 g)。

1.3气体 高纯度氮气与医用氧气：由巨洋气体有限责任公司提供(长春市)，浓度>99.99%，。

1.4仪器 动物低氧舱：由课题组联合吉林省农业机械研究院制作；手掌血气分析仪：型号：i-STAT300，美国雅培公司产品；血气分析仪测试卡：型号：G3+，美国雅培公司产品；生理信号采集系统，型号：Powerlab/8sp，澳大利亚埃德公司产品；紫外/可见分光光度计，Perkin Elmer公司产品，型号：Lambda25；电子天平：上海舜宇恒平科学仪器有限公司产品，型号：YP1201N；高通量组织研磨器：Scientz-48型，宁波新芝生物科技股份有限公司提供；贺利氏(Heraeus)离心机(台式)，型号：Biofuge Stratos；酶标仪，型号：BIO680，美国伯乐公司产品；迷你双垂直电泳仪电泳槽蛋白凝胶电泳仪，型号：DYCZ-24DN，北京六一仪器厂；转移电泳仪电源，型号：DYY-7C，北京六一仪器厂；全自动化学发光成像分析系统：天能科技有限公司(上海)，Tanon 6100。

1.5实验方法

1.5.1中药的制作 将上述中药免煎提取物溶于41.5 ml的蒸馏水中作为高剂量调宗气方备用，中剂量调宗气方将高剂量调宗气方稀释2倍后备用，低剂量调宗气方将中剂量调宗气方稀释2倍后备用。

1.5.2实验分组、给药 大鼠随机分为5组，每组10只，分别为慢性间歇性缺氧组、慢调宗气组方高、中、低剂量组、正常对照组。正常对照组、慢性间歇性缺氧组动物给予1 ml·kg-1·d-1蒸馏水灌胃；调节气组方高剂量组以46.66 g·kg-1·d-1药灌胃，该给药剂量相约为每日用等效剂量的4倍；调宗气组方中剂量组动物以23.33 g·kg-1·d-1中药灌胃，该给药剂量相约为临床每日用等效剂量的2倍；调宗气组方低剂量组动物16.67g·kg-1·d-1中药灌胃，该给药剂量约为临床每日用等效剂量的等倍。

1.5.3慢性间歇性缺氧模型的建立

1.5.3.1低氧动物舱的建立及改进 制成长方体舱，规格为120 cm×60 cm×60 cm，选用的有机玻璃8 mm厚，舱体上面配有密封盖(可打开)，用于取放动物，侧壁留有一个直径为20 mm小孔(用作输入氮气)，两端分别安装电动风阀(直径为160 mm)，其中一端同刚安装风机，用于空气的吸入及缺氧舱内气体的排出。试验过程中，分别用生石灰和硅胶干燥剂吸收舱内的二氧化碳和水蒸气。

1.5.3.2间歇性缺氧实验 将慢性间歇性缺氧组、调宗气组方各剂量组大鼠分别置于慢性间歇性低氧舱内，连续5 w实验。

1.5.4检测指标

1.5.4.1调宗气组方对慢性间歇性缺氧大鼠动脉血气变化的影响 于给药5 w末后，经腹腔给动物注射20%氨甲酸乙酯(乌来糖)溶液(5 ml/kg)麻醉，于大鼠第4、5肋间穿刺，取左心室动脉血1 ml，快速注入血气片中，用血气分析仪检测其动脉血血气，观察各组大鼠动脉血氧分丈夫(PaO2)、血氧饱和度(SaO2)变化。

1.5.4.2调宗气组方对慢性间歇性缺氧大鼠颏舌肌肌张力变化的影响 用上述麻醉方法，给大鼠固定，逐层分离舌底部肌肉，暴露颊舌肌。分离舌下神经中央支和侧支，并切断侧支，将生物信号采集系统相连的银质双极钩状电极钩住舌下神经中央支。将一侧颊舌肌的下颌骨固定，肌肉处于最适初长度。给予刺激，记录收缩最大张力。

1.6统计学方法 采用Excel2000软件进行t检验。

2 结 果

2.1调宗气组方对慢性间歇性缺氧大鼠动脉血气变化的影响 慢性间歇性缺氧组与正常对照组比较，其动脉血PaO2、SaO2显著降低(P<0.001)，调宗气组方高、中剂量组动脉血PaO2与慢性间歇性缺氧组比较显著增加(P<0.001，P<0.05)，调宗气组方低剂量组动脉血PaO2与慢性间歇性缺氧组比较差异虽无统计学意义(P>0.05)，但仍有增高趋势；调宗气组方高、中、低剂量组动脉血SaO2与慢性间歇性缺氧组比较显著增加(P<0.001，P<0.05)。见表1。

表1 各组动脉血气变化

与慢性间歇性缺氧组比较:1)P<0.05，2)P<0.001

2.2调宗气组方对慢性间歇性缺氧大鼠颏舌肌肌张力变化的影响 慢性间歇性缺氧组颏舌肌肌张力〔(2.11±0.11)N/mm2〕与正常对照组比较显著降低〔(2.36±0.11)N/mm2，P<0.001〕。调宗气组方高剂量组〔(2.25±0.11)N/mm2〕、中剂量组〔(2.23±0.11)N/mm2〕颏舌肌肌张力与慢性间歇性缺氧组比较显著增加(P<0.01，P<0.05)，调宗气组方低剂量组〔(2.18±0.13)N/mm2〕颏舌肌肌张力与慢性间歇性缺氧组比较虽无显著性差异(P>0.05)，但仍有增高趋势。

3 讨 论

OSAHS是一种睡眠呼吸疾病，患者白天困倦、注意力不集中、乏力、头晕、心慌胸闷等多脏器及多系统功能损伤，严重的影响生活质量〔5～9〕。目前西医对于OSAHS的治疗，主要针对上述参与OSAHS的发病、发展各危险因素进行，手术成为OSAHS的主要治疗手段。对于采取手术治疗应当保持更加审慎的态度。使用无创通气治疗，不去病源，不舒适感，携带不方便，部分患者需终生睡眠时使用，患者依从性差〔10～12〕。由于副作用大、有效性低，药物治疗更不在常规治疗之列。近年来，多数医家认为该病主要病理因素为痰湿、热及气滞、血瘀等，痰湿内阻、痰热内塞、气滞血瘀、肺脾肾虚、心阳不足等为主要病机。由于现代社会环境、缺乏运动、压力、饮食等因素，尤以肺气不利，脾失健运而致痰、湿、瘀为关键，其发病人群及相关临床研究亦多见。但目前机制研究的深入化、细化不够，缺乏实验研究的支持。OSAHS患者多见于肥胖、体重增加同时脾胃功能减退的人群，而本病发生时患者处于慢性间歇性低氧状态，说明肺吸入清气的功能亦受到影响。根据宗气的概念及组成：宗气是由肺吸入的清气和脾胃所化生的水谷精微之气组成，OSAHS患者宗气的生成及功能势必受到影响，调节其“宗气”功能，补充其“宗气”的不足，从而改善肺吸入清气及增强脾主肌肉的功能，对改善此类患者的症状可起到积极的意义，且本课题组运用该理论进行临床试验，已取得了成效〔13～17〕。