抗菌药物对鸡白痢的治疗效果对比试验
2019-02-13才兴蔓
才兴蔓
（辽宁省葫芦岛市龙港区双树动物卫生监督所，辽宁葫芦岛 125101）
1 鸡白痢沙门氏菌的病原学
1.1 分类及形态
病原为鸡白痢沙门氏杆菌，为革兰氏阴性短杆菌，有时呈多形性。无鞭毛。不能运动。不形成荚膜和芽胞。
1.2 生化特性
本细菌能利用葡萄糖、甘露醇、蔗糖，不能利用乳糖、卫矛醇、麦芽糖，不分解尿素，硫化氢试验阴性，产生鸟氨酸脱羧酶和赖氨酸脱羧酶。吲哚试验和V-P试验阴性，甲基红试验和枸橼酸盐试验阳性。
1.3 抵抗力
对热的抵抗力不强，加热70℃20min死亡；0.005%高锰酸钾、0.3%来苏儿、0.1%升汞、0.2%福尔马林和%石碳酸溶液经15～20min可以杀死。对低温的抵抗力很强，-10℃经4个月不死，在尸体中可存活3个月以上，在干燥的粪便及分泌物中可以存活4年之久。
2 鸡白痢沙门氏菌的分离与鉴定实验
2.1 材料和方法
2.1.1 材料
（1）药品与器材
SS琼脂 普通琼脂 革兰氏染色液 三糖铁琼脂 1%蛋白胨水GN增菌液 葡萄糖发酵管 乳糖发酵管 麦芽糖发酵管 甘露醇发酵管 蔗糖发酵管 枸橼酸盐培养基 平皿 酒精灯 钓菌环 注射器 试管。
（2）病料
某鸡场的疑似鸡白痢的病、死鸡若干只，已死亡的鸡只时间不超过12h。
2.1.2 细菌的分离与培养
无菌采集病死鸡的肝脏，心血等组织，并接种在普通琼脂平板中，37℃培养24h，抹片，革兰氏染色后镜检。之后挑取可疑菌落接种SS琼脂培养基，与37℃培养24h。
2.1.3 细菌形态学观察
取在SS琼脂培养基上培养的单个菌落进行革兰氏染色，在光学显微镜下观察细菌的形态及染色特点。
2.1.4 生化试验
将分离到的菌株按常规方法进行三糖铁试验、吲哚试验、MR试验和VP试验以及多种糖发酵试验、枸橼酸盐利用试验、尿素酶试验。
2.1.5 动物试验
将试验动物鸡接种菌液，并设置对照组，四天后观察试验动物的情况。
2.2 实验结果
2.2.1 菌落形态
病原的分离及染色镜检病料接种于普通琼脂平板，形成均一、无色、半透明、表面光滑、隆起、边缘整齐的针尖大小的菌落。在SS琼脂平板上形成的菌落与普通琼脂平板上的相似，只是生长的更丰盛。
2.2.2 染色镜检
可见粉红色、中等、大小的杆菌、单在、无芽孢和荚膜，为革兰氏阴性菌。
2.2.3 生化试验
生化试验各菌进行生化试验，结果显示IMViC- + - +，能发酵葡萄糖、果糖、山梨醇、鼠李糖，产酸产气，不能利用乳糖、蔗糖、麦芽糖、侧金盏花醇。尿素酶试验阴性。细菌在三糖铁培养基中生长，斜面红色，底层黄黑色。以上结果符合鸡白痢沙门氏菌的生化特点。
2.3 实验小结与讨论
由于这些疑似鸡白痢的病鸡具有典型的临床病状和剖症状，并通过一系列的实验室检查与诊断，初步认定为鸡白痢沙门氏菌。
3 药物敏感试验
3.1 试验的材料与步骤 药物纸片琼脂扩散法﹙纸片法﹚
3.1.1 药品与器材
卡那霉素 庆大霉素 新霉素 氟哌酸 强力霉素 恩诺沙星 阿莫西林土霉素﹙以上八种药物均购自河北绿欣康动物药业有限公司﹚ 标准滤纸 直径为6mm的打孔器 消毒棉签 酒精灯 游标卡尺
3.1.2 试验准备工作
（1）药敏片的制备
取标准滤纸，用打孔器打成6mm直径的圆形小纸片。各取圆纸片10片放入八个清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经121℃15～20min高压消毒后，放在37℃恒温箱中数天。使完全干燥[9]。
（2）药液的制备﹙用于商品药的试验﹚
按商品药的使用治疗量的比例配制药液，如新霉素的治疗量为70mg/L，用100ml的蒸馏水稀释7mg的新霉素，备用。﹙其他药物同﹚
（3）抗菌药敏片制备
在上诉含有纸片的青霉素瓶内分别加入卡那霉素药液、庆大霉素药液、新霉素药液、氟哌酸药液、强力霉素药液、恩诺沙星药液、阿莫西林药液和土霉素药液各1ml，并翻动纸片，使所有纸片充分浸透药液，同时在瓶口上记录药物名称，放在37℃恒温箱内过夜，干燥后密封，备用。
3.1.3 试验操作方法
（1）在无菌操作台中，用接种环钩取1～2环纯培养的沙门氏菌置到1ml灭菌生理盐水中充分混合，用灭菌吸管吸取2～3滴菌液，均匀涂满麦康凯培养基的整个表面，分别放置阿莫西林、卡那霉素、庆大霉素、土霉素、氟哌酸、新霉素、强力霉素、恩诺沙星药敏纸片。
（2）将镊子于酒精灯火焰灭菌后略凉，取药敏片贴到平皿培养基表面。在培养基背面用记号笔标记药物名称。
（3）将培养基置于37℃恒温箱中培养24h后，观察结果。用游标卡尺测量抑菌圈的直径，若抑菌圈直径15～20mm为高度敏感，10～15mm为中度敏感，10mm以下为低度敏感。
3.2 试验小结与讨论
此次试验结果表明该鸡场的鸡白痢沙门氏菌对对卡那霉素、庆大霉素、新霉素为高度敏感，对氟哌酸、强力霉素、恩诺沙星为中度敏感，对阿莫西林、土霉素产生了耐药性。
