蛋黄免疫球蛋白制备和应用研究进展

戴 浪

（贵州大学动物科学学院，贵州贵阳 550025）

免疫球蛋白是指具有抗体（Ab）活性或化学结构，与抗体分子相似的球蛋白，蛋黄免疫球蛋白属于免疫球蛋白的一种，存在于禽类蛋胚胎内部。此前研究表明，蛋黄免疫球蛋白可应对哺乳动物抗体中的部分不足，实现病毒感染等疾病的治疗。本文以自身经验和文献为基础，对蛋黄免疫球蛋白制备和应用做综述：

1 蛋黄免疫球蛋白的制备

1.1 制备方法

蛋黄免疫球蛋白的制备方法较为多样，但效率和成本存在差异，早在20世纪末期，已有学者尝试应用化学方法进行分离提取实现制备。多年来该方法经不断改进，已经较为成熟。一般分离制备步骤为，取若干蛋黄投入Tris缓冲液中，对混合物进行低温放置处理，温度应在4℃上下，使混合物自然反应生成沉淀。提取其上层清液，放入适量硫酸葡聚糖、氯化钙，与提取物进行反应，将混合溶液放置于30℃环境下，再置入硫酸铵进行处理。该方法可获取约75%左右的蛋黄免疫球蛋白。

另一种分离方法为，取若干蛋黄，置入蒸馏水中进行稀释，使混合物的酸碱性趋向7.0，之后做冻融处理，以离心机处理混合物，去除沉淀，提取上层清液，将硫酸铵置入清液中获取蛋黄免疫球蛋白。该方法可获取约60～70%左右的蛋黄免疫球蛋白，较第一种方式效率略低，但制作过程较为简单，成本小。此外，近年来也有学者提升聚乙二醇提取法、亲脂溶剂沉淀法，不同方式下的工艺流程存在差异，效率和成本也不尽相同。目前来看，亲脂溶剂沉淀法效率最高，但成本和流程也最高、最复杂，因此推广情况尚不理想。

1.2 现有工艺的不足

当前蛋黄免疫球蛋白制备方法的不足体现在三个方面，一是纯度不足、二是成本高、三是无法进行量产。纯度不足的问题在各类方法中均所有体现，理论上看，反应颗粒越小、反应行为进行的越彻底，但无论采用提取法、沉淀法，都需要持续进行多种混合溶液的制备、物质提取，在此过程中，化学反应、物理反应均不完全以分子为基本单位进行，反应物一般为分子团，内部分子的活力即便没有受到影响，也无法完全参与到反应活动中，生成物的纯度有限。

成本方面的问题，并非广泛存在于所有的蛋黄免疫球蛋白制备方法中。采用蒸馏水稀释法的情况下，成本较小，但制备效率不足，其他方式多面临成本较高的问题。如亲脂溶剂沉淀法，其制备效率是蒸馏水稀释法的2.7～2.9倍，但制备成本也高出1.7倍以上，由于蛋黄免疫球蛋白的用量相对有限，因此高成本制备方法并不被所有研究部门广泛应用。量产问题目前主要困扰医药行业，一方面蛋黄免疫球蛋白活力无法长期保持，另一方面部分疾病范围性爆发（如流行疾病）对相关物质的用量要求又相对较大，如何解决用量、成本和制备效率之间的矛盾，也为未来研究的热点问题。

2 蛋黄免疫球蛋白应用

2.1 感染治疗

在较早进行蛋黄免疫球蛋白研究的西方国家。技术人员最初进行的活体实验以家禽作为对象，对感染了鼠伤寒沙门氏菌的病鸡进行治疗，在皮下注射和口服药物的综合作用下，病鸡体内的抗体水平出现变化，但并不显著。其后研究人员又对患病的哺乳动物（腹泻的猫）进行治疗，猫体内的抗体水平明显变化，且鼠伤寒沙门氏菌已经基本消失，腹泻情况在1d后出现缓解，连续治疗3d，猫的腹泻病情消失。为了解蛋黄免疫球蛋白的治疗效果，研究人员又寻找到感染了轮状病毒的猫，并通过注射和服药的方式进行疾病治疗。在病猫的排泄物中，可检出轮状病毒，且随着用药的深入，轮状病毒的检出量明显减少。这表明蛋黄免疫球蛋白已经发挥治疗作用。其后的人体组织体外实验也证明，蛋黄免疫球蛋白可实现病毒性腹泻和感染预防、治疗。

2.2 实验分析

蛋黄免疫球蛋白在医学实验中的应用由来已久，早在20世纪后期，科学家就应用蛋黄免疫球蛋白进行凝胶扩散实验，发现该物质可降低凝胶中沉淀物的产生量。在生物实验中，研究人员发现适量应用蛋黄免疫球蛋白，可以提升部分复方类药物的药敏性，很多无法产生治疗效果的药物，加入蛋黄免疫球蛋白后，可以重新起效。此外，也有人员在研究中发现，蛋黄免疫球蛋白能够改善实验数据的精确性，如酰胺酶实验中，应用蛋黄免疫球蛋白使其敏感性下限达到0.2ng/ml，可以有限指导研究和制药活动。

一些新型病毒、病毒变种的体外实验中，蛋黄免疫球蛋白同样应用广泛。由于不同病原体在经过药物作用后，往往会改变自身形态，产生耐药性，导致药物治疗效果下降（药敏性下降）。新的病毒也在现代医疗工作中不断被发现，这对医疗工作，尤其是制药工作提出了更多挑战。蛋黄免疫球蛋白的作用机理相对明确，虽然无法单独用于广谱抗病毒，但研究人员近年来不断尝试利用复方药物治疗疾病、杀灭病毒，又使蛋黄免疫球蛋白拥有了更广阔的作用空间。目前很多研究依然处于实验阶段，无论结果如何，都能为医药工作提供更多参考。

综上所述，蛋黄免疫球蛋白在医疗领域拥有广泛的应用前景，其制备工艺虽然成熟，但也面临成本、效率等方面的不足，应在后续工作中谋求改进。