不同卵巢组织中HOXA-10表达差异及临床意义

范小华

（镇江市妇幼保健院 妇科，江苏 镇江 212001）

卵巢癌是女性生殖器官最常见的恶性肿瘤之一，由于缺乏完善的早期诊断方法，其死亡率高居妇科恶性肿瘤之首，5年生存率仅为30%[1]。子宫内膜异位症是一种常见的妇科良性疾病，发生恶变率约0.6%～1.0%，多数子宫内膜异位症的恶变与卵巢癌有关。在卵巢癌的癌变过程中，相关基因的改变具有重要的诊断与预后价值。HOXA-10蛋白表达是肿瘤发生发展中的重要机制，是肿瘤恶性程度的早期指标之一。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2010年12月～2014年12月在我院进行诊断和治疗的患者共68例，年龄39～65岁，平均51岁，其中卵巢子宫内膜样癌15例，卵巢子宫内膜样癌合并子宫内膜异位症13例，

单纯子宫内膜异位症20例，所有病例均经术后病理检查证实。另取同期行卵巢切除且经病理检查无卵巢恶性肿瘤患者的正常卵巢组织20例作为空白对照组。

1.2 实验方法

所有标本均经10%甲醛固定，石蜡包埋，常规制成4 um厚切片。切片免疫组织化学采用S-P法，鼠抗人HOXA-10多克隆抗体购自北京中杉金桥生物公司，二抗试剂盒及DAB显色试剂盒购自北京中杉金桥生物公司。PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判定

HOXA-10蛋白阳性表达为细胞核染色为棕褐色或棕黄色，每张切片随机观察5个高倍视野(X100)并取均值，阳性细胞数分级为:阳性细胞数＜10%为阴性,10%-20%为弱阳性“+”，20%～50%为阳性“++”，＞50%为强阳性“+++”。

1.4 统计分析

实验数据采用SPSS18.0软件进行统计学分析，计量资料使用±s表示，行t检验，计数资料采用x2检验，以P＜0.05表示有统计学意义。

2 结 果

2.1 入选研究对象的一般基线资料分析

卵巢子宫内膜样癌合并子宫内膜异位症（OEC+EMs）13例，卵巢子宫内膜样癌（OEC）15例，单纯子宫内膜异位症（EMS）20例，同期卵巢切除且经病理检查无卵巢恶性肿瘤患者20例作为空白对照组。OEC组患者的平均年龄高于其他组，单纯EMs组患者平均年龄低于其他组，同时病程最长，见表1。

表1 入选研究对象的资料分析（±s）

表1 入选研究对象的资料分析（±s）

组别 n 年龄（岁） 病程（年）OEC 15 59.5±4.7 3.5±2.1 OEC+EMS 13 53.2±3.9 2.3±1.5 EMs 20 47.2±3.8 3.8±1.6正常组 20 50.2±5.9 -

2.2 HOXA-10表达阳性患者分布情况

HOXA-10表达阳性患者分布情况，见表2。

表2 HOXA-10表达阳性患者分布情况[n（%)]

2.3 不同研究对象HOXA-10表达差异比较

HOXA-10在正常妇女，单纯子宫内膜异位症，卵巢子宫内膜样癌合并子宫内膜异位症，卵巢子宫内膜样癌患者中的表达逐渐升高,见表3。

表3 不同研究对象HOXA-10表达差异比较（±s，%）

表3 不同研究对象HOXA-10表达差异比较（±s，%）

注：与正常组比较：*P＜0.05; 与EMs组比较：#P＜0.05

组别 OEC n HOXA表达（阳性%）15 66.7*#OEC+EMs 13 84.6*#EMs 20 15.0正常组 20 0

3 讨 论

卵巢癌是妇科临床上一种常见的恶性肿瘤，其发病率位于宫颈癌和子宫内膜癌后居第三位，但其死亡率居女性恶性肿瘤之首，严重威胁着女性的生命健康。卵巢恶性肿瘤中以上皮癌最常见，卵巢癌术中发现卵巢肿瘤局限于卵巢只有30%，大部分已经蔓延到子宫，双侧附件，大网膜及盆腔其他脏器，因此早期诊断是临床上一大难题。子宫内膜异位症是指具有活性的内膜细胞种植于子宫内膜以外位置而形成的一种病理表现，是临床中常见的妇科疾病类型。近年来研究发现在某种条件下，子宫内膜异位症会转化成卵巢子宫内膜样癌，这种转变的机理尚不明确[2]。因此，针对子宫内膜异位症合卵巢子宫内膜样癌的生理生化指标可能为研究上述转变提供依据和方向。

3.1 HOXA-10的结构与功能

HOXA-10基因存在于人体的正常子宫内膜腺上皮及间质细胞中，表达水平极低，但在子宫内膜异位症、子宫内膜癌、卵巢癌的患者内膜中均检测到异常表达，与子宫内膜异位症、子宫内膜癌、卵巢癌的发生发展密切相关，相应研究显示其表达的改变可能与启动子的甲基化有关，但其具体调控机制仍然不明确。

3.2 HOXA-10与卵巢癌的关系

近年来HOXA-10被认为是一个新的候选肿瘤抑制基因，研究发现HOXA-10在卵巢癌组织中有着异常表达，且阳性表达率越高则预后越差，体外实验发现HOXA-10可能参与了卵巢癌的恶性进展过程，该基因可以通过促进癌细胞增殖、运动，从而加强了癌细胞的侵袭、转移能力。卵巢癌组织中HOXA-10基因的表达异常与其启动子甲基化有关，阳性表达率卵巢癌要明显高于正常卵巢。通过甲基化特异性聚合酶链反应，可以发现卵巢癌组织中的HOXA-10的高阳性表达与其低甲基化有关，通过体外诱导低甲基化药物5-氮-2’-脱氧胞苷（5-aza-dC)对卵巢癌细胞株进行处理，HOXA-10mRNA的表达明显升高[3]。有研究发现，HOXA-10的甲基化状态与患者的预后有着密切关系，其甲基化越高，患者的预后越差。通过对卵巢癌铂类药物耐药的患者给予低剂量诱导低甲基化药物治疗，可以降低HOXA-10的甲基化水平，从而使患者恢复对铂类化疗药物的敏感性，提高患者对药物的反应率，使患者的生存时间明显延长[4]。目前在提高卵巢癌治疗效果的方法中，通过降低HOXA-10的甲基化水平可以达到较好的卵巢癌抑制效果。

本研究中，OEC+EMs组患者HOXA-10表达阳性率为84.6%，OEC组患者阳性率为66.7%，EMs组患者阳性率分别为15.0%，与文献报道的检出率基本相符[5-6]。HOXA-10在正常妇女，单纯子宫内膜异位症，卵巢子宫内膜样癌,卵巢子宫内膜样癌合并子宫内膜异位症中的表达逐渐升高。同时EMs合并OEC、OEC相对于正常人群和单纯EMs患者HOXA-10阳性率明显升高，有统计学意义（P＜0.05)。

综上所述，HOXA-10在不同卵巢组织中呈不同水平的表达，HOXA-10阳性表达是子宫内膜异位症发生的早期事件，卵巢内膜样癌发生的晚期事件。卵巢内膜样癌合并子宫内膜异位症介于子宫内膜异位与卵巢内膜样癌的中间步骤，提示卵巢子宫内膜样癌可能来源于异位子宫内膜恶变，具体的相关性还需要进一步研究证明。今后通过对HOXA-10深入研究将有助于对子宫内膜异位症恶变的发病机制、早期诊断、治疗提高新思路。