MTHFR C677T基因检测指导高血压精准治疗

叶叔安 张安平 许艺璇 肖培玲

【摘要】 目的：研究MTHFR C677T基因检测指导高血压精准治疗。方法：选择2016年10月-2018年10月在本院进行治疗的44例H型高血压患者，根据干预方式不同分为对照组和研究组，每组22例。其中对照组采取常规血压干预，研究组实施生活与叶酸干预。观察两组的日常生活、Hcy、生化指标、BMI，并分析MTHFR基因型及不同基因型的Hcy水平。结果：干预后，研究组吸烟、饮酒、高动物蛋白饮食比例均低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。干预后，研究组的Hcy、总胆固醇、甘油三酯均低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。两组干预前后的空腹血糖、尿素氮、BMI比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。两组的C/C比较，差异无统计学意义（P>0.05）;研究组的C/T、T/T均低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。T/T的Hcy水平高于C/T，且C/T的Hcy水平高于C/C，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：H型高血压患者Hcy水平明显较高，在建议该人群应该尽早做相关检测以检查是否发生高同型半胱氨酸血症，并早期叶酸干预。

【关键词】 高血压 MTHFR C677T 同型半胱氨酸 叶酸

[Abstract] Objective： To study MTHFR C677T gene detection to guide precise treatment of hypertension. Method： Forty-four patients with H-type hypertension treated in our hospital from October 2016 to October 2018 were selected. According to different intervention methods， the patients were divided into control group and study group， 22 cases in each group. The control group received routine blood pressure intervention， the study group received life and Folic Acid intervention. The daily life， Hcy， biochemical indicators and BMI were observed， and MTHFR genotypes and Hcy levels of different genotypes were analyzed. Result： After intervention， smoking， drinking and high animal protein diet in the study group were lower than those in the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. After intervention， Hcy， total cholesterol and triglyceride in the study group were all lower than those in the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. There were no significant differences in fasting blood glucose， urea nitrogen and BMI between the two groups before and after intervention （P>0.05）. There was no significant difference in C/C between the two groups （P>0.05）， C/T and T/T in the study group were lower than those in the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. The Hcy level of T/T was higher than that of C/T， and the Hcy level of C/T was higher than that of C/C， the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion： The level of Hcy in patients with H-type hypertension is obviously higher， it is suggested that the population should be detected as soon as possible to check whether hyperhomocysteinemia occurs and early Folic Acid intervention.

高血压是导致脑卒中、冠心病、肾脏损害的重要危险因素，大部分脑卒中与心肌梗死均与高血压存在一定联系[1]。在我国高血压患者中，伴有血浆同型半胱氨酸（Hcy）增高的原发性高血压，成为H型高血压，在成年患者中占75%[2]。血浆Hcy与患者年龄、叶酸水平、生活方式存在一定联系，但决定Hcy代谢的关键酶的多个位点的突變在遗传中占据了关键作用。Hcy水平升高与原发性高血压患者在心血管时间上存在协同作用，Hcy升高会使得高血压心血管风险升高[3]。且高Hcy会对血管内皮造成损伤，不同程度上增加动脉僵硬度，并降低顺应性，最终导致患者血压升高，加重对血管的损害，引起心、脑、肾并发症[4]。本文通过将MTHFR C677T基因检测纳入研究，积极控制病情，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2016年10月-2018年10月在本院治疗的H型高血压。纳入标准：均为原发性高血压。排除标准：恶性肿瘤及血液疾病;明确感染灶的急慢性感染;研究近半年服用影响血清Hcy的药物。根据干预措施分为对照组和研究组，每组22例。本研究经医院医学伦理委员会批准，所有纳入对象均签署知情同意，自愿参加。

1.2 方法

1.2.1 血压测定 按照我国高血压防治指南，取患者3次坐位血压均值，并按照指南血压高低水平进行分期[5]。

1.2.2 血浆Hcy测定 患者空腹静脉采血，样本均为新鲜血清，样本采集后需冷藏并迅速离心，检测延迟需要冷藏血清，样本-20 ℃冻存，1周内进入-80 ℃冻存。血浆Hcy由中心试验室采用高效相色谱法测定。试验条件如下：Agilent1200液相色谱议，色谱柱Agilent ZORBAX SB C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）;流动相为40 mM醋酸缓冲液（含3%甲醇），流速0.8 mL/min;进行量30 μL;柱度：25 ℃。分析时间15 min;荧光检测条件：激光波长：382 nm，发射波长：510 nm。Hcy正常值设定在10 μmol/L，≥10 μmol/L定义为高同型半胱血症（HHcy）。

1.2.3 MTHFR基因型测定 EDTA抗凝外周血1～2  mL，使用天隆全血DNA提取试剂盒、配套自动化提取仪，将外周血、相应试剂加入96深孔板中，选择运行程序，结束后将提取好的DNA吸出保存[6]。使用NANODROP 2000检测DNA浓度（需大于10 ng/μL），260/280纯度在1.8～2.0合格。荧光PCR：使用武汉友芝友人类MTHFR 677基因多态性检测试剂盒，将配套试剂配好加入8联管或96孔板中，最后加入相应样本的DNA。且每一批检测中还需同时检测阴性对照、阳性对照。仪器运行：加好后瞬时离心上机-Themofisher ABI 7500荧光定量PCR仪。分析结果：CC、CT、TT。一般生化检查均由全自动生化分析仪。

1.2.4 干预方式 对照组采取常规血压干预，研究组实施生活与叶酸干预。两组患者均进行饮食与行为生活方式调查，并了解患者喝酒与饮食结构;并对研究组进行相关知识教育，对两组患者进行追踪。

1.3 观察指标与评价标准 比较两组干预前后的日常生活情况，包括吸烟、饮酒、高动物蛋白饮食，并记录干预前后Hcy、总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖、尿素氮、BMI。比较两组的MTHFR基因型以及MTHFR不同基因型的Hcy水平。

1.4 统计学处理 采用SPSS 19.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，组间比较采用t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 对照组22例患者，男11例，女11例;年龄55～83岁，平均（66.54±4.54）岁。研究组22例患者，男12例，女10例;年龄52～83岁，平均（66.23±4.34）岁。两组性别、年龄比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 两组日常生活情况比较 两组干预前吸烟、饮酒、高动物蛋白饮食比例比较，差异均无统计学意义（P>0.05）;干预后，研究组吸烟、饮酒、高动物蛋白饮食比例均低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.3 两组干预前后Hcy、总胆固醇、甘油三酯水平比较 两组干预前Hcy、总胆固醇、甘油三酯比较，差异均无统计学意义（P>0.05）;干预后，研究组的Hcy、总胆固醇、甘油三酯均低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.4 两组干预前后空腹血糖、尿素氮、BMI比较 两组干预前后的空腹血糖、尿素氮、BMI比较，差异均无统计学意义（P>0.05），见表3。

2.5 两组MTHFR基因型比较 两组患者的C/C比较，差异无统计学意义（P>0.05）;研究组的C/T、T/T均低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表4。

2.6 MTHFR不同基因型Hcy水平比较 10例T/T患者的Hcy水平为（21.54±4.58）μmol/L，高于17例C/T的（18.45±3.85）μmol/L，且C/T的Hcy水平高于17例C/C患者的（15.54±3.25）μmol/L，差异均有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

高血压是心脑血管等疾病的重要危险因素，血浆中Hcy水平升高会使得血压出现升高，出现动脉粥样硬化，而H型高血压血管疾病明显升高[7]。但其发病机制并不明确，可能是由于氧化应激，使得平滑肌细胞增殖，促进血小板与粒细胞激活。而Hcy产生的氧化刺激血管平滑肌，使得细胞增殖，造成血管内胶原成分增加，增厚血管壁，破坏了血管顺应性[8-9]。目前认为Hcy的是心脑血管疾病的独立危险因素，而高血压与Hcy同时存在情况下会诱发心血管疾病，因此需要有效控制H型高血压[10]。

MTHFR是Hcy代谢中的关键酶之一，会影响Hcy的浓度，在出现突变后，Hcy会直接出现升高[11]。而本研究中，干预前，两组吸烟、饮酒、高动物蛋白饮食比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。两组干预前Hcy、总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖、尿素氮、BMI比较，差异均无统计学意义（P>0.05）;研究组干预后吸烟、饮酒、高动物蛋白饮食均低于对照组，各生化指标水平均优于对照组（P<0.05）。两组患者的C/C比较，差异无统计学意义（P>0.05）;研究组的C/T、T/T均低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。T/T的Hcy水平高于C/T，且C/T的Hcy水平高于C/C，差异均有统计学意义（P<0.05）。能够发现补充叶酸可有效降低Hcy水平，因此可根据高血压患者情况，及时补充不同剂量的叶酸，对控制H型高血压具有中意义，为我国防治提供了重要的方向[12-13]。经过临床干预，改善患者生活方式，减少相关危险因素。而吸烟与饮酒均会对Hcy水平造成一定影响[14-15]。但原发性高血压患者血浆Hcy，隨着血压等级升高而出现增加。目前我国高血压发病率也在不断上升，本文结果也证实了其与MTHFR C677T基因存在一定联系，而及时补充叶酸可降低Hcy水平[16-17]。其中T/T的Hcy水平最高，可能是由于Hcy升高引起的内皮功能异常、平滑肌细胞增殖等作用[18-19]。因此能够推测MTHFR C677T等位基因可能是H型高血压易感基因，也是H型高血压的危险因素之一[20]。

综上所述，通过社区干预改善患者生活方式，可有效降低Hcy水平，MTHFR C677T与H型高血压之间存在一定相关性，进行检测有助于早期预防心血管疾病，并发现危险因素，值得应用。

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（收稿日期：2019-08-12） （本文编辑：程旭然）