不同煎煮工艺条件下硫熏粉葛中SO2 残留溶出率
2019-01-25李梅珍沈夕坤黄玉宇王玳珠苏州市中医医院江苏苏州215009
李梅珍， 陈 汀， 沈夕坤， 黄玉宇， 蒋 斌， 王玳珠（苏州市中医医院， 江苏 苏州215009）
为防止滥用或过度使用硫磺熏蒸中药饮片， 国家逐步加大了对其管控力度， 并在2010 版《中国药典》 第二增补本中明确了中药材及饮片中亚硫酸盐残留量的限量标准。中药汤剂是中医临床最常用的一种剂型， 通常经过煎煮等工艺加工， 研究表明硫熏饮片中的SO2残留部分在煎煮时会以逸散形式散失， 而剩余的SO2残留则大部分进入煎液中［1-3］。 由于汤剂组方复杂、 单日处方用药剂量没有明确上限［4］， 故因此有必要对煎煮时饮片中SO2残留的溶出情况进行相应的研究， 以期为控制汤剂中的SO2残留量提供相应依据。
汤剂的煎煮通常根据饮片类型、 处方功效差异采用不同工艺， 合适的煎煮工艺是临床药效的保证［5-14］。 由于煎煮时SO2残留的逸散， 不同煎煮工艺条件下硫熏饮片中煎出的SO2残留也有所差异， 故本实验在单因素试验基础上，通过对不同煎煮工艺参数、 水平进行正交试验设计， 综合考察硫熏粉葛饮片中SO2残留溶出率， 分析工艺参数对其影响， 为进一步阐明临床汤剂中SO2残留的大致范围提供依据。
1 材料
调温型电热套（上海苏达实验仪器有限公司）； 电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）； PH 计（上海仪电科学仪器股份有限公司）； 电子天平［梅特勒-托利多仪器（上海） 有限公司］； 恒温磁力搅拌器（上海跃进医疗器械有限公司）； 二氧化硫残留滴定法检测玻璃蒸馏装置、 酸碱滴定管。 氮气（苏州金宏气体股份有限公司， 纯度＞99.999%）； 所用试剂均为分析纯。 硫熏粉葛饮片由天灵中药饮片公司提供， 经苏州市中医医院李梅珍副主任中药师鉴定为正品。
2 方法与结果
2.1 SO2残留测定
2.1.1 水煎液制备 取硫熏粉葛饮片100.0 g， 按不同工艺参数进行煎煮， 趁热滤出药液， 转移至1 000 mL 量瓶中密闭存放， 静置至室温后用新煮沸放冷的蒸馏水定容至刻度， 摇匀， 即得， 密闭存放作为样品溶液备用。
2.1.2 饮片中SO2残留测定［15］参照2015 版《中国药典》 通则第2331 项中SO2残留量的酸碱滴定测定法。
2.1.3 水煎液中SO2残留测定 精密吸取“2.1.1” 项下水煎液100 mL （相当于饮片10 g）， 置于圆底烧瓶中， 加入新煮沸并放冷的蒸馏水400 mL， 余下步骤参照2015 版《中国药典》 通则第2331 项中SO2残留量的酸碱滴定测定法。
2.1.4 饮片重复性、 加样回收率试验 取饮片5 份， 按“2.1.2” 项下方法测定， 测得SO2平均残留量RSD 为5.9%， 表明该方法重复性良好。 另取饮片5 份， 精密加入适量亚硫酸钠固体， 按“2.1.2” 项下方法测得平均加样回收率为81.02%， RSD 为3.1%。
2.1.5 水煎液重复性、 加样回收率试验 取“2.1.1” 项下同一供试品溶液5 份， 按“2.1.3” 项方法测定， 测得SO2平均残留量RSD 为5.7%， 表明该方法重复性良好。 另取5 份供试品溶液， 精密加入适量亚硫酸钠固体， 按“2.1.3” 项下方法测得平均加样回收率为81.44%， RSD为3.6%。
2.2 单因素试验 参考《医疗机构中药煎药室管理规范》相关要 求， 结合 文 献 ［5-14］ 进 行 单 因 素 试 验， 按“2.1.3” 项下方法测定SO2残留量， 平行3 份。
2.2.1 浸泡时间 固定其他工艺参数， 考察浸泡0、 15、30、 45、 60 min 时SO2残留量， 结果见图1。 由图可知， 浸泡15 min 时煎液中SO2残留量略多， 但不同浸泡时间总体差别不大， 表明其对残留溶出量无明显影响。
图1 浸泡时间对SO2 残留量的影响
2.2.2 煎煮时间 固定其他工艺参数， 考察煎煮20、 25、30、 35、 40 min 时SO2残留量， 结果见图2。 由图可知， 随着煎煮时间增加SO2残留量呈下降趋势。
图2 煎煮时间对SO2 残留量的影响
2.2.3 加水量 固定其他工艺参数， 考察加水量8、 9、10、 11、 12 倍时SO2残留量， 结果见图3。 由图可知， 随着加水量增加SO2残留量呈升高趋势。
图3 加水量对SO2 残留量的影响
2.2.4 煎煮次数 固定其他工艺参数， 考察煎煮1、 2、 3次时SO2残留量， 结果见图4。 由图可知， 煎煮2 次时SO2残留量明显高于1 次， 但煎煮3 次时仅略高于2 次。
图4 煎煮次数对SO2 残留量的影响
2.3 正交试验 在单因素试验基础上结合文献［5-14］，对煎煮时间（A）、 加水量（B）、 煎煮次数（C） 进行正交试验设计， 因素水平见表1。
表1 因素水平
根据“2.1.1” 项下方法制备水煎液， 按表1 因素水平进行正交试验， 制备9 组样品， 每组3 份， 测定SO2残留溶出率， 结果见表2， 方差分析见表3。 由表可知， 各因素影响程度依次为煎煮时间（A） ＞加水量（B） ＞煎煮次数（C）， 其各水平影响程度分别依次为A1＞A2＞A3、 B3＞B2＞B1、 C3＞C2＞C1； 因素A、 B 有显著影响（P＜0.05）， 而C无显著影响（P＞0.05）。 由此可知， 当加12 倍量水煎煮3次， 每次20 min 时， SO2残留溶出率最高， 为56.41%； 当加10 倍量水煎煮1 次， 每次40 min 时， SO2残留溶出率最低， 为39.64%。
表2 试验设计及结果
表3 方差分析
3 讨论
本实验发现， 煎煮时间是影响硫熏粉葛中SO2残留溶出率的主要因素， 其次是加水量， 而煎煮次数影响不明显；随着煎煮时间增加， 水煎液中SO2残留量呈下降趋势， 溶出率逐渐减少； 随着加水量增加， SO2残留量呈上升的趋势， 表明溶剂量与其呈正相关。 由此可知， 不同煎煮工艺对硫熏饮片中SO2残留溶出率有一定影响， 故对于硫熏饮片占比较多的处方， 适当增加煎煮时间或改善煎煮时SO2残留逸散条件均对减少其残留量有一定作用。
同时， 硫熏粉葛中SO2残留溶出率为39.64% ～56.41%范围内， 在不同煎煮工艺条件下其溶出率有所差异， 故也可通过选择合适煎煮方式减少SO2残留在汤剂中的溶出。 例如， 对于不适宜久煎的解表类方剂， 应适当控制含硫饮片在处方中的使用量， 以防止溶出过量的SO2残留； 对于煎煮时间通常较长的补益类方剂， 若处方中含硫饮片使用量较多， 则可通过适当增加煎煮时间来消除汤剂中溶出的SO2残留。 SO2残留的过量服用对人体健康有一定损害， 故在煎煮过程中合理减少其溶出量也是增加汤剂品质、 保证用药安全的有效措施。
