大圆颚针鱼骨骼标本的制作

黄永彬 张财文 焦润杰 周海燕 王 松

(安徽科技学院生命与健康科学学院 凤阳 233100)

鱼类在动物进化史中占有十分重要的地位，且具有脊椎动物最复杂的骨骼系统，由于鱼类的骨骼埋藏在肌肉之中，其形态与性状受环境影响变化较小。因此，在研究鱼类的形态特征、分类及演化等方面具有重要的意义，其骨骼标本也为专业课程教学中提供了真实、直观的形态学素材[1]。

大圆颚针鱼(Tylosurusgiganteus)属于颚针鱼目颚针鱼科，系海洋暖水性上层鱼类，分布于西太平洋及印度洋，以及我国的南海和台湾海峡地区，是世界上目前已知唯一的一类头骨与脊柱具有翠绿色骨骼的鱼类[2]。传统的骨骼标本制作方法，在脱脂和漂白的过程中，其骨骼会褪去翠绿色而变成白色，使标本不能真实地反映该科鱼类骨骼的情况。目前对颚针鱼科骨骼标本的制作尚未见报道。本实验通过对大圆颔针鱼骨骼标本的制作，使其全部骨骼在不受损伤的情况下清楚地展现出来，特别是其翠绿色的骨骼颜色得以保留。为研究该科鱼类的骨骼形态特征，也为动物学及鱼类学等教学提供第一手资料。

1 实验材料

1.1 实验动物 实验用大圆颚针鱼采自福建厦门沿海，体长95～105cm。

1.2 试剂与用品 解剖盘、解剖刀、解剖剪、解剖针、镊子、标本缸、细线、热熔胶、铜线、NaOH、 H2O2、二甲苯、丙烯染料。

2 实验方法

2.1 鱼的挑选 选择成熟、新鲜完整的大圆颚针鱼，冰冻保存。

2.2 剥皮去内脏 将实验用大圆颚针鱼取出，流水浸泡至软化，解剖，去除内脏，将眼睛挖出，剥去皮肤，用清水洗净鱼体。

2.3 剔除肌肉 ①将胸鳍、腹鳍、背鳍、臀鳍、尾鳍连同肩带、腰带和支鳍骨等分别取下，剔除大块肌肉；②尽量去除躯干部和尾部的肌肉，并从第2～3节椎骨处分离头部与躯干部，用小镊子深入枕骨大孔将脑髓清除；③大块肌肉基本剔除干净后，再用手术刀和小镊子仔细地剔除附在骨骼上的小块肌肉，细小的部位可用牙刷，在水中轻轻地刷去肌肉；④沿脊椎方向将脊柱与肋骨分开，分离每根肋骨，按顺序用玻璃板进行固定；⑤剔除头部肌肉时要格外小心，动作要轻，可配合牙刷轻轻洗刷，因为鱼类口的部位和眼眶部位的骨骼细小，以免损伤骨骼，不容易去除的肌肉可以保留，待下一步再进行处理。

2.4 脱脂与腐蚀 ①将质量浓度为5g/L的洗衣粉水溶液加热至沸腾，浸入鱼头骨和已经剔除大块肌肉的脊柱骨约1min左右(此过程也有脱脂的作用)，当观察到肌肉变软时取出，用镊子和牙刷继续去除残留的肌肉。鱼的肋骨和鳍由于骨骼较为柔软，容易变形，因此不能进行水煮；②将头部，躯干部的骨骼放入盛有1% NaOH溶液的标本缸中进行腐蚀，处理过程中应经常观察标本的变化情况，待到残留肉质变成透明状即可取出，用清水浸洗，再用毛刷刷去残存的肌肉；鱼鳍可单独放置于1% NaOH溶液的标本缸中腐蚀，肋骨上的肌肉很容易剔除，因此不需要进行腐蚀；③腐蚀后的骨骼转入盛有二甲苯溶剂的带盖容器中进行脱脂，约4～5d后取出，洗净。

2.5 漂白 ①将脱脂和腐蚀后的骨骼(头骨、脊柱和鳍等)分别放置于3% H2O2溶液的带盖容器中浸泡漂白，约1～2d后取出，清水冲洗干净，晾干；②由于肋骨数量较多，细长而柔软，为了防止变形和顺序混乱，要采用玻璃板固定后再进行漂白。取出后洗净晾干，在植物标本夹中垫上几层吸水纸，将肋骨按顺序放入其中夹紧，以固定肋骨的形状。

2.6 复色 大圆颚针鱼的头骨与脊柱具有天然的翠绿色，通过以上步骤，颜色基本已经褪去，因此还必须进行复色处理。先用丙烯染料进行调色，调配至与头骨与脊柱颜色一致的翠绿色，配成1%的溶液。再将头骨与脊柱骨放入染色约2h后取出，即可恢复其天然的翠绿色。

2.7 整形装架 处理后的骨骼经过晾干处理后，即可整形装架。先用铜丝穿过各个脊椎骨的椎管，固定脊柱。再穿入头骨，整理好每块骨骼的形态，用热熔胶将脱离的骨骼互相连接牢固，把整体连接整形装架。最后将带骨和鳍骨摆好位置，进行粘贴和固定。等到标本完全干燥后，再用白乳胶将骨骼固定一次，标本的定型就完成了。

2.8 保色保存 大圆颚针鱼脊柱及头骨大部具有翠绿色，经过丙烯染料复色后极易氧化，因此需等标本完全干燥后，立即喷涂多层清漆，以保证骨骼与空气完全隔绝，达到长久保存和保色的作用。

3 结果与讨论

鱼类骨骼数量多，容易脱落(特别是肋骨)，因此传统制作骨骼标本的方法很容易造成骨骼的散架，脱落和变形，不利于后期的拼接和装架，而且在脱脂和漂白的过程中，其骨骼会褪去翠绿色而变成白色。本实验通过以下几种方法来保持大圆颚针鱼骨骼标本的完整性和真实性： ①采用降低浓度和延长时间对鱼体进行腐蚀，脱脂和漂白，虽然加长了标本制作时间，但完整地保护了标本的形态特征；②大圆颚针鱼肋骨数量多，细长且较为柔软，很容易变形，因此不能进行高温腐蚀和脱脂，采取2块玻璃板按顺序将肋骨固定后再进行漂白，取出晾干后，立即放入垫有吸水纸的植物标本夹中夹紧，以固定肋骨的形状和顺序；③鳍骨也很容易变形，因此也不能进行高温腐蚀和脱脂，只能通过冷剔的方法尽可能剔除肌肉；④头骨和脊柱采用1%丙烯染料染色的方法，来恢复大圆颚针鱼骨骼的天然翠绿色，复色后喷上清漆可防止氧化(图1)。

图1 大圆颚针鱼骨骼标本