川崎病患儿外周血正五聚蛋白3水平观察

蒋丰智，曾俊峰，赵青，唐明生，黎小秀

(1 东莞市妇幼保健院，广东东莞523000；2 东莞市第三人民医院)

临床及流行病学资料[1]显示，川崎病(kawasaki disease,KD)是一类因感染触发的急性自身免疫性血管炎综合征，是儿童获得性心脏病的最重要病因。KD患儿的早期识别对治疗及预后非常重要，目前KD的诊断主要依靠临床表现和心脏超声检查，临床上广泛应用的常规炎性指标(WBC、PCT、CRP、ESR)和D-二聚体、PLT等凝血指标特异性不是很高，寻找新的KD生物标志物意义重大[2]。正五聚蛋白3(pentraxin-3，PTX3)作为一种与血管炎症密切相关的急性时相反应蛋白，在KD患儿的治疗中备受关注。本研究观察了KD患儿外周血PTX3水平变化，并探讨其意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2017年1月～2018年5月东莞市妇幼保健院和东莞市第三人民医院收治的KD患儿64例(KD组)，其中男39例、女25例，年龄3～70个月。纳入标准：①符合2017年美国心脏协会(American Heart Association，AHA)临床诊断标准[3]；②患儿发病年龄<6岁；③按病情进行静脉免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin，IVIG)和阿司匹林标准治疗后临床恢复良好者；④能在门诊定期复诊者。排除标准：既往有心血管系统(包括先天性)、免疫系统疾病或近期使用过免疫调节剂的患儿。KD组患儿在治疗前接受心脏彩超检查，参照相关文献[4]标准，依据左、右冠状动脉主干内径测定值评价患儿冠状动脉病变程度，将64例急性期KD患儿分为冠脉损伤组(CAL组，18例)和非冠脉损伤组(NCAL组，46例)。同期选取体检健康儿童30例(健康组，男20例、女10例，年龄6～60个月)、发热超过5 d的呼吸道感染患儿30例(发热组,男16例、女14例，年龄5～62个月)作对照。本研究获两家医院伦理委员会批准，患儿及家长知情同意。

1.2 外周血PTX3和炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)检测 KD组患儿分别于临床病程急性期[发病后第5～7天)、亚急性期(发病后第11～13天，连续注射IVIG(1 g/kg)2 d并口服阿司匹林热退48 h以上]以及恢复期(发病后第4～5周)各采集静脉血1次，标本均静置1 h后3000 r/min(离心半径10 cm)离心10 min，分离得血清1.5～2 mL，保存于-30 ℃冰箱备用。健康组和发热组儿童于入组时常规无菌静脉采血3～4 mL。采用ELISA法检测各组儿童外周血PTX3和炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平。

2 结果

2.1 各组外周血PTX3和IL-1β、IL-6、TNF-α水平比较 结果见表1。

表1 各组外周血PTX3和IL-1β、IL-6、TNF-α水平比较[M(P25,P75)]

注：与健康组相比，﹡P<0.05；与发热组相比，﹟P<0.05；与KD组恢复期相比，△P<0.05；与KD组亚急性期相比，☆P<0.05。

2.2 CAL组和NCAL组患儿外周血PTX3和IL-1β、IL-6、TNF-α水平比较 结果见表2。

表2 CAL组和NCAL组患儿外周血PTX3和IL-1β、IL-6、TNF-α水平比较[M(P25,P75)]

注：与NCAL组相比，﹡P<0.05。

2.3 KD组患儿外周血PTX3与IL-1β、IL-6、TNF-α的相关性分析 KD组患儿外周血PTX3与IL-1β、IL-6、TNF-α均呈正相关(r分别为0.655、0.679、0.605，P均<0.01)。

2.4 KD组患儿急性期外周血PTX3对KD的诊断结果 因发热组和健康组间外周血各指标差异均无统计学意义，合并为对照组。ROC分析显示，KD组患儿急性期外周血PTX3诊断KD的AUC为0.909(95%CI为0.861～0.957，P<0.01)，计算可得最大Youden指数为0.682。取PTX3>11.7 μg/L为界值，外周血PTX3诊断KD的灵敏度为76.6%、特异度为91.7%。

3 讨论

研究[5]认为，KD为患儿被多种微生物损伤后促进B细胞、T细胞参与免疫激活，导致炎性介质和细胞因子瀑布样效应，最后引起全身炎症反应。IL-1β、IL-6、TNF-α是研究较多的炎性细胞因子。本研究发现，KD患儿急性期炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α均较健康组和发热组明显升高，治疗后明显下降，恢复期已趋正常，与健康组和发热组无差异，与相关研究[6,7]结果一致。因亚急性期时容易出现IL-1β、IL-6、TNF-α指标假阳性，故IL-1β、IL-6、TNF-α检测仅可考虑作为KD急性期实验室诊断指标。

PTX是先天性体液免疫的重要组成部分，包括长链家族及短链家族成员。长链家族中的PTX3作为惟一的可溶性模式识别受体，仅在接受并结合TNF-α、IL-1β等炎症因子、Toll样受体激动剂、脂多糖等炎症信号配体时合成，正常情况下表达很低。PTX3在体内参与免疫防御、炎症、细胞凋亡、血管重塑等多种生物学反应，与众多免疫相关性疾病有密切关系[8, 9]。PTX3主要由血管内皮细胞和巨噬细胞产生，可直接地反映动脉局部炎症状态[10]。外周血PTX3反应迅速，升高时间约6～8 h，且在炎症反应中存在时间持久[11,12]。研究[13]证实，PTX3在血液中的存在时间较长，易检测，且基因较恒定，不受总胆固醇、高密度脂蛋白、血红蛋白、吸烟、肥胖和性别等因素影响，利于临床应用。在过敏性紫癜性肾炎、抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎等研究[14,15]中均发现血清PTX3水平可反映血管炎严重的程度及活动性。本研究发现，KD组患儿PTX3与炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α成正相关，说明PTX3的产生与免疫应答的机制相关；ROC显示急性期外周血中PTX3诊断KD的效能较高，若以PTX3>11.7 μg/L为诊断界值，特异度可达91.7%、灵敏度为76.6%。CAL组患儿PTX3水平高于NCAL组，且在病程中也表现出与病情活动相关变化趋势，故外周血中PTX3水平与疾病严重程度、活动性及治疗反应相关，适用作为监测血管炎进展的标志物。本研究发现，KD组患儿恢复期PTX3水平仍高于健康组和发热组，说明血管炎症部位产生的PTX3在发病后至少持续1个月，可指导临床上进行持续干预。

综上所述，外周血PTX3作为一种新的生物学标志物，有助于KD患儿的临床诊断、疾病活动性和严重性评估。