细胞黏附分子1基因启动子甲基化和宫颈癌关系的Meta分析

曹怡

[摘要]目的 探讨细胞黏附分子1（CADM1）基因启动子区甲基化与宫颈癌的关系。方法 计算机检索PubMed、Medline、Embase、Cochrane、中国知网、万方、维普数据库，按照拟定的纳入排除标准筛选文献，检索年限为建库至2019年2月28日。采用Review Manager 5.3和Meta-DiSc 1.4软件进行Meta分析，计算合并的诊断比值比（DOR）、敏感度、特异度，并绘制集成受试者工作特征曲线（SROC）。结果 共纳入14篇文献，包括宫颈癌患者587例、高度鳞状上皮内病变（HSIL）患者472例、对照506例。CADM1甲基化诊断宫颈癌的合并DOR为20.97，敏感度为0.68，特异度为0.91，曲线下面积（AUC）为0.88;CADM1甲基化诊断HSIL的合并DOR为6.31，敏感度为0.55，特异度为0.81，AUC为0.77。结论 CADM1基因高甲基化和宫颈癌、HSIL的发生存在相关性，CADM1基因甲基化作为生物标志物可能有助于宫颈癌筛查。

[关键词]细胞黏附分子1;DNA甲基化;宫颈癌;Meta分析

[中图分类号] R737.33          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-4721（2019）11（a）-0012-05

Meta-analysis of the relationship between methylation of cell adhesion molecule 1 gene promoter and cervical cancer

CAO Yi

School of Biological Science & Medical Engineering， Southeast University， Jiangsu Province， Nanjing   210018， China

[Abstract] Objective To investigate the relationship between methylation of cell adhesion molecule 1 （CADM1） gene promoter and cervical cancer. Methods Published studies were searched from PubMed， Medline， Embase， Cochrane， China National Knowledge Infrastructure， WANFANG and CQVIP database， the retrieval period was to build the database untill February 28， 2019. The pooled diagnostic odds ratio （DOR）， sensitivity， specificity were calculated and the summary receiver operating characteristic curve （SROC） was plotted using Revman 5.3 and Meta-DiSc 1.4 software. Results A total of 14 studies， comprising 587 tumor samples， 472 high-grade squamous intraepithelial lesion （HSIL） samples and 506 normal samples， were analyzed in this Meta-analysis. Methylated CADM1 in cervical cancer achieved the pooled DOR， sensitivity， specificity were 20.97， 0.68， and 0.91， and the area under the curve （AUC） was 0.88. Meanwhile， CADM1 methylation in HSIL achieved the pooled DOR， sensitivity， specificity were 6.31， 0.55， and 0.81， and the AUC was 0.77. Conclusion CADM1 promoter hypermethylation is significantly associated with HSIL and cervical cancer， it could be an auxiliary biomarker for cervical cancer screening.

[Key words] Cell adhesion molecule 1; DNA methylation; Cervical cancer; Meta-analysis

宮颈癌是最常见的妇科癌症之一，目前主流的宫颈癌筛查方案是通过细胞学检查和人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）检测进行。然而，细胞学筛查准确性低，可重复性差[1]，HPV检测敏感性高，但高达90%的一过性感染率限制了其特异性[2]。因此，需要开发新的高敏感性和特异性的生物标记物应用于宫颈癌筛查。

细胞黏附分子1（cell adhesion molecule 1，CADM1），又称为肺癌抑制基因1（tumor suppressor in lung cancer 1，TSLC1），是一种肿瘤抑制基因，主要介导细胞间黏附的稳定[3]。在宫颈癌中，有大量研究评估了CADM1甲基化与宫颈癌发展的关联。本研究将这些数据结合起来进行Meta分析，评估CADM1甲基化在宫颈癌及癌前高度鳞状上皮内病变（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）的诊断性能，现报道如下。

1资料与方法

1.1纳入及排除标准

文献纳入标准：①病例对照研究;②评估CADM1甲基化在宫颈癌中的诊断性能;③检测人CADM1基因;④对照使用正常或良性疾病样本;⑤研究有可提取四格表的数据。

排除标准：①综述、摘要和病例报告;②体外研究;③没有完整数据的研究。对于重复数据，仅选择最新或详细的数据集。

1.2检索策略

检索的外文数据库为：PubMed，Cochrane，Med-line和Embase，检索式为：（“CADM1” or “TSLC1”） and （“methylation” or “methylated”） and （“cervical”）;檢索的中文数据库为：中国学术期刊全文数据库、万方数据库和维普中文科技期刊数据库，检索式为：（“CADM1”或“TSLC1”）和（“甲基化”和“宫颈”）。检索年限为建库至2019年2月28日。

1.3文献筛选、资料提取、质量评价

检索得到的文献去除重复后阅读标题和摘要进行初步筛选，再阅读全文根据纳入及排除标准进一步筛选。对选定的研究提取以下信息：出版年份、第一作者姓名、国家、样本类型、疾病及对照的样本量、甲基化检测方法。使用诊断性试验准确性质量评价工具[4]（quality assessment of diagnostic accuracy studies 2，QUADAS2）对研究质量进行评分。

1.4统计学方法

统计分析使用软件Review Manager 5.3和Meta-DiSc 1.4进行，合并诊断比值比（diagnostic odds ratio，DOR）、敏感度、特异度及其相应的95%置信区间（Confidence interval，CI）并绘制集成受试者工作特征曲线（summary receiver operating characteristic curve，SROC）以评估CADM1甲基化状态与HSIL、宫颈癌的关联。纳入研究的异质性通过Q检验和I2检验来评估。当发现显著的异质性（I2≥50%或PQ-检验≤0.1）时，使用随机效应模型汇总结果;否则应用固定效应模型。通过回归分析探索异质性的来源，通过漏斗图评估发表偏倚。

2结果

2.1文献检索结果

使用检索策略共检索出177篇潜在相关研究，排除86篇重复后通过阅读标题和摘要排除53篇研究。阅读全文后排除22篇无可纳入数据的研究，2篇非病例对照研究。最终纳入了14篇文章，其中1篇文章包含2项独立研究的数据，共15项研究。

2.2纳入研究的基本特征与质量评价

纳入文献的基本特征见表1，所有研究的诊断金标准均为组织病理学。

采用QUADAS2的条目评估了每篇文献的研究质量，结果见图1。

2.3 Meta分析结果

2.3.1 CADM1甲基化与宫颈癌发生风险  共11项研究[5，8-13，15-18]（n=472）报道了CADM1甲基化与宫颈癌发生的风险，各研究间无统计学异质性（I2=7.1%，P=0.38），固定效应模型Meta分析结果显示，合并敏感度为0.68（95%CI：0.63～0.72），特异度为0.91（95%CI：0.87～0.94），DOR为20.97（95%CI：12.76～34.44），SROC的曲线下面积（area under the curve，AUC）为0.88（图2）。

2.3.2 CADM1甲基化与HSIL发生风险  共15项研究[5-18]（n=587）报道了CADM1甲基化与HSIL发生的风险，各研究间有统计学异质性（I2=60%，P=0.002），随机效应模型Meta分析结果显示，合并敏感度为0.55（95%CI：0.51～0.59），特异度为0.81（95%CI：0.78～0.85），DOR为6.31（95%CI：3.41～11.69），SROC的AUC为0.77（图3 ）。

为了研究HSIL的分析中观察到的显著异质性，本研究进行了回归分析，使用基于国家、检测方法、样本类型三个变量的回归模型，结果表明，异质性主要来源于样本类型（表2）。

2.4发表偏倚评估

发表偏倚的漏斗图未表现出明显的不对称性，表明本研究中发表偏倚较小（图4）。

3讨论

DNA甲基化是癌症检测的有力工具，目前已发表了大量致力于寻找与宫颈癌的检测、进展或预后相关的甲基化生物标志物的研究[19]。不少研究显示CADM1启动子高甲基化与宫颈癌有关，本研究通过诊断性Meta分析评估了CADM1在宫颈癌中的诊断性能。

本研究Meta分析结果提示，在宫颈癌中，CADM1甲基化的汇总的DOR为20.97，SROC的AUC为0.88。HSIL中，汇总的DOR为6.31，SROC的AUC为0.77。SROC是评估诊断准确性的指标，AUC>0.7被认为是良好的风险预测因子。DOR也是评估诊断准确性的指标[20]，DOR<1.0表明诊断的鉴别值较低，高的DOR值代表更好的诊断准确性。本研究的AUC和DOR结果提示，CADM1甲基化用于宫颈癌/HSIL检测具有良好的性能。本研究在CADM1高甲基化与HSIL风险之间关联的分析中发现了显著的异质性。本研究的回归分析结果提示，样本类型的差异是异质性存在的主要原因。各研究中使用的样本为组织和宫颈脱落细胞，宫颈脱落细胞样本受病变位置、采集方法等影响，肿瘤细胞的含量可能差别巨大，因而导致异质性的结果。

本研究有一些局限性，首先，大多数纳入研究使用MSP进行检测，研究使用的引物不同会导致潜在的发表偏倚;其次，纳入的研究均采用病例对照设计可能导致选择偏倚;再次，未发表的研究及其他语言的研究未包括在本研究中。

综上所述，本Meta分析表明，CADM1甲基化在宫颈癌检测中具有良好的诊断性能，可能被视为宫颈癌检测的辅助生物标志物，未来仍需前瞻性大样本的临床对照研究进一步加以评估。

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（收稿日期：2019-03-15  本文编辑：孟庆卿）