肾细胞癌中MMP-9和VEGF的表达及其临床诊断价值

李 娟

（抚顺矿务局总医院病理科，辽宁 抚顺 113008）

肾细胞癌是我国发病率较高的泌尿系恶性肿瘤，占全部成人恶性肿瘤的2%～3%[1]。细胞的迁移会首先降解细胞外基质，而基质金属蛋白酶（MMPs）即是用以降解细胞外基质的一组蛋白酶，其在肿瘤的生长、浸润和转移中的作用受到关注。血管内皮细胞生长因子（VEGF）为高效血管调控因子。本研究旨在探讨肾细胞癌中MMP-9和VEGF的表达及及其临床诊断价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：收集2014年5月至2016年5月我院收治的80例肾细胞癌患者，纳入标准：①年满18周岁；②均经手术病理明确诊断；③术前未行放化疗等其他治疗。其中男性42例，女性38例，年龄42～76岁，平均（57.75±6.77）岁。

1.2 方法：收集患者的癌组织标本与周围正常组织标本，所有标本经甲醛固定、石蜡包埋，4 μm厚连续切片，按试剂盒说明书行免疫组化染色、兔抗人多克隆抗体MMP-9、VEGF试剂盒均来源于美国SantaCruz。依次完成脱蜡，修复，一抗孵育，二抗孵育，DAB显色等，用PBS代替一抗作为阴性对照。结果判读：在200倍显微镜下选5个视野，细胞质或细胞膜内出现棕黄色或棕褐色颗粒（2～3分）表示阳性，计算每个视野中阳性细胞的比例，＜25%计1分，26%～50%计2分，51%～75%计3分，＞75%计4分，将着色得分与阳性细胞比例得分相乘，最后取5个视野的平均值，＞2分为阳性结果。

1.3 统计学方法：采用SPSS19.0统计学软件进行统计分析，进行t或卡方检验，检验水准α=0.05，P＜0.05具有统计学差异。

2 结果

癌组织中MMP-9表达（+）有63例（78.8%）、VEGF表达（+）有53例（66.3%）；癌旁组织中MMP-9表达（+）有11例（13.8%）、VEGF表达（+）有4例（5.0%）；比较具有统计学意义（P＜0.05）。相关性分析显示，VEGF与MMP-9表达呈正相关（r=0.633，P＜0.05）。

3 讨 论

肿瘤的侵袭与转移是一个涉及基质降解、肿瘤血管形成等多个步骤的复杂过程[2]。MMPs是降解细胞外基质的主要酶类，一般分为分泌型MMPs与膜型MMPs，既往研究表示，分泌型MMPs表达越强，其降解ECM与基底膜的能力越强，肿瘤发生转移的危险越大[3]。MMP-9即属于分泌型MMPs，能够降解Ⅳ型胶原，而Ⅳ型胶原正是组成血管基底膜的重要成分；此外，还能促进新生血管形成，这无疑对肿瘤的侵袭与转移起到了推波助澜的作用。本结果显示，肾细胞癌组织中MMP-9的阳性表达比例明显高于癌旁组织。既往研究表明，TNM分期越高、低分化以及伴随淋巴转移，MMP-9蛋白阳性表达越高，提示MMP-9蛋白的表达对肿瘤的分化程度、侵袭与转移有影响。

丰富的血管生长是癌细胞转移的先决条件。VEGF可特异性激活内皮细胞，参与血管形成的过程，与肿瘤的发展进程密切相关。研究表明，VEGF可刺激MMPs和组织因子的产生，诱导凝血酶的生成，使明胶酶原A激活，促进细胞增生；此外，还可提高血浆酶原活化因子的活性，水解细胞外蛋白，刺激毛细血管更多的生成；还能够使血管内皮细胞通透性发生改变，促进血管的生成。研究表明，VEGF在很多实体瘤中都表达过度[5]。本研究结果显示，癌组织中MMP-9表达（+）有63例（78.8%）、VEGF表达（+）有53例（66.3%），明显高于癌旁组织。经相关性分析显示，VEGF与MMP-9表达呈正相关（r=0.633，P＜0.05）。提示，MMP-9、VEGF在肾细胞癌组织中表达上调，MMP-9、VEGF在肾细胞癌组织中表达上调，且二者表达呈正相关，MMP-9与VEGF可能相互协同或调节对肿瘤的分化、侵袭与转移起作用，可作为肾细胞癌诊断的生物学指标。