微量元素检测分析前影响因素
2019-01-07周裕腾
周裕腾
(福建省福州儿童医院 福建福州 350005)
1 前言
微量元素是指人体内含量为10~104 μg/L 的元素,其检测分析结果受检测样本预期浓度及检测方法的影响。从当前对测定误差及检测影响因素的分析发现,元素天然丰度及种类或样本预期浓度产生的误差远远小于污染产生的误差。近年来,研究领域针对微量元素检测分析前的变异控制展开了更为深入的探究,全方位分析了影响微量元素检测的因素。本文从内外环境入手进行具体探究,以便能够找到合适的措施弥补对检测方法灵敏度及精准度造成的影响,保障微量元素检测分析结果的科学性及客观性。
2 检测设备及检测环境
检测设备中常用的样品采集器具及存储容器是造成样品污染的主要因素,大部分实验室会通过书面制度对检测设备的处理及管理做出规定,以规避检测设备污染情况。通常实验室会通过酸洗的方式处理所有玻璃器皿及塑料器具,即用浓度10%的硝酸溶液进行浸泡,再使用Ⅰ类水进行反复冲洗;而导管及针头类型设备会使用浓度为4%的超纯极乙酸及浓度为2%的超纯级硝酸进行浸泡与漂洗12 h,配合预期下限检测方法对浸泡液中微量元素含量进行检测,若结果超过检出水平,需要进一步分析,判断污染是否还具有临床意义。虽然拥有严格的管理制度及设备处理标准,但是在实际操作中,随机污染的情况仍然不可避免。为了减少检测设备污染情况,应加大管理力度及人力资源投入力度,对检测设备进行更为严格且细致的检查,认真验收采购的器具与耗材[1]。
此外,微量元素检测过程中的环境污染也十分常见。实验室理论要求达到100 级洁净实验室,但在实际情况中很难达到此标准。因此,在实验室环境管理与控制过程中,应尽量控制尘埃及气溶胶对微量元素检测分析的影响,实验台及地面、设备表面等物体的表面清洁应尽量选择湿扫、湿擦方式,减少尘埃的出现;分析天平的使用应尽量在无尘柜中进行,而处理非干燥组织或样本过程中,要使用Ⅱ级生物安全柜确保环境的稳定。
3 实验用水
微量元素检测是一项对检测过程精密性、客观性有着严格要求的实验,其对于实验用水有着具体的要求与标准,在实验前需要做好用水筛选,以便保障检测结果的有效性,这主要是因为水中也含有不同成分及不同含量的微量元素,其会直接影响实验结果的客观性及真实性。通常会要求微量元素检测实验使用高纯度去离子水,即Ⅰ类水(水温低于25℃、电阻率高于1.0×107Ω/cm),但使用前仍然需要检测水质,准确判断水源是否存在污染情况[2]。
此外,在微量元素检测实验过程中,必须使用高纯度级别试剂,检测前需严格检查试剂的质量及级别。
4 样品采集与处理
人体微量元素检测主要采用血液标本或尿液标本,但不同种类微量元素检测使用的样本存在一定差异,如检测体内汞元素含量、铅元素含量时,应尽量使用全血标本,常见微量元素使用血浆或血清标本;血液标本尽量选择静脉血液,其受污染的影响最小。目前采血方式最简便的为指尖采血,但是这种方式采集的样本污染程度较高,无法保障检测结果的准确性。样本采集过程中要避免样本受到外源性的污染,尤其是内外源性水平存在较大差异时,外源性污染会导致检测结果严重失真。从保障检测结果准确性角度来讲,建议采取真空采样采集微量元素检测样本,但每次使用真空采样管前,要对采样管、采血枕头、胶塞等设施的微量元素进行检测,若出现超过可接受下限情况,需采用酸漂洗法或血清漂洗法进行处理。
酸漂洗法的具体操作为:每一批次的采血管或注射器需要随机抽取5~10 支进行检测,在采血管中加入5 mL 浓度为5%的硝酸溶液,并选择空白对照试剂;采血管验证环节需要保持其处于水平状态,保障漂洗液能够与胶塞充分接触,但验证时间较长,有时会超过24 h;保障漂洗液与采血管充分接触后,根据待测元素的检验要求制备漂洗液样本,做好漂洗液及空白对照样本处理;最终检测采血管的污染情况,如有毒元素含量、微量元素含量、超微量元素含量的检测等[3]。
血清漂洗法的具体操作过程中,样本采集采血管及试剂的选择与处理是第一环节,还包括皮肤消毒、采样技术的操作、样本最终分类等环节。血清漂洗法的具体操作与酸漂洗法相同,但其适用更多环节,需要注意以下事项:(1)静脉采血需要先进行皮肤消毒,可以使用浓度为0.2%的酒精、纯水等,禁止使用任何含碘的消毒试剂,采集后应通过摇晃的方式保障样本与抗凝剂充分接触;(2)血液样本采集过程中尽量保障每人单独使用采血管,避免造成交叉污染;(3)采血过程中禁止通过注射器采血再注射到采血管,因为注射器可以携带污染元素,导致样本污染;(4)样本采集完成后要做好密封工作,选择安全的存储工具,避免出现系统性的样本污染情况[4]。
此外,微量元素检测中还可以使用尿液作为样本,大多情况下会以24 h 内的尿液作为样本,其可以更准确地获得检测分析结果。尿液样本通常会通过肌酐校正处理,但是要注意驱排铅治疗过程中应选择8 h 内的尿液,这样可以更客观地反映尿液中铅排出情况。尿液样本采集过程中,采集器具中需要添加超纯的硝酸,保障其环境的pH 在2.0 以下,维持样本的稳定[5]。
5 结语
综上所述,微量元素检测分析对环境及检测器具的要求都较高。为了保障检测结果的准确性及客观性,应做好检测人员的培训工作,使其全面了解检测分析前的影响因素,保障检测分析过程中的环境及检测设备的洁净,并做好样本采集工作,尽量减少污染元素的影响。此外,人体微量元素检测前24 h内食物的摄入也会对检测结果产生一定的影响。为了保障结果的准确性,检测前应告知被检测者避免食用啤酒、茶叶或特殊水果等含钴元素及铅元素等微量元素较高的食物。