浅析非洲猪瘟疫苗研究

刘海云

（河南省新野县动物卫生监督所 473500）

非洲猪瘟（ASF） 在东非和南非的Warthogs 和Tampan 已经传播了许多世纪。自其公开报告以来，该病在最先在非洲快速的蔓延，给非洲的养猪户造成了巨大的经济损失，随后，非洲猪瘟又传播到了欧洲，最先在葡萄牙被发现，之后在欧洲普遍传播开来[1]。近年来的监测显示，非洲猪瘟已成为俄罗斯的一种地方病，非洲猪瘟在俄罗斯的疫情十分严重，俄罗斯存在发病猪及潜在的带毒猪，非洲猪瘟在俄罗斯很难彻底清除，给俄罗斯养殖业带来很大影响。我国与俄罗斯有较长的接壤范围，俄罗斯非洲猪瘟有传入我国的趋势与危险性，而且近年来正在增加，越来越具有危险性[2]。尽管在国外有成功根除非洲猪瘟这种疾病的例子，但目前由于我国养殖环境的条件较差，养殖技术和管理还跟不上，导致该病在我国比较难以防控，易于爆发。目前，世界各国各个研究机构都在尽最大的努力致力于研究非洲猪瘟疫苗，以更好的防控该疾病，本文主要综述了非洲猪瘟目前疫苗的类型、种类和各种疫苗的特点，以期为临床上非洲猪瘟疫苗的合理使用提供宝贵建议，更好的防控非洲猪瘟的爆发。

1 灭活疫苗

灭活疫苗是一种最原始的与最经典的疫苗类型，其制备方便、快捷，自非洲猪瘟发现以来一直在开发，由于早期疫苗技术不成熟，疫苗的效价活性等并不特别强，导致非洲猪瘟灭活疫苗在给猪注射之后防治效果并不理想，有些注射了非洲猪瘟灭活疫苗的猪场，在非洲猪瘟全面大面积爆发时，仍会感染非洲猪瘟，爆发本病。现在已经由很多研究发现，非洲猪瘟的灭活疫苗效果并不好，疫苗免疫效果弱，因此，灭活疫苗研发较少，临床使用不多[3]。在某些情况下，非洲猪瘟病毒接种于肺泡巨噬细胞悬液制备的灭活疫苗没有保护作用，或仅起部分保护作用[4]。Freund 用完全辅助乳化的方法制备的ASFV 感染猪脾脏匀浆得到的灭活疫苗只能使ASF 同源菌株的保护率提高到70%，存活的猪均出现非洲猪瘟的临床症状。由于非洲猪瘟爆发时会给猪造成巨大的伤害，而非洲猪瘟的灭活疫苗的免疫效果并不佳，因此，建议临床上尽量少用非洲猪瘟的灭活疫苗。

2 弱毒疫苗

20 世纪50 年代，科研工作者发现在爆发非洲猪瘟之后，那些感染非洲猪瘟病毒之后，抵抗该病并且存活下来的猪，其能对相同基因型的非洲病毒再次感染产生免疫力与抵抗力。之后多年，科学家们在致力于弱化非洲猪瘟病毒的毒力，经过不懈的努力，研究者终于发现了降低非洲猪瘟病毒毒力的方法。科学家将非洲猪瘟病毒通过18I 细胞经过多次传代后，接种家猪未引起致命感染。1963 年，研究者证实，猪骨髓细胞ASF减毒疫苗能抵抗非洲猪瘟的侵袭。在弱毒疫苗研发初期，毒力不稳定，有些弱毒的疫苗弱毒株会发生毒力返强，最开始减毒疫苗在葡萄牙应用，产生很多副作用，许多猪在接种后出现运动失调、肺炎、咳嗽等症状。科学家推测，这可能与接种非洲猪瘟的减毒疫苗有关，随后在爆发非洲猪瘟的猪场分离到减毒株。非洲猪瘟的弱毒疫苗接种有一定风险，接种动物后有些动物会很敏感，发生应激，甚至死亡。研究发现，当接种非洲猪瘟减毒疫苗的猪暴露于口蹄疫、牛瘟或猪瘟环境下时，猪更容易死亡[5]。非洲猪瘟弱毒疫苗的安全问题一直是人们关注的焦点，正因如此，非洲猪瘟弱毒疫苗临床试验失败次数较多，临床应用受到限制。目前，通过自然筛选或细胞通道弱化技术，已有研究均证实ASF 减毒疫苗能够抵抗菌株的强攻击。目前关于非洲猪瘟，很多科学家在研究其致弱机制。随着21 世纪，分子生物技术的飞速发展，全基因组测序技术的应用，非洲猪瘟的基因序列可以被测定而出，目前通过基因敲除手段，可以对非洲猪瘟病毒的关键基因进行敲除，从而使病毒致弱，这种手段的应用前景越来越大。基因敲除致弱非洲猪瘟病毒的主要手段是通过筛选突变基因，敲除的基因往往不是点突变基因，因此，其毒力返强的可能性很低，致弱之后的毒力非常稳定，此方法极具应用前景。

3 DNA 疫苗

DNA 疫苗（DNA vaccine），是主要主要用于基因治疗为目的研究出的疫苗，是当今疫苗研究领域的新方向与新技术，DNA 疫苗是一种突破性技术。目前科学家正在研究各类病毒的DNA 疫苗，有关猪瘟病毒的DNA 疫苗研究也已经开始。J.M.Argilaguet 等将P30 和P54 连接到真核表达质粒pCMV-PQ 中，然而该DNA 疫苗在对猪进行免疫后不能良好的抵抗猪瘟病毒的攻击。随后，科学家把非洲猪瘟病毒的血凝素基因和泛素基因连接到上述DNA 疫苗中，结果仍不能达到完全的保护作用，一些免疫的猪仍然会感染猪瘟病毒。Lacasta 等利用表达文库（Expression library） 构建了4029 个表达质粒，并对其进行了猪瘟病毒的免疫保护试验，结果保护率仅为60%[6]。目前有关非洲猪瘟的DNA 疫苗还无法抵抗高毒力的非洲猪瘟病毒，但对于表达质粒的研究，这标志着有效非洲猪瘟DNA 疫苗的研制向前迈出了一大步。目前有很多的研究在探索非洲猪瘟基因组和保护抗原，以及表达载体的不断修饰和优化，这些研究将会使DNA 疫苗将在未来的非洲猪瘟疫苗市场上占有一席之地。

4 其他新型疫苗

复制缺陷型病毒疫苗是近年来备受关注的一种新型疫苗。非洲猪瘟复制缺陷疫苗是一种通过去除非洲猪瘟减毒株复制过程中必需基因的基因工程方法所研制的疫苗。因此，它只能在为复制提供必要基因的辅助细胞系中进行有效复制，而不能在受感染的动物体内进行复制，因此这种疫苗可以最大化的保持病毒的原始状态，保证完整病毒的免疫原性，不产生免疫副作用。

5 展望

非洲猪瘟只传染猪不传染人。非洲猪瘟不是“人畜共患病”，不传染人，但对猪来说非常致命。非洲猪瘟是一种烈性传染病，感染后病猪的体温升高、呼吸急促、皮肤发绀、内脏器官出血，对于病猪的影响非常大，而且传染性与病死率很高，会给养殖业造成巨大的损失。对于非洲猪瘟疫苗的研制迫在眉睫，然而研制稳定良好的疫苗需要一个长期的过程，目前用于非洲猪瘟的疫苗已经被研制出来多种，然而在使用过程中可能会出现病毒变异等，对疫苗的效应产生影响，因此，对于非洲猪瘟的疫苗研究仍在不懈努力与向前发展。防范非洲猪瘟，需要从政府到养殖场各部门共同进行协作，才能更好地防范[7]。