上杭县鸭瘟疫苗饮水免疫效果分析观察

熊伯立

（福建省上杭县蛟洋镇畜牧兽医水产站 364200）

鸭瘟是鸭、鹅等水禽的一种常见传染病，对养鸭生产威胁很大。生产上一般采取注射鸭疫苗的方法预防鸭瘟病。但采取注射的方法费工费时。偶然发现白砂镇某农户长期采用鸭瘟活疫苗饮水方法免疫预防鸭瘟，但缺乏此方法效果方面相关数据，为了了解用鸭瘟活疫苗饮水方法免疫预防鸭瘟的效果组织了本次试验。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验动物与分组：选取上杭县来藩养鸭场1 日龄雏黑番鸭100 羽，随机分成 5 组，每组 20 羽。即分为对照组、注射组、饮水1 组、饮水2 组、饮水3 组。5 个组分成独立的单栏饲养，均采取厚垫料养殖，采取一致的饲养条件。

1.2 鸭瘟活疫苗

选用哈药集团生物疫苗有限公司生产的鸭瘟活疫苗，生产批号：201804，批准文号：兽药生字 【2016】 080072024。含鸭瘟病毒鸡胚毒株（CVCC AV1222）。每羽份病毒含量不低于103.0ELD50，规格为 500 羽/瓶。

1.3 试剂

鸭瘟（DVE）酶联免疫分析试剂盒 (深圳市绿诗源生物技术有限公司生产)，用于测定鸭血清、血浆及相关液体中鸭瘟（DVE）表达。

1.4 检测仪器

离心机、移液器、酶标仪、微量振荡器等。

1.5 检测方法

1.5.1 编号

将离心处理好的血清样品对应微孔按序编号，设阴性对照2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1 孔。

1.5.2 加样

分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl，然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。加样后按试剂操作要求温育、配液、洗涤、加酶、温育、洗涤、显色、终止，最后进行测定。

1.6 结果判定

试验有效性：阳性对照孔平均值≧1.00；阴性对对照平均值≦0.10 临界值（CLT OFF）计算；临界值=阴性对照孔平均值-0.15

阴性判定：样品（OD 值）＜临界值（CLT OFF）为鸭瘟（DVE）阴性阳性判定：样品（OD 值）≧临界值（CLT OFF）者为鸭瘟（DVE）阳性。

1.7 试验方法

在雏鸭养至25 日龄时进行试验，对照组不使用鸭瘟活疫苗；注射组每羽腿部肌肉注射注射一羽份鸭瘟活疫苗，按瓶签剂量将鸭瘟活疫苗用注射用水100ml 生理盐水稀释，每羽腿部肌肉注射0.2ml；饮水组雏鸭免疫前停水2h，饮水1 组饮水免疫2 头份鸭瘟活疫苗、饮水2 组饮水免疫4 头份鸭瘟活疫苗、饮水3 组饮水免疫8 头份鸭瘟活疫苗。

在免疫20d 后每羽翅静脉采血2ml 送上杭县动物疫病预防控制中心进行检测。

2 结果与分析

对照组11 个送检血样，阳性合格率为0%；注射组20 个送检血样，阳性合格率为80%；饮水1 组20 个送检血样，阳性合格率为60%；饮水2 组20 个送检血样，阳性合格率为70%；饮水3 组20 个送检血样，阳性合格率为80%。

3 讨论

鸭瘟活疫苗的饮水免疫目前可供查询的资料很少，仅查到贵州省畜牧兽医科学研究所的范存军和谭诗文在《中国畜禽传染病》（1990 年第1 期）发表的《鸭瘟弱毒疫苗对雏鸭的饮水免疫试验》[1]，他们的做法是在雏鸭的 1、5、10、15 日龄时进行饮水免疫，再在免疫在30d 和60d 进行攻毒试验，以验证饮水免疫的效果。本次试验采用不同剂量的鸭瘟活疫苗的饮水和注射免疫对比试验，采用免疫后20d 后翅静脉采血，直接检测抗体，具有更直观、更准确的特点。

一般而言，15 日龄前的雏鸭有可能存在母源抗体，本试验用鸭来自禽苗市场，来源复杂，因此在雏鸭25 日龄时开始试验，较好地规避了母源抗体的干扰。

由于饮水免疫的影响因素较多，在采取饮水免疫时一般剂量要大于注射免疫，从本次试验来看，采取8 头份剂量的饮水免疫抗体合格率最高，这和生产做法一致，表明用8 头份剂量的饮水免疫代替注射免疫鸭瘟是可行的。但由于试验的样本量较小，本次应用饮水免疫代替注射免疫鸭瘟的数据是否有代表性仍需进一步验证。

由于采用的试剂盒只有96 孔，因此，对照组仅有11 个样本，和其他组样本数不一致。

用饮水代替肌肉注射免疫鸭瘟疫苗省工省力，且能达到效果，在生产上有一定的应用价值。