不同形态饲料对美洲鳗鲡生长、部分血液生化和肠道健康指标的影响

■陈学豪 翟少伟* 杨 伟

（1.集美大学鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心，福建厦门361021；2.厦门嘉康饲料有限公司，福建厦门361021）

鳗鱼为高蛋白质高脂肪的优质食用鱼类，其味道鲜美、营养丰富，具有一定的药用功能，自古以来都是我国民间珍贵的滋补食物，被视为“水中人参”[1]。我国是世界第一养鳗大国，已形成集鳗苗捕捞与培育、成鳗养殖、饲料生产、烤鳗及鳗鱼副产品加工、出口贸易和配套服务为一体的完整产业链。随着水环境恶化和人工过度捕捞鳗鱼苗种，使得鳗鱼苗种资源逐年衰退，价格不断提高，鳗鱼养殖成本也不断上升[2-3]。因此，为了控制鳗鱼养殖成本，大多通过降低占鳗鱼养殖成本比重大的饲料成本。传统的鳗鱼粉状饲料具有投喂不方便、残饵多和成本高等缺点，还容易造成养殖水质恶化、浪费水源和增加用工等问题。浮性颗粒饲料具有节水、省工、节约成本和鳗鱼生长均匀度高等优点[4-7]，但其在实际生产中的应用较少。本课题组针对以往鳗鱼浮性颗粒料出现的问题，结合目前饲料添加剂和饲料加工工艺的最新成果，开发鳗鱼浮性颗粒料，研究其对美洲鳗鲡（Anguilla rostrata）生长性能、部分血液生化及肠道健康指标的影响，为鳗鱼浮性颗粒料的研发及推广提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物及试验设计

试验动物为美洲鳗鲡幼苗，随机将投放鳗苗的四口土池分为两个组，分别饲喂鳗鱼幼鳗粉料和幼鳗浮性颗粒料，每个组两口池。每口池放养的鳗苗数量因其面积的不同略有差异，粉料组两口池分别投放规格为33尾/kg和32尾/kg的幼鳗785 kg和915 kg；浮性颗粒料组两口池分别投放规格为34尾/kg和35尾/kg的幼鳗780 kg和652 kg，试验期为6个月。

1.2 试验饲料及投喂

鳗鱼粉状饲料由福州大昌盛饲料有限公司生产，鳗鱼浮性颗粒料由厦门嘉康饲料有限公司生产。

粉状饲料与浮性颗粒料的配方及主要营养成分见表1。

表1 粉状饲料与浮性颗粒料配方及主要营养成分(%)

本次试验所用鳗鱼先前摄食粉状饲料，浮性颗粒料组鳗鱼正式试验前鳗鱼停食1 d，再连续3 d将膨化饲料在5%～10%原鳗鱼粉料的稀释液中浸泡后投喂，先按正常饲料投喂量的三分之一投喂，之后逐步增加投喂量，一周左右即可正常摄食。浮性颗粒料在试验开始后，于投喂前将饲料用净水浸泡2～3 min软化后再进行投喂，有助于鳗鲡摄食。粉料组投喂前先将饲料称重，添加5.0%的鱼油后，按饲料与水比例为1∶1.2使用搅拌机搅拌成团状，再用刀将其切成小块投喂。试验期间根据鳗鱼生长状况、水质情况、杀虫、食欲及天气变化情况酌情增减投喂量，并进行记录。

1.3 饲养管理

试验土池水深1.2 m左右，每池中设有两台增氧机，24 h不间断供氧，采用半流水的养殖方式。鳗鱼入土池前，把池中的淤泥暴晒后用胶浆机抽出，保留约10 cm的淤泥，然后用200 mg/kg石灰水浸泡消毒。每周检测水质，使其维持在pH值6.6～7.6，亚硝酸盐低于0.005 mg/l，溶解氧大于4.0 mg/l，氨氮低于0.40 mg/l。适时泼洒底质改良剂和微生态制剂可以减少亚硝酸和氨氮含量；尽量调整水色接近淡绿色。鳗鱼养殖土池中，一般根据水质情况每周要排水换水一次，每次10 cm；根据鳗鱼的活力和状况，每周定期泼洒低刺激性的消毒药如杀菌红、二氧化氯和碘制剂等进行水体消毒；每周定期杀虫，以预防疾病发生。

1.4 样品采集与处理

试验期结束时，称取每口池的美洲鳗鲡总重；每口池随机挑取体重接近的10尾鱼，丁香酚麻醉后用干纱布拭干鳗鲡体表，经尾静脉取血。血液样本取样完毕后立即放置在4℃冰箱中，第二天在4℃离心机下以3 000 r/min速度离心10 min。将所得血清分装到1.5 ml离心管内并保存于-80℃冰箱中，用于血液生化指标分析。将抽血后的鳗鲡解剖并取出肝脏和肠道，称肝脏重，将肠道样品放入冻存管置于液氮中，带回实验室后置于-80℃冰箱中长期保存。按照翟少伟等[8]的方法对肠道样品进行处理，用于测定肠道抗氧化指标。另每口池随机取3尾体重接近的美洲鳗鲡置于-20℃冰箱中保存以测定全鱼体成分。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 生长性能

1.5.2 血液生化指标

血液中的碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，AKP）、酸性磷酸酶（Acid phosphatase，ACP）、谷丙转氨酶（Glutamic-pyruvic transaminase，GPT）和谷草转氨酶（Glutamic-oxalacetic transaminease，GOT）采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒，按照说明书的步骤进行测定。

1.5.3 肠道健康有关指标

肠道蛋白酶的测定采用福林-酚法进行测定；淀粉酶和脂肪酶的测定方法分别为碘-淀粉比色法和化学比浊法，采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒测定，测定过程参照说明书进行操作。

肠道超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、过氧化氢酶（Catalase，CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathion peroxidase，GSH-Px）、AKP活性和丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量等均使用南京建成生物工程研究所的试剂盒，按照相关说明书进行测定。

1.5.4 体成分

美洲鳗鲡全鱼水分采用(105±2)℃常压烘箱干燥恒重法测定；粗蛋白质的测定采用凯氏定氮法（总氮×6.25），用FOSS公司生产的Kjeltec8400型全自动凯氏定氮仪进行测定；粗脂肪的测定采用索氏抽提法测定；粗灰分采用马福炉(550±20)℃灼烧法测定。

1.6 数据统计分析

所有数据先用Excel进行整理，结果以“平均值±标准差（Mean±SD）”表示。其中增重率、肝体比和成活率等指标经反正弦转化后，再用SPSS 17.0统计软件的独立样本T检验模块进行统计分析，显著水平为P＜0.05。

2 结果

2.1 生长性能（见表2）

由表2可以看出，粉料组和浮性颗粒料组的试验期末体重、投料量、增重率、饲料系数、肝体比以及成活率等指标均无显著差异（P＞0.05）。粉料组的肝体比有高于浮性颗粒料组的趋势（0.05＜P＜0.10）。

表2 不同形态饲料对美洲鳗鲡生长性能的影响

2.2 血液生化指标（见表3）

表3 不同形态饲料对美洲鳗鲡部分血液生化指标的影响

由表3可以看出，与粉料组相比，浮性颗粒料组美洲鳗鲡的AKP水平和GPT水平显著升高（P＜0.05），GOT水平和GOT/GPT显著降低（P＜0.05），ACP水平差异不显著（P＞0.05）。

2.3 肝脏颜色（见图1）

图1 不同形态饲料对美洲鳗鲡肝脏颜色的影响

由图1可见，粉料组的鳗鱼肝脏颜色较浅，有些发白，体积较大，浮性颗粒料组的鳗鱼肝脏红色较深，体积也较小。

2.4 肠道健康有关指标（见表4）

由表4可以看出，与粉料组相比，浮性颗粒料组的脂肪酶活性显著降低（P＜0.05），淀粉酶和蛋白酶活性无显著差异（P＞0.05）；CAT和GSH-Px活性显著升高（P＜0.05），SOD活性显著降低（P＜0.05），MDA水平显著降低（P＜0.05）；肠道AKP水平无显著变化（P＞0.05）。

2.5 体成分（见表5）

由表5可以看出，粉料组和浮性颗粒料组的全鱼水分、粗蛋白质、粗脂肪和灰分含量接近，无显著差异（P＞0.05）。

3 讨论

3.1 不同形态饲料对美洲鳗鲡生长性能的影响

本试验中，粉料组和浮性颗粒料组的生长性能接近，这可能是两种不同形态饲料的主要营养成分接近所致。说明美洲鳗鲡经过驯化后完全可以正常采食浮性颗粒料，且不会对生长性能造成负面影响。由于在驯化采食浮性颗粒料需要一定时间，这在某种程度上影响了鳗鲡生长，使其在试验初始的体重略低于粉料组，但试验期末的体重仍与粉料组接近。目前，还鲜见粉状饲料和浮性颗粒料在鳗鲡养殖中的对比效果研究。在鳗鲡养殖过程中使用浮性颗粒料，在水体中的散失率低，对水体污染小，特别在缺水或循环水的养鳗场效果更明显；不需要搅拌就直接投喂，节约搅拌的机器费用及电费，减少用工人数；无需价高且营养作用差的α-淀粉作为黏合剂，饲料成本较低，浮性颗粒料为膨化工艺制作，易消化吸收，饲料效率高；浮性颗粒料投喂时的散开面积大，鳗鱼无需挤压易摄食，减少应激反应，强弱鳗鱼摄食均匀[4-7]，这一点在表1中各生长指标的变异程度中也可以看出。本试验结果与林仕梅等[9]报道湘云鲫对膨化饲料的利用并没有显示出优势性结论类似。但贾艳菊等[10]发现，在中华鳖稚鳖中使用膨化饲料的适口性和诱食性较差，中华鳖的摄食量和生长率较低，而在蛋白质效率和饲料转化效率方面优于粉状饲料。魏旭光[11]研究也表明，与非膨化饲料相比，大菱鲆饲喂膨化饲料后生长性能下降；抗氧化能力下降；膨化组的消化酶活性都升高，非膨化饲料对大菱鲆的生长代谢更具有促进作用。这可能是试验动物的品种、饲料组成、养殖条件等方面的差异导致的。

表4 不同形态饲料对美洲鳗鲡部分肠道健康指标的影响

表5 不同形态饲料对美洲鳗鲡体成分的影响(%)

3.2 不同形态饲料对美洲鳗鲡血液生化指标及肝脏颜色的影响

AKP和ACP是机体生长代谢、保持内环境稳定和维持机体健康所必需的酶，反映体内非特异性免疫能力的变化[12-13]。本试验中浮性颗粒料组AKP水平显著升高，表明使用该形态的饲料可增强美洲鳗鲡的部分非特异性免疫能力。当鱼类动物肝细胞受损后，转氨酶会释放到血液里，血清中转氨酶活性会随之升高。GPT和GOT两种转氨酶活性升高意味着肝脏损伤，GOT水平升高的危害更大，也常用GOT/GPT比例升高表示肝脏受损伤的程度加剧[14-15]。本试验中虽然浮性颗粒料组的美洲鳗鲡血液中GPT水平升高，但GOT水平和GOT/GPT比值降低，说明该组美洲鳗鲡的肝脏功能得到了改善。这可能是由于浮性颗粒料中添加了保肝利胆的中草药添加剂所致。这与添加中草药在鲫[16-17]、鲤[18]、史氏鲟[19-20]饲料中改善肝脏功能的结果类似。也与中草药添加剂提高草鱼[21-22]、罗非鱼[23]、鲤[24]、黄鳝[25]等的非特异性免疫能力的结果接近。此外，肝脏颜色和肝体比的变化，说明了肝脏中脂肪沉积较少，且炎症程度较低，进一步说明了浮性颗粒料组的肝脏功能得到改善。由于中草药的活性成分复杂，具体的作用机制还有待于进一步研究。

3.3 不同形态饲料对美洲鳗鲡肠道健康指标的影响

研究表明，鱼类肠道的消化酶活性能够反映机体肠道的消化生理状态[26]；鱼类消化酶的活性与其饵料中营养成分的种类和含量有密切的关系[27]。粉料组和浮性颗粒料组的肠道消化酶活性仅脂肪酶活性降低，其他消化酶活性无显著差异。这可能是两组饲料脂肪水平的差异所致，具体原因还有待查明。

SOD、CAT和GSH-Px是机体内清除自由基的主要抗氧化酶，维持机体自由基的动态平衡状态。MDA是自由基与脂质发生过氧化反应的主要产物，其含量多少可以间接反映机体的脂质过氧化程度和自由基产生情况[28]。正常生理情况下，动物体内自由基处于一种产生和清除的动态平衡状态。本试验中浮性颗粒料组MDA水平及其他抗氧化酶的变化表明，机体抗氧化能力增强。这可能也是由于浮性颗粒饲料中添加了保肝利胆的中草药添加剂所致。黄江等[29]在施氏鲟和石宏武等[30]在金鱼的饲料中添加中草药后，也有类似的报道。中草药添加剂添加改善肠道抗氧化能力是其直接清除自由基，提高抗氧化酶活性，还是改善肠道菌群而减少自由基产生起主要作用[31]，仍需要进一步研究。

3.4 不同形态饲料对美洲鳗鲡全鱼体成分的影响

本试验中，粉料组和浮性颗粒料组全鱼的水分、粗蛋白质、粗脂肪和灰分含量接近，说明不同形态的饲料对美洲鳗鲡的体成分无显著影响。这可能是两种饲料的主要营养指标接近所致。这与贾艳菊等[10]在中华鳖稚鳖中使用膨化饲料对体成分无显著影响的结果一致。

4 结论

本试验条件下，与传统粉料相比，使用浮性颗粒料未影响美洲鳗鲡幼鱼的生长性能和体成分，但能改善肝脏和肠道的健康状态。