2017年山东菏泽规模化羊场布鲁菌病基线调查

宇 凌,范明杰,王慧军,董翠梅,李金峰,党安坤,兰邹然

（1.山东省菏泽市动物疫病预防控制中心,山东 菏泽 274000;2.山东省曹县动物防疫监督所,山东 曹县 274400;3.山东省动物疫病预防与控制中心,山东 济南 250022）

布鲁菌病（以下简称为布病）是由布鲁菌引起的,主要侵害人和动物淋巴系统和生殖系统的人兽共患传染性变态反应性疾病,100多年来,该病在全球范围内广泛流行,严重影响了畜牧业的健康发展,并带来严重的公共卫生问题,同时间接影响了畜产品出口及旅游事业的发展。近年来,布鲁杆菌病已成为我国部分畜牧业发达地区威胁人类健康的头号人兽共患病,我国新疆每年因布病流产、空怀等少生幼畜达100～140万头,新疆、青海两地,每年因本病造成的直接经济损失约1亿元[1]。2016年山东省人间布病确诊病例4 092人,达到1973年以来的最高峰（数据来源:2017山东省畜牧兽医局布病基线调查统计数据）,各地市均有人间布病病例,人间布病2016年较上年增长3.99%,其中菏泽市增长1.39倍（数据来源:2017山东省畜牧兽医局布病基线调查统计数据）。菏泽位于鲁、苏、豫、皖四省交界处的鲁西南,是农业大市,也是畜牧业大市,特别是牛羊养殖深受广大中小家户喜爱,截止至2016年底,菏泽市有饲养量在100只以上的养羊场户3 260个,羊存栏量5 785 004只,能繁母羊2 614 257只（数据来源:2016年菏泽市畜牧生产统计年报）。前些年菏泽一直坚持以青山羊与小尾寒羊自繁自养为主的饲养方式,但随着当地群众生活水平的提高及单县羊肉汤在全国知名度的提高,菏泽市本地消费及用于加工生产羊肉汤外销的羊肉需求量增大,当地自繁自养的青山羊、小尾寒羊远远不够需求,每年都从外省调入其他品种山羊、绵羊进行短期育肥,增加了布病的传入风险。为切实做好鲁西南地区牛羊布鲁菌病防控工作,也为了全面掌握菏泽市畜间羊布病流行情况,菏泽市动物疫病预防控制中心根据国家和省里有关文件要求,于2017年8月通过横断面研究对我市规模化羊场（存栏量大于等于100只的羊场）开展了布病流行病学基线调查工作。

1 材料与方法

1.1 病例定义 布病阳性羊只:血清样品通过布病虎红平板凝集试验和试管凝集试验检测均为阳性的羊只。

布病阳性场群:场群内至少有1只羊检测为布病阳性的养羊场户。

布病阳性县区:至少检测出1例布病阳性养羊场户的县区。

1.2 研究群和抽样单元

研究群:菏泽市所有存栏100只以上的羊场（户）,总共有3 260个场户。

抽样单元:对于群体,抽样单元为每个羊场（户）;对于个体,抽样单元为每个羊场（户）内所有6月龄以上羊只。

1.3 抽样方案设计 参照Yamen等[2]的方法进行调整。

第1步,初步估算全市要抽取的羊只数。用估计流行率的方法[3]抽取。3 260个100只以上的规模羊场,按95%置信水平,预期流行率5%（根据往年监测结果,本地区羊群布病感染不严重）,1%的可接受误差,初步计算出全市要抽取的羊只数为1 825只。计算公式为:

第2步,计算设计影响:预先确定每个场抽取30只羊,羊布病的ICC根据文献[3],由于菏泽地区养羊情况与该文献研究地区情况类似,ICC按0.1来计算,通过以下公式计算设计影响。

设计影响（design effect）=1+（m-1）×ICC,式中,m为每场预先确定要抽取的羊只数,本研究m为30,可以计算出设计影响为4。

第3步,确定最终抽样的羊只数为1 825×4=7 300（只）,抽样场数为 7 300/30=243（个）。

第4步,配额将总抽样场户数分配到9个县区,每个县区分配数见表1。

1.4 场户的随机选择和场户内羊的随机选择 场户的随机选择和场户内羊的随机选择均用系统随机抽样方法进行[4]。

1.5 检测方法 对采集的血清,进行虎红平板凝集试验和试管凝集试验垂直试验,检测布病抗体。先用虎红平板凝集试验初筛,对检出的阳性样品再用试管凝集实验确诊。本次调查参照文献[5],设定虎红平板凝集试验的敏感性、特异性分别为95%、80%,试管凝集试验的敏感性、特异性分别为85%、90%,垂直联合试验的敏感性、特异性分别为81%和98%。

1.6 数据收集和分析 分别收集抽样羊场的血清学检测结果,用于后续统计分析。

个体和群体真实流行率的计算:通过抽样检测,可以得到羊布病的个体表观流行率和群体的表观流行率,利用公式 TP= （AP+Sp-1）/（Se+Sp-1）就可以计算个体和群体的真实流行率。流行率的95%置信区间（CI）可用以下公式计算:

式中其中p为流行率,Z标准正态分布中概率0.05对应的统计数,n为抽样数量。

2 结果

2.1 个体流行率 根据抽样方案,将全市的县区做代号标记,标记为A-I,本次调查全市应抽取243个场的羊血清7 290份,实际检测了7 282份血清,其中有8份血样由于质量问题没有得到检测结果。7 282份血清中,总共检出阳性33份,个体表观流行率为0.45%（95%CI∶0.3% ～0.6%）,个体真实流行率为0.54%（95%CI∶0.4% ～0.7%）（需要交代一下方法的敏感性和特异性）。个体流行率最高的县区为C县区,个体表观流行率为1.07%（95%CI∶0.5% ～2.0%）,个体真实流行率为1.33%（95%CI∶0.6% ～2.5%）,B、E、F和H县区未检到阳性（见表1）。

表1 各县区布病的个体表观流行率和真实流行率

本次调查总共在5个县区检出8个布病阳性规模化羊场,其中A、C和G区分别检出2个阳性场,D和I区分别检测出1个阳性场,个体阳性率最高的场在C区,阳性率最高的规模化羊场布病个体表观流性率达26.67%（95%CI∶12.3% ～45.9%）,个体真实流行率达 31.23%（95%CI∶13.0% ～55.6%）,出现阳性的规模化羊场中,阳性率最低的规模化羊场布病个体表观流行率达3.33%（95%CI∶0.1% ～17.2%）,个体真实流行率达1.68%（95%CI∶0.0% ～19.2%）（见表2）。

表2 阳性场内表观流行率和真实流行率

2.2 群体流行率 根据抽样方案,需要在本市共检测243个规模化羊场,共检测出8个阳性场,这8个阳性场分布上于 A、C、D、G 和I县区,A、C、G 县区各检出两个阳性场,D和I县区各检出1个阳性场,而B、E、F和H县区未检出阳性场（见图1）。检出阳性场的县区中,I县区布病群体表观流行率为最低,为4.55%（1/22）（95%CI∶0.1% ～22.8%）,计算得到的群体真实流行率为 5.73%（95%CI∶0.1% ～28.8%）;G县区群体表观流行最高7.69%（2/26）（95%CI∶0.9% ～25.1%）,计算得到的群体真实流行率为9.71%（95%CI∶1.1% ～31.7%）;本次调查全市羊布病群体表观流行率为3.29%（8/243）（95%CI∶1.4% ～6.4%）,计算得到的群体真实流行率为1.64%（95%CI∶0.0% ～5.6%）。

图1 2017年菏泽市各县区羊场布病监测结果

2.3 调入和未调入羊只的羊群布病检测结果 根据调查结果发现,调入羊只的养羊场户数总共有92个,检出布病阳性的8个场均为调入羊只的场户（见表3）,调入羊只的养羊场户检测为布病阳性的概率显著高于未调入羊只的养羊场户（卡方检验,P ＜0.01）。

表3 调入和未调入羊只的羊群布病检测结果

3 讨论

从表1中可以看出,本次调查规模化羊场布病个体表观流行率为0.45%,从个体水平来看,全市羊布病流行率处于相对较低水平,且通过统计采样单信息发现,我市自繁自养的青山羊和小尾寒羊布病阳性率是零,而布病阳性场均与从外省调入羊只有关,这与今年山东省其他县区的情况类似[5-6];从表2可以看出,出现阳性的规模化羊场,场内个体表观流行率最低的达到3.33%（95%CI∶0.1% ～17.2%）,最高的已高达26.67%（95%CI∶12.3% ～45.9%）,说明羊场一旦引入布病,容易在场内扩散传播,造成场群流行率逐渐上升;从表3可以看出有的县区规模化羊场布病群体表观流行率已达7.69%,加强羊布病防控已成为当前的紧急任务,应引起高度关注,及时采取针对性防控措施来降低羊群的布病流行率。

通过调查分析,我市规模化羊场出现布病阳性的原因:其一、单县羊肉汤闻名全国,需求量大,现有羊产量远远不能满足市场需求,需要从周边省区调进大量羊进行短期育肥,此次调查发现阳性场户均存在市场调入羊只的情况,羊及羊产品的流通加速,加大了动物的饲养、交易、屠宰、检疫等环节监管的难度,为布病的传播创造了客观条件,增加了羊布病的传播风险[7]。其二、调入来自外省的羊只,没有羊调出地开具的检疫证明和布病检测报告,养羊场户引种或买入羊只后基本没有落地报告,也不进行检疫和隔离,直接混群饲养,布病传入的风险很高。

调查结果显示,本市规模养羊场场群表观流行率和个体表观流行率分别为3.29%（8/243）（95%CI∶1.4% ～ 6.4%）和 0.46% （33/7282）（95%CI∶0.3%～0.6%）,群体流行率显著高于个体流行率（卡方检验,P＜0.01）。布病阳性场群均存在从外省调入羊只的情况。

4 布病防控建议

4.1 建议各地检疫部门严格动物调运检疫工作。各地动物检疫部门在调出牛羊时都应对调出动物进行布病检测,防止布病阳性动物调运,动物调入后应及时开展隔离检测,混群前应开展布病检测,以防布病阳性动物混入群体。

4.2 建立并加强畜牧兽医、商业、食药、卫生等部门的协同作战机制,严把动物及其产品的流通关,规范活羊交易、屠宰、羊肉市场及食品加工企业、餐饮企业的管理。特别对于因布病感染而流产的死胎,个别养殖户为了图谋小利益,会偷偷卖掉,流入市场后造成人的感染,应严厉查处。鼓励养殖户为布病易感活畜参保,一旦出现布病疫情或检出布病阳性时能把经济损失降到最低,并有利于病畜和阳性畜的扑杀无害化处理。

4.3 加强布病知识及其危害的宣传工作。兽医部门联合卫计委对养殖户、屠宰、加工羊肉的人员有针对性地开展健康教育,使这些从业人员自我防护意识得以提高,一旦出现布病类似症状,应及时诊断,早期治疗,以保证良好预后。

4.4 加强县级兽医实验室建设和兽医检验人员业务培训,提高基层检测人员的布病检测能力和诊疗水平。县级兽医部门每年都要做好本辖区内布病的流行病学调查,为布病的科学防控提供有效技术支持。