血清学指标对胃癌及萎缩性胃炎患者临床诊断价值研究

侯陈凤 贾杰　余炳取　郑娟红　赵茂森

[摘要] 目的 研究血清學指标对胃癌及萎缩性胃炎患者临床诊断价值。 方法 选取2013年2月～2016年2月间在本院胃镜室进行检测患者282例，根据最终诊断把患者分成5组：胃癌组（50例）、浅表性胃炎组（99例）、胃溃疡组（38例）、胃息肉组（38例）和萎缩性胃炎组（57例），选取同期在本院体检健康者100例作为对照组，采用乳胶增强免疫比浊法对PGⅠ和PGⅡ进行定量检测，ELISA法检测血清TK1水平，电化学发光法检测血清CA72-4水平。结果 胃癌组血清TK1及CA72-4含量明显高于其他各组，差异有统计学意义（P<0.05）；胃溃疡组血清PGⅠ含量比对照组高，胃癌组和萎缩胃炎组则低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；胃癌组与萎缩胃炎组在PCR含量上对比差异无统计学意义（P>0.05），但胃癌组比其他各组要高，差异有统计学意义（P<0.05）；血清TK1、PGⅠ及CA72-4含量异常为胃癌发生危险因素，PGⅠ呈现负相关，TK1及CA72-4呈现正相关；不同检测方式中TK1+CA72-4方式准确度、特异度最高，四项联合检测敏感度最高。 结论 血清TK1、PGⅠ及CA72-4含量异常为胃癌发生危险因素，PGⅠ呈现负相关，TK1及CA72-4呈现正相关，PGR及PGⅠ检测对胃癌和萎缩性胃炎有重要诊断价值。

[关键词] 胃癌；萎缩性胃炎；血清学指标；诊断价值

[中图分类号] R573.3 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2018）26-0042-04

Study on the clinical diagnostic value of serological indices in the patients with gastric cancer and atrophic gastritis

HOU Chenfeng JIA Jie YU Bingqu ZHENG Juanhong ZHAO Maosen

Department of Gastroenterology， Wenzhou Hospital of Integrated Chinese and Western Medicine in Zhejiang Province， Wenzhou 325000， China

[Abstract] Objective To study the clinical diagnostic value of serological markers in the patients with gastric cancer and atrophic gastritis. Methods A total of 282 patients who were examined in the gastroscopy room in our hospital from February 2013 to February 2016 were selected. According to the final diagnosis， the patients were divided into 5 groups： gastric cancer group （50 cases）， superficial gastritis group （99 cases）， gastric ulcer group （38 cases）， gastric polyps group （38 cases） and atrophic gastritis group （57 cases）. In the same period， 100 healthy subjects in our hospital were selected as the control group. The latex-enhanced immunoturbidimetry was used to quantitatively detect PG I and PG II. Serum TK1 levels were detected by ELISA. The level of serum CA72-4 was detected by electrochemiluminescence. Results The levels of serum TK1 and CA72-4 in gastric cancer group were significantly higher than those in other groups， and the difference was statistically significant（P<0.05）； serum PG I levels in the gastric ulcer group were higher than those in the control group， and the gastric cancer group and atrophic gastritis group were lower than the control group. The differences were statistically significant（P<0.05）； there was no statistically significant difference in the content of PCR between gastric cancer group and atrophic gastritis group（P>0.05）. However， the gastric cancer group was higher than other groups， and the differences were statistically significant（P<0.05）； abnormal serum levels of TK1， PG I， and CA72-4 were risk factors for gastric cancer. PG I was negatively correlated， and TK1 and CA72-4 were positively correlated； the accuracy and specificity of the TK1+CA72-4 method were the highest in different detection methods. The sensitivity of the four joint detections was the highest. Conclusion Abnormal serum levels of TK1， PG I and CA72-4 are risk factors for gastric cancer. PG I is negatively correlated， and TK1 and CA72-4 are positively correlated. PGR and PG I detection have an important diagnostic value for gastric cancer and atrophic gastritis.

[Key words] Gastric cancer； Atrophic gastritis； Serological indicators； Diagnostic value

胃癌是临床较为常见肿瘤之一，患者前期症状不易被发觉，当确诊时多数已经处于中期或晚期，治疗以后患者预后情况比较差[1]。虽然目前临床放、化疗及手术治疗的水平有了很大提升，但还达不到根治肿瘤的目的，患者手术以后可能出现转移与复发。当前诊断胃癌一般依靠病理学、胃镜和影像学检测，但以上检测手段都有一定局限，不适合在人群中广泛使用，而肿瘤标志物的发现给人们提供了新的思路。相关血清指标检测没有侵入性，操作较简单，可在前期诊断、健康人普查及高危人群筛查中广泛使用[2-3]。因此，本文通过探究血清细胞质胸苷激酶（Thymidine kinase1，TK1）、糖类抗原72-4（Carbohydrate antigens72-4，CA72-4）及胃蛋白酶原（Pepsinogen，PG）在不同病理类型的胃病者和健康者内水平情况，评价其联合检测对胃癌和萎缩性胃炎患者临床的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2013年2月～2016年2月间在本院胃镜室进行检测患者282例，其中男145例，女137例，平均年龄（58.2±11.7）岁；依据《中国慢性胃炎共识意见》[4]对患者进行诊断，必要时对患者进行病理检测；根据最终诊断把患者分成5组：胃癌组（50例）中，男27例，女23例，平均年龄（61.7±10.4）岁；浅表性胃炎组（99例）中，男42例，女57例，平均年龄（56.9±11.7）岁；胃溃疡组（38例）中，男21例，女17例，平均年龄（58.4±12.9）岁；胃息肉组（38例）中，男23例，女15例，平均年龄（59.1±15.4）岁；萎缩性胃炎组（57例）中，男32例，女25例，平均年龄（58.5±10.1）岁；选取同期在本院体检健康者100例作为对照组，其中男48例，女52例，平均年龄（57.1±14.2）岁；以上六组对象在年龄和性别方面对比差异无统计学意义（P>0.05）；本研究经医院伦理委员会批准，患者及家属知情并同意。

1.2 主要仪器和试剂

试剂：胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）试剂盒（北京九强生物公司生产）、TK1试剂盒（武汉华美生物公司生产）、胃蛋白酶原Ⅱ（PGⅡ）试剂盒（由北京九强生物公司生产）、CA72-4试剂盒（德国罗氏公司生产）；

仪器：贝克曼AU5800型全自动生化分析仪（美国贝克曼库尔特公司生产）、半自动酶标仪（美国赛默飞世尔公司生产）、常温离心机（上海天呈公司生产）、恒温箱（北京科伟永兴公司生产）、罗氏e601型电化学发光仪（德国罗氏公司生产）、4℃及-20℃冰箱（青岛海尔公司生产）、微型振荡器（北京百万电子科技中心生产）、洗板机（美国赛默飞世尔公司生产）、低温高速离心机（德国Heraeus公司生产）。

1.3 研究方法

收集六组对象早晨空腹静脉血5 mL，离心机3000 rmp，离心8 min，取上清液存入EP管内，放置在-20℃冰箱待测。采用乳胶增强免疫比浊法对PGⅠ和PGⅡ进行定量检测，基于乳胶凝集抑制原理进行，标本中没有PGⅠ和PGⅡ时，PGⅠ或PGⅡ多聚物和特异鼠抗人PGⅠ或PGⅡ单克隆抗体包被胶乳发生凝聚反应，吸光度上升，标本内存在PGⅠ或PGⅡ时，和PGⅠ或PGⅡ多聚物竞争性与乳胶试剂内抗体结合，凝集率下降，所以吸光度改变和样品内PGⅠ、PGⅡ浓度为反比，在700 nm处理检测吸光度改变，利用标准曲线计算结果。ELISA法检测血清TK1水平，标准品稀释后加入至酶标板标准品孔内，样品也加入到样品孔内，每个孔内10 mL，胶纸将反应孔封住，37℃下孵育2 h，洗板5次，再加入10 mL生物素化抗体工作液，37℃下孵育1 h，洗板5次，加入10 mL酶结合物工作液，37℃下避光孵育30 min，洗板5次，每孔加入10 mL显色液，37℃下避光孵育20 min，最后加入终止液，混匀后检测OD450数值，标准品浓度当做横坐标，OD数值当做纵坐标，绘制标准曲线，依据样品OD数值于标准曲线内查看其浓度；电化学发光法检测血清CA72-4水平，准确移取血清CA72-4置入量瓶内，加入0.5 mL 0.3%H2O2，PBS缓冲液定容，并配置空白溶液。选取配置溶液6 mL在专用电解池内，把电解池放置在超微弱化学发光测量仪暗室内，使用MEC-12B型多功能电化学分析仪（江苏电分析仪器厂生产），扫描速度为20 mV/s，在0.3～0.8 V电位范围内进行阳极化扫描，BPLC超微弱化学发光测量仪（中国科学院生物物理研究所）记录电化学发光信号。

1.4 观察指标和评价标准

采用并联法，判定标准是各指标临界数值，单项指标判定≤或≥临界数值判别是阳性，>或<判别是阴性；联合检测时，全部是阴性判别是阴性，至少一项是阳性时判别是阳性。

1.5 统计学分析

使用SPSS20.0统计软件进行数据分析，计量资料用（x±s）表示，方差不齐后者非正态分布，组间对比Kruskal-Wallis检验，两两对比Nemenyi检验；方差齐且正态分布，组间对比行F检验，两两对比LSD-t检验；经过Logistic分析与ROC曲线评估各血清指标诊断价值，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 六组对象血清相关指标含量情况比较

胃癌组血清TK1及CA72-4含量明显高于其他各组，差异有统计學意义（P<0.05）；胃溃疡组血清PGⅠ含量比对照组高，胃癌组和萎缩胃炎组则低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；胃癌组与萎缩胃炎组在PGR含量上对比差异无统计学意义（P>0.05），但胃癌组比其他各组要高，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 ROC曲线下面积及血清指标最佳的诊断临界值、约登指数情况比较

血清CA72-4对胃癌诊断价值比较低（0.7>AUC>0.05），PGR、TK1及PGⅠ的诊断介质中等（0.9>AUC>0.7），四项联合诊断价值比较高（AUC>0.9）。见表2。

由ROC曲线可得到PGR、CA72-4、PGⅠ与TK1最佳的诊断临界值依次是5、7.9 U/mL、68.3 ng/mL与95.1 pg/mL，约登指数依次是0.361、0.332、0.379与0.516。

2.3 胃癌发生风险和血清指标分析

为了将性别与年龄有可能造成影响排除，性别与年龄列入分析内，获得调节以后风险比（ORa）；血清TK1、PGⅠ及CA72-4含量异常为胃癌发生危险因素，PGⅠ呈负相关，TK1及CA72-4呈正相关。见表3。

2.4 血清指标不同组合方式的准确度、特异度及敏感度情况

根据四格表得出不同指标间检测的准确、特异度及敏感度，其中TK1+CA72-4方式准确度、特异度最高，四项联合检测敏感度最高。见表4。

3 讨论

伴随着细胞工程学、免疫学、分子生物学及遗传学的快速发展，人们逐渐发现了很多小分子物质，而肿瘤发生进展和其中某些物质有联系，人们称之为肿瘤标志物[5-6]。肿瘤病情发生及进展时，肿瘤标志物水平在患者体内会异常升高，说明机体内可能存在肿瘤，经过实验室相关检测可对疾病诊断有一定作用。肿瘤标志物出现为肿瘤患者的早期诊治带来了曙光，检测时患者痛苦小且操作简便，可当做临床诊断与筛查手段[7-9]。

CA72-4为特异性肿瘤标志物，是美国Colcher等通过实验得到肿瘤相关糖蛋白。多种肿瘤内都有CA72-4，其异常变高一般存在于消化道肿瘤与卵巢癌。国内Chen等[10]对CA153、CA724、CA125、CA242、CEA及CA199和胃癌相关性做对比，结果显示CA72-4的诊断价值最高。本文研究显示，胃癌组患者血清CA72-4含量要明显高于其他各组，Logistic分析显示CA72-2是胃癌发生危险因素。但只检测CA72-4时的敏感度比较低，一般需要和其他相关指标一起来提升敏感度。TK1为国际公认细胞异常增殖标记物，健康人组织与血清内检测不到TK1或者含量非常低，但在肿瘤患者体内，随着肿瘤细胞数量增殖TK1酶也随之变高，肿瘤细胞的成长情况和TK1水平高低有紧密联系[11-14]。对TK1含量检测，能够动态了解到癌细胞增殖信息，对前期预测肿瘤发生有积极意义。但相关研究显示TK1[15]在乳腺癌、肠癌、食管癌及肺癌等患者体内都有不同程度的升高现象，不是特异性指标，所以在胃癌检测时候需要和其他相关指标结合检测。PGⅠ为胃泌酸腺的细胞能力检测指针，胃底腺发生萎缩时其主细胞的数量将降低，胃酸的分泌量也降低，PGⅠ含量随之减少；当机体内胃酸分泌量升高时，PGⅠ含量则随之上升[14-20]。

综上所述，血清TK1、PGⅠ及CA72-4含量异常为胃癌发生危险因素，PGⅠ呈现负相关，TK1及CA72-4呈现正相关，PGR及PGⅠ检测对胃癌和萎缩性胃炎有重要诊断价值。

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（收稿日期：2018-03-30）