某区妇女宫颈感染人乳头瘤病毒的基因分析

任淑珍 刘启元 陈华杰

（1 福建平潭综合实验区医院 检验科，福建 福州 350400；2 福建平潭综合实验区医院 病理科，福建 福州 350400）

人乳头瘤病毒是一种嗜黏膜和皮肤上皮性病毒，是导致宫颈上皮增生和宫颈癌的主要因素。至今为止，已经鉴定的HPV病毒约有100多种，约有30多种可以感染人的生殖道黏膜[1]。宫颈癌的发生与人乳头瘤病毒感染人体有密切的关系[2]。世界卫生组织的调查结果显示99.9%的宫颈癌患者可以检测到HPV感染；国际癌症研究协会（IARC）1995年宣布；HPV感染是宫颈癌的主要原因。在目前发现的约30多种可感染人生殖道黏膜的HPV中，一部分很容易导致宫颈癌的发生，称为高危型HPV；WHO及IRAC确认的14种高危型包括HPV16、18、31、35、39、45、51、52、56、58、59、66及68[3]。从HPV感染到发展成为宫颈癌发展成为宫颈癌一般需要经历数年到10年左右时间，提早检测高危型HPV进而积极治疗将有助于清除女性生殖道的持续感染，防止其向宫颈癌演变。早发现、早治疗，从而降低宫颈癌的发生率和病死率。本文分析平潭综合实验区妇女宫颈感染人乳头瘤病毒状况，发现总感染率为8.6%，低于中国妇女以人群基础的HPV感染状况的流行病学调查结果显示HPV的总感染为16.1%[4]。HPV16型导致了全世界一半以上的宫颈癌[5]。而本地区的16型感染率为1.52%，且感染人群在30～39岁和40～49岁妇女，分别占总感染率的43.36%、34.97%。

1 资料与方法

1.1 一般资料：统计我院2015年7月开始开展HPV检测以来至2017年2月检测HPV总例数1646例。最小年龄20岁，最大年龄71岁，平均年龄46岁。

1.2 仪器与试剂：CobasZ480荧光PCR仪。上海透景生命科技股份有限公司提供的人乳头瘤病毒核酸检测与16/18型试剂盒，采用2+12型，即可具体分型16、18型和其他混合型12种（31、33、35、39、41、51、52、56、58、59、66、68）。北京华运安特科技有限责任公司提供的ZJY-全自动杂交仪、杂交液。严格按照试剂说明要求操作以及按《基因扩增实验室管理办法》执行操作。

1.3 方法：以统一标准取女性非经期宫颈脱落细胞，在采样前不对阴道进行冲洗，采用杭州医国仁生物科技有限公司提供的专用宫颈刷采集标本，将宫颈刷置入宫颈，约2 cm位置，于宫颈外口鳞状上皮、柱状上皮交界处，沿宫颈外口旋转3～4圈，然后取出，置入上海透景生命科技股份有限公司提供的配套细胞保存液中，严格按照保存液要求将标本保存于4 ℃冰箱中。检测时，取出宫颈刷，充分漂洗，使用洗脱液做离心处理，保留管底细胞，加入裂解液，以说明书指示为依据，提取DNA，以CobasZ480荧光PCR仪扩增检测。每周集中检测1次标本。

1.4 结果分析与判定：取出杂交仪、杂交液，并做预热处理，以标记探针处理低密度基因芯片，并将其放置于杂交平台上；对扩增产物加热、冰浴，然后置于检测孔，实施导流杂交；以封阻液行封闭处理，倒出封阻液，置入酶标液，行孵育处理，处理时间为3 min。以冲洗缓冲液对冲洗膜进行冲洗，以NBT/BCIP底物做显色处理，时间为5 min。根据显色情况分析结果。以肉眼观察情况做出判定，呈现蓝紫色圆点则判定为阳性，视为感染，若有多个阳性点，则判定为混合感染。

1.5 统计学方法：运用SPSS16.0统计学软件对各年龄组妇女感染HPV感染率进行数据统计分析，P≤0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 感染情况分析：统计2015年7月13日HPV开展以来至2017年2月27日我院门诊及住院女性宫颈脱落细胞HPV检测，共检测1646例。HPV总感染例数143例，总感染率为8.69%。低于全国感染水平，混合型感染例数103例，感染率为6.26%。16型感染例数25例，感染率为1.52%，18型感染率为15例，感染率为0.91%。其中16型、18型、混合型同时阳性2例，18型、混合型同时阳性1例，即多重混合感染共5例。

2.2 年龄分布情况：见表1。

表1 不同年龄组HPV感染分布情况

2.3 各年龄组占总感染率比较：运用SPSS16.0统计学软件对各年龄段进行分组比较，显示30～39岁、40～49岁感染率高，分别占37.77%、40.56%，P＞0.05无统计意义。20～29岁、30～39岁占总感染率的11.19%、37.77%，P＜0.05有统计意义。得出结论，平潭综合实验区HPV感染主要在30～39岁、40～49岁年龄段性活跃期，和性接触传染直接相关。

3 讨 论

HPV持续感染是引起宫颈癌的必要不充分条件，其中HPV16和HPV18型感染是导致宫颈癌最主要的因素[5]。引发HPV的原因极为复杂，每个地区HPV感染率、各不相同，基因型分布也存在一定差异。我国大规模多中心的流行病学研究显示，宫颈鳞癌中最常见的HPV型分别为HPV16和18型，分别占76.7%和7.8%，随后依次HPV52（占2.2%），HPV58（占2.2%）和HPV（占2.1%），将HPV风险分层管理有助于提高宫颈癌的筛选效率。由于HPV16和HPV18的高致癌风险，对HPV16、18型阳性人群的筛选和临床转诊十分必要。而致癌风险次之的其他几种高危型别，对其检测结果为阳性的患者通常的处理办法为定期复查，笔者认为没有必要对12种型别进行分型检测，因而对本地区采用透景2+12高危HPV检测，经济，实用。

目前，针对HPV感染者，多予以宫颈癌预防疫苗控制，以降低其转化为宫颈癌的风险。因此尽早诊断、预防，并指导临床采取针对性预防措施十分必要。荧光PCR检测特异性较好。在研究中笔者对我院门诊、住院女性应用荧光PCR检测予以HPV检测，分析平潭综合实验区妇女的HPV感染情况，考虑到HPV16、18型是最有致癌风险的基因型，本次研究以HPV16、18型研究为主，在此基础上将感染严重的混合型纳入研究，分析感染率以及年龄分布情况，以期为临床防治提供科学指导。至于HPV感染以及分型和宫颈病变和宫颈癌的关系，还有待后续研究。

经本次数据分析显示，本地区HPV总感染率为8.69%，而我国感染率为16.1%，提示平潭综合实验区妇女HPV感染率低于平均水平，发生风险低。另外研究发现该地区30～49岁年龄段的感染率最高，明显高于其他年龄段，提示这一年龄段女性为该地区HPV感染的高危人群。关于HPV感染人群，国内外研究指出各地区的年龄流行特征各不相同，综合来看各种基因型HPV感染年龄分布特征呈现出“单峰曲线”、“双峰曲线”两种形式，众多研究者指出25岁以下、55岁以上为HPV感染的高危年龄。但本次研究结果显示平潭综合实验区妇女HPV感染年龄分布特征有其自身特点，发现其感染者集中于30～49岁，对于其原因，仍需要进一步分析，知道该地区应针对性控制HPV感染。整体来看，平潭综合实验区HPV感染情况并不十分严重，可能与近年来的防控措施有关，但是仍不可掉以轻心，需加强防控，最大限度降低HPV感染率及其向宫颈癌转化的风险。研究显示30～49岁为该地区HPV感染的多发年龄，因此在防治过程中要重点关注这一年龄段女性。

HPV诊断能有效、准确鉴别宫颈癌前病变，因此控制HPV感染的关键在于加大筛查力度、定期检测，一般认为筛查年龄应该从21岁开始，21岁以下HPV感染发生率很低，而55岁女性进入绝经期，也增加了宫颈癌变的发生风险，因此筛查范围必须囊括老年女性。本次研究显示30～49岁妇女为该地区HPV感染的多发年龄，因此应重点对这一年龄段女性进行筛查，推广、普及这一年龄段女性的HPV筛查。对于发生HPV感染的患者，尽早予以宫颈癌疫苗控制，以降低宫颈癌的发生率。这样能够提升HPV感染的防治效果，保证女性的身心健康。

综上所述，平潭综合实验区妇女HPV感染率相对低于我国平均水平，感染年龄集中在30～49岁，应作为控制重点人群。