脑通康片剂对脑缺血模型大鼠血液流变学的影响

梁 慧，尚艳琦，姜 波，董晓红，韩玉生，刘 旭，周忠光，顾媛媛，代巧妹

（黑龙江中医药大学，哈尔滨 150040）

缺血性脑血管疾病（Ischemic cerebrovascular disease）是一种不同程度的缺血性脑血管疾病的总称，又称脑缺血性疾病。其临床类型主要包括短暂性脑缺血发作（Transient ischemic attack，TIA）、可逆性缺血性神经功能缺失（Reversible ischemic neurologic deficit，RIND）、进展性卒中（Progressive stroke，PS）、完全性卒中（Complete stroke，CS）、边缘区梗死（Watershed infarction，WI）、 腔 隙 性 梗 死（Iacunar infarction，LI），是神经系统常见的多发病[1]。随着对其基础性病变机制研究的深入，发现体内基础性物质的改变、炎症细胞和炎症因子的参与、凋亡因子及信号的激活等与缺血性脑血管疾病的发生发展密切相关[2]。脑血管疾病病理变化除了常规的血管管腔异常与内皮细胞的异常以外，还包括血液流变学异常变化与微循环障碍[3]。脑通康片剂是由当归、川芎、三七、红花、地龙、山楂等11味中药组成，是在传统方剂——脑得生的基础上添加活血祛瘀、补益心血方药配伍而成，具有活血化瘀、通经行络、化瘀行滞、醒脑开窍等临床功效，经现代制备工艺制成片剂。临床上可用于脑缺血性疾病、脑出血后遗症等[4]疾病的治疗。

1 材料

1.1 实验动物 健康SD大鼠，雌雄各半，体质量220～250 g，由黑龙江中医药大学药物安全评价中心（GLP）提供，动物使用许可证号：SCXK2014-004，室温饲养，自由摄食饮水。

1.2 实验药物 脑通康片剂（本实验室自制），尼莫地平片（拜耳医药保健有限公司），0.9%氯化钠注射液（哈尔滨三联药业股份有限公司，产品批号：171002D11），10%水合氯醛（天津市福晨化学试剂厂，批号：20170907），青霉素针粉（哈药集团制药总厂，批号：16010906-2）。

1.3 主要仪器 LBY-N7500B全自动血液流变仪（北京普利生仪器有限公司）；C2000-A全自动血凝仪（北京普利生仪器有限公司）；KDC-160R高速冰冻离心机（科大创新股份有限公司中佳分公司）；CPA225D电子分析天平（赛多利科学仪器北方有限公司）。

2 方法

2.1 动物分组及给药 将60只SD大鼠随机分成6组，即模型组、假手术组、尼莫地平组、脑通康高、中、低剂量组，每组10只。模型组和假手术组给予生理盐水8 mL/kg，尼莫地平组给予尼莫地平20 mg/kg，脑通康高、中、低剂量组分别给予脑通康片剂2.916 g/kg、1.458 g/kg、0.729 g/kg，连续灌胃给药14 d。

2.2 动物模型制备 各组SD大鼠连续灌胃给药14 d后，利用传统双侧结扎方法对大鼠手术造模[5]，术前12 h禁食，不禁水。大鼠腹腔注射10%水合氯醛（3.8 mL/kg）麻醉后，采用仰卧位固定于手术台上，颈部备皮消毒，将颈部正中皮肤切开，采用钝剥离方法将皮下筋膜及肌肉组织分离，充分暴露双侧颈总动脉，用非吸收性外科缝合线结扎双侧颈总动脉，使其血流被完全阻断。给予青霉素消炎后缝合伤口，术后37 ℃保温，待动物苏醒。假手术组仅分离双侧颈总动脉而不结扎，而后缝合伤口。

2.3 血液流变学检测 于造模24 h后麻醉大鼠，在腹主动脉处取血，全血快速注入含肝素钠抗凝剂的真空采血管中，轻轻摇晃混匀，避免凝血，3 000 r/min离心10 min后于室温3 h内采用血液流变仪和凝血仪测定全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数、红细胞变形指数等血液流变学指标。

2.4 数据处理 采用SPSS 19. 0软件，数据采用均数±标准差（± s ）表示，多组间比较采用单因素方差分析，以P＜0. 05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 各组大鼠全血黏度及血浆黏度的比较 见表1。

3.2 各组大鼠红细胞参数比较 见表2。

表1 各组大鼠全血黏度及血浆黏度的比较（± s ，n = 10）

表1 各组大鼠全血黏度及血浆黏度的比较（± s ，n = 10）

注：与模型组比较，# P＜0.05，## P＜0.01；与假手术组比较，△P＜0.05

组 别 剂量 全血黏度/mPa·s 血浆/mPa·s低切（1 /10） 中切（1 /60） 高切（1 /200）脑通康低剂量组 0.729 g/kg 12.64±1.44# 6.54±0.74 4.99±0.33 1.18±0.04#脑通康中剂量组 1.458 g/kg 12.99±1.59# 6.63±0.60 4.80±0.27# 1.17±0.02#脑通康高剂量组 2.916 g/kg 11.36±1.51## 6.09±0.84# 4.57±0.44# 1.19±0.07#尼莫地平组 20 mg/kg 12.67±2.79# 6.39±1.14# 4.82±0.46# 1.17±0.04#模型组 - 14.14±2.26△ 7.05±0.87△ 5.25±0.28△ 1.32±0.02△假手术组 - 11.30±1.70 6.15±0.61 4.51±0.39 1.11±0.03

表2 各组大鼠红细胞参数比较（± s ，n = 10）

表2 各组大鼠红细胞参数比较（± s ，n = 10）

注：与模型组比较，# P＜0.05；与假手术组比较，△P＜0.05

组 别 剂量 红细胞聚集指数（EAI） 红细胞刚性指数（IR） 红细胞变形指数（DI）脑通康高剂量组 2.916 g/kg 2.93±0.19 7.13±0.58 0.87±0.03脑通康中剂量组 1.458 g/kg 3.37±0.19 7.16±0.57 0.69±0.04脑通康低剂量组 0.729 g/kg 3.48±0.14 7.78±1.13 0.68±0.09尼莫地平组 20 mg/kg 2.66±0.37# 7.26±1.10# 1.00±0.07#模型组 - 4.68±0.28△ 8.72±0.90△ 0.59±0.08△假手术组 - 2.50±0.26 6.99±0.77 0.98±0.08

4 讨论

脑通康片剂中，重用葛根用以促进脑血管及冠状动脉循环，降低血脂，改善脑缺血症状[6]。川芎是脑通康片剂中的主要有效成分之一，而阿魏酸是川芎中主要有效标识成分，大量实验数据表明，阿魏酸具有明显的抗动脉粥样硬化，抗血小板凝集和血栓等作用[7]；当归作为脑通康片剂中主要有效成分之一，近年来大量药理实验证明，其有效活性成分具有抗血栓、改善血液流变性抗血小板聚集，保护脑缺血损伤等多种作用[8]；据国内外文献记载，丹参主要成分丹参素对脑缺血损伤具有保护作用[9]。丹参、川芎、当归、赤芍配伍，丹参苦微寒，活血祛瘀止痛，川芎辛温，活血行气止痛，两者寒温并用，气血并调，凉而不滞，活而有度，上行头目，下行气海，行气活血；川芎与赤芍，川芎为血中之气药，行气活血，赤芍活血化瘀止痛，三者相伍，共奏行气活血之效；当归川芎相伍为用，当归以养血为主，川芎以行气为要，当归补血调经，活血止痛，润肠通便，川芎活血行气，祛风止痛，二者互制其短而展其长，气血兼顾[10]。地龙通经活络；黄芪补中益气；三七、红花活血散瘀、通经活络，现代药理研究表明红花中主要有效活性成分—羟基红花黄色素A具有显著的抗缺氧、抗凝、降压、改善心脑血管供血不足等作用[11]；益母草活血通经利尿消肿；山楂善入血分，具有活血行气散瘀之功，同时具有扩张血管、增加冠脉血流量、降血压、软化血管的作用。诸药为伍，共奏活血化瘀、通经行络、化瘀行滞、醒脑开窍之功效。近年来，在探索脑缺血疾病时，人们对于血液流变学的异常改变并没有得到足够的重视与关注，大多数的研究者还是将关注的焦点局限于血管内经和内皮细胞的变化上[12]。实际上血液流变学的异常变化可使微循环发生明显的障碍，脑部供血流量发生变化，已经成为脑血管疾病发病的危险要素[13]。因此，在预防与治疗脑血管疾病中，除了常规的扩张血管与改善内皮细胞的状态以外，改善血液流变学起着至关重要的作用[14]。经实验证实，脑通康片剂对脑缺血大鼠血液黏度有一定的改善作用，不同剂量均可以使脑缺血模型大鼠全血黏度降低，血浆黏度升高，这可能使缺血脑组织的血液供应有所改善，其中脑通康高剂量改善效果较明显；由于脑通康片剂对血液的有形成分不产生明显的作用，红细胞聚集指数、刚性指数、变形指数均未发生明显变化，因此认为其主要通过改变血浆黏度而改善血液黏度的变化。表明脑通康片剂能有效改善脑缺血损伤大鼠的血液流变性，进而改善微循环，使脑血流量增加，进一步保护缺血损伤脑组织，为探索脑通康片剂在预防和治疗缺血性脑疾病方面提供理论依据与理论基础。