湖北恩施地区土家族人群RAF-1 rs1051208基因多态性与胃癌易感性的关系

吴科志

摘要 目的：探讨RAF-1 rs1051208基因多态性与胃癌易感性的关系。方法：收治接受胃大部切除或者胃全切手术的胃癌患者60例，同期收集健康体检者60例为对照。采用SNaPshot方法对分离的DNA进行基因分型。结果：RAF-1 rs1051208 SNP基因型在两组之间的分布差异有统计学意义（P<0.05）。结论：RAF1基因C等位基因在胃癌易感性中起重要作用，因此，SNPs是预测可怕疾病尤其是癌症易感性的重要生物标志物之一。

关键词 胃癌;RAF-1;基因多态性

胃癌是世界范围内最常见的癌症之一，作为一种具有不同组织学和分子亚型的异质性疾病也是导致癌症死亡的主要原因之一。然而，胃癌的发病率在不同的地区有所不同，主要集中在东亚、东欧以及部分拉丁美洲地区[1]。对其发病原因的研究一直在进行中，目前认为幽门螺杆菌感染是引起该病的一个重要因素（但不是唯一的）危险因素。而更多研究认为胃癌是一种多因素疾病，包括饮食（高盐、饮酒、抗氧化剂水平不足）、吸烟、遗传变异和环境因素等因素被认为影響其患病率。遗传因素（包括某些基因的表达或沉默）决定了个体对癌症的易感性。据报告，幽门螺杆菌感染引起的慢性炎症反应是胃癌发生发展的早期阶段之一[2]。炎症因细胞因子分泌而发生，最重要的促炎细胞因子是IL-8，IL-6，IL1β，TNF-α和IFN-γ。其中，肿瘤坏死因子（TNF）是GC发展的重要因素之一，也可抑制胃酸分泌。既往研究也证实晚期胃癌患者血清中TNF-α的表达显著增加，而在幽门螺杆菌感染的男性中也检测到TNF-α增加。TNF-α由巨噬细胞、单核细胞、T细胞、NK细胞分泌;它位于染色体6上的组织相容性复合体的Ⅲ类区域。TNF-α的表达受单核苷酸多态性（SNP）控制。迄今为止，已经在TNF-α启动子仁鉴定了不同的SNP，其中一些最重要的包括-308，-238，-1031和-875。TNF-α1031多态性涉及多种癌症、自身免疫性疾病、肝炎和感染性疾病[3]。此外，在胃癌研究领域也有陆续报告。miRNA的结合抑制其对mRNA的表达;单核苷酸多态性可以影响这个过程，从而增加不同疾病，尤其是癌症的风险。miRNA的多态性对癌症相关基因（例如RAF-1）的交替有影响，该基因可能决定对癌症的易感性。已发现RAF-1与不同的癌症相关，特别是结直肠癌（CRC）。迄今为止，尚未在胃癌中评估基因RAF-1（rs 1051208）的单核苷酸多态性（SNPs）。本研究调查了恩施地区土家族人群胃癌中RAF-1 rs1051208 SNPs，以期为研究基因与胃癌发病的易感性提供一定的线索。

资料与方法

2014年1月-2017年10月收集湖北恩施地区土家族人群接受胃大部切除或胃全切手术的胃癌患者60例。另外，招募健康体检者60例为对照。本研究中所有研究对象均签署了知情同意书，并得到我院伦理委员会批准。

基因分析：本研究样本来自手术后的肿瘤样本或者健康人群胃镜的组织样本，采用异丙醇提取和乙醇沉淀分离出DNA基因片段。采用SNaPshot方法对分离的DNA进行基因分型。

统计学分析：本研究采用统计学软件SPSS11.0进行统计分析。应用Logistic回归分析估计优势比（OR）和95%置信区间（CI）。通过Hardy-Weinberg检查细胞因子基因多态性平衡。调整年龄、性别和招募来源以排除任何潜在的混杂因素。P<0.05表示差异有统计学意义。

结果

纳入对象的一般情况：此次研究纳入60例胃癌患者，其中男37例，女23例;年龄31～65岁。健康对照组人群60例，男34例，女26例;年龄29～63岁。见表1。

RAF-1 rs1051208 SNP与胃癌易感性的关系：本研究分析5种基因模型（TT、TC、CC、Tallele和Callele）。通过对比健康对照和胃癌组，发现RAF-1 rs1051208SNP基因型在两者之间的分布差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

讨论

本研究基于湖北恩施地区土家族人群进行的SNP与胃癌易感性的研究，研究结果认为，RAF-1 rs1051208 SNP与胃癌易感性具有较强的相关性，尤其是C等位基因与TC高风险之间存在显著相关性。

证据支持TNF诱导可直接磷酸化并活化RAF-1的神经酰胺活化的蛋白激酶（CAPK）的事实。据报告RAF-1由于其作为线粒体凋亡途径的主要介质的调节作用而具有致癌功能。不同的研究表明，RAF-1的活化与细胞凋亡抵抗密切相关，这可能是癌症中不受控制的细胞周期分裂的主要原因[4]。这两种TNF和RAF-1基因的SNP由于它们在调节表达蛋白中的作用而导致炎症是重要的。此外，RAF-1附着于其在3'UTR基因（多态性区域）的结合位点并调节基因表达。研究也发现RAF-1RNA 3'UTR中的变异可能会影响mir-213与RAF-1 mRNA的结合，这是由于RAF-1在凋亡途径中的介导功能的改变以及个体对癌症的易感性。

值得注意的是本研究也存在一些问题，如本研究是基于湖北恩施地区土家族人群而进行的，其结果不能适用于更大范围。此次，本研究纳入样本量较小，可能存在一定的偏移。

总之，研究结果认为，RAF-1rs 1051208 SNP与胃癌易感性具有较强的相关性，尤其是C等位基因与TC高风险之间存在显著相关性。

参考文献

[1]Lu R，Dou X，Gao X，et al.A functional poly-morphism of lymphotoxin-alpha（LTA）geners909253 is associated with gastric cancerrisk in an Asian population[J].Cancer Epide-mio1，2012，36（6）：380-386.

[2]Gorouhi F，Islami F，Bahrami Met al.Tu-mour-necrosis factor-A polymorphisms andgastric cancer risk：a meta-analysis[J].Br JCancer，2008，98（8）：1443-1451.

[3]Yang JJ，Ko KP，Cho LY，et al.The role of TNFgenetic variants and the interaction with cig-arette smoking for gastric cancer risk：a nest-ed case-control study[J].BMC Cancer，2009，9：238.

[4]胡建奎，王晓磊.头痛宁胶囊治疗血管性头痛的疗效观察[J].现代中西医结合杂志，2005，14（21）：2815.