肝素锂对电化学发光法测定甲状腺激素影响的研究

黄 俊，聂 鑫，罗开宏，李贵星

(四川大学华西医院实验医学科，四川 成都 610041)

近年来，我国甲状腺疾病发病率逐年增高[1]。甲状腺相关实验室项目检查对甲状腺疾病的诊断和和疗效评估非常重要，检查方法由最初的放免法、酶联免疫法更换为准确度和灵敏度更高的电化学发光法。为缩短实验室检测时间，实验室采用抗凝血来快速分离血浆，有研究显示：肝素钠会导致游离甲状腺素(FT4)和促甲状腺激素(TSH)测定结果较血清检测结果偏高[2]，肝素锂以及 EDTA-K2对甲状腺素(T4)及TSH的测定有影响[3，4]。甲状腺自身抗体是指由于自身免疫紊乱产生的针对甲状腺某些成分的免疫球蛋白，主要包括促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、抗甲状腺球蛋白抗体(A-TG)和抗过氧化物酶抗体(A-TPO)，对 Graves 病和桥本氏甲状腺炎等甲状腺疾病的鉴别诊断与疗效评估非常重要。目前尚未有研究探讨抗凝剂对甲状腺自身抗体的检测影响。作者采用罗氏Cobas e601 型电化学发光免疫分析仪及配套试剂，比较分析肝素锂抗凝血浆和无添加剂血清样本甲状腺全套功能指标的差异，探究肝素锂抗凝血浆对甲状腺指标的影响，指导临床采血管的正确使用。

1 资料与方法

1.1一般资料选择 2017 年 8-9 月在华西医院就诊的疑似甲状腺疾病的门诊患者 60 例，其中男 23 例，女 37 例；年龄 10～73 岁，中位年龄 43 岁。同时采用肝素锂抗凝的绿头管和无添加剂的红头管各采血 3 ml，所得血液样本均在室温放置 30 分钟待红头管血清析出后采用 3500 转/分离心 5 分钟分别收集绿头管血浆或红头管血清。

1.2仪器及试剂及检测方法FT3、FT4、T3、T4、TSH、A-TG、A-TPO、TRAb和甲状腺球蛋白(TG)浓度检测均采用罗氏 Cobas e601 电化学发光免疫分析仪及配套试剂和校准品进行。所有检测均严格按照仪器操作和试剂说明书等相关 SOP 文件进行，本实验室通过美国病理学家协会(CAP)认可，保证结果准确可靠。

1.3统计学方法采用 SPSS 20.0 统计软件进行数据分析。所有指标采用中位数(四分位数间距)表示。两种标本处理方式之间的数据比较采用秩和检验，P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1绿头管血浆与红头管血清中甲状腺激素检测水平比较绿头管血浆与红头管血清中FT3、FT4、T3、T4和TSH检测结果如表 1 所示，两组各指标检测差异无统计学意义(P> 0.05)。

表1 绿头管血浆与红头管血清中甲状腺激素检测水平

2.2绿头管血浆与红头管血清中TG水平比较绿头管血浆和红头管血清中TG检测水平分别为 8.24 μg/L[(1.61～18.52)μg/L]和 7.74 μg/L[(1.02～18.31)μg/L]，两者差异无统计学意义(Z=-0.079，P= 0.937)。见图 1。

图1 绿头管血浆与红头管血清中甲状腺球蛋白检测水平

2.3绿头管血浆与红头管血清中甲状腺自身抗体水平比较绿头管血浆和红头管血清中A-TPO检测水平分别为 14.58 IU/ml[(10.85～98.11)IV/ml]和 11.44 IU/ml[(8.01～86.82)IU/ml]，两者差异无统计学意义(Z=-1.474，P= 0.141)(见图 2)。绿头管血清中A-TG和TRAb检测水平为 35.00 IU/ml[(22.37～284.70)IU/ml]和 3.55 IU/ml[(3.30～4.08)IU/ml]，明显高于红头管血清中 15.3 IU/ml[(10.00～238.22)IU/ml]和 0.68 IU/ml[(0.41～1.00)IU/ml]，两者差异有统计学意义(Z=-3.072 和-7.147，P= 0.002和 0.000)(见图 3)。

3 讨论

近年来，甲状腺相关疾病的发病率逐年增高，甲状腺激素及相关项目检查对甲状腺疾病的诊断、鉴别诊断及疗效评估非常重要。在临床工作中，为缩短标本处理时间及临床实验室标本检验结果回报时间(Turn Around Time，TAT)，临床常采用抗凝血来快速分离血浆。为提高检测的准确性，明确抗凝血是否会对检测结果产生影响尤为重要。不同的文献报道不一，并且缺乏抗凝血对甲状腺自身抗体检测影响的相关研究。

图2 绿头管血浆与红头管血清中抗过氧化物酶抗体检测水平

图3 绿头管血浆与红头管血清中抗甲状腺球蛋白抗体和促甲状腺激素受体抗体检测水平

本研究的结果显示：采用肝素锂抗凝血浆标本和无添加血清标本检测 FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO 时，结果差异无统计学意义。说明当患者检测FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO 时，可采用肝素锂抗凝血体进行分析。

TRAb 是针对促甲状腺素受体(TSHR)的自身抗体，与 Graves 病(GD)和自身免疫性甲状腺功能减退症的发病密切相关。目前，TRAb 的检测主要应用于 GD 的诊断以及治疗方案的选择，连续监测TRAb 还可以反映抗甲状腺药物的疗效以及预测复发，因此，TRAb 检测结果可影响临床医生对患者的诊断、治疗和预后判断。A-TG 是自身免疫性甲状腺疾病病人血清中的一种常见自身抗体，临床上常应用于桥本氏甲状腺炎等自身免疫性甲状腺疾病的筛选诊断，也是A-TG阳性甲亢患者 I131治疗后发生甲减的主要预测因子[5]，本研究结果显示：采用肝素锂抗凝血 TRAb和A-TG检测结果明显高于血清样本，两者差异有统计学意义(P< 0.05)。我们认为：当患者检查甲功有 TRAb和A-TG项目时，不能采用肝素锂抗凝血浆样本代替血清样本，应该使用无添加剂的红头管。

综上所述，对于 FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO，必要时可采用肝素锂抗凝血浆样本缩短标本处理时间以提高检测时效性，测定 TRAb 以及 A-TG 时只能采用血清样本以保证准确的检测结果。然而，肝素锂影响 TRAb 及 A-TG 检测结果的机制尚不清楚，还需进一步研究。