血清ECP、IgE和外周血EOS联合检测对CVA与哮喘的鉴别诊断

杜阿妮，赵智凝，曹 蓉

咳嗽是最常见的呼吸道症状之一，咳嗽变异性哮喘（CVA）是指以慢性咳嗽为唯一或主要临床表现的一种特殊类型哮喘，存在气道高反应性[1-2]。CVA的病因及发病机制尚不完全清楚，其常发生于夜间及清晨[3]。研究表明，CVA具有气道重构、气道高反应性及嗜酸粒细胞性气道炎症等典型哮喘的特征[4]。嗜酸性粒细胞（EOS）是来源于骨髓的非分裂细胞，可分泌活性氧介质、脂质介质、颗粒介质等，在CVA气道炎症反应中发挥最终效应作用[5]。嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（ECP）是由EOS释放的毒性蛋白颗粒，会导致哮喘患者气道上皮损伤、诱导肥大细胞释放组胺等，从而引起气道高反应性[6]。IgE是血清中的最少抗体族，哮喘患者在发病过程中，IgE可引起肥大细胞脱颗粒，介导了早期反应和晚期反应[7]。EOS、ECP和IgE均可作为检测CVA和哮喘的指标，但在以往的研究中，对于三者联合检测在CVA与哮喘鉴别诊断中的应用很少，且CVA没有明显的喘息症状，很容易被漏诊或误诊。因此，本研究通过检测CVA患儿、哮喘患儿及正常儿童的血清ECP、IgE和外周血EOS水平，了解这些指标与CVA和哮喘发作的关系，探究血清ECP、IgE和外周血EOS联合检测对CVA与哮喘的鉴别诊断价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象 以2015年5月～2018年1月笔者收治的CVA患儿60例作为CVA组，纳入标准：年龄6～14岁，符合CVA的诊断标准(以咳嗽为主要症状，夜间、清晨明显，病程≥1个月，胸部X线检查未见异常)；停用所有可能影响激发试验及诱导痰等检查项目的药物。以同期笔者收治的哮喘患儿60例作为哮喘组，纳入标准：年龄6～14岁；符合哮喘的诊断标准，近4 w内未用激素治疗；病程≤2年。另选择同期在本院体检的正常儿童160例作为正常组，均无哮喘、CVA史，无个人及家族过敏史。

3组排除标准：纤毛不动综合征、支气管肺发育不良、肺结核等疾病患儿；不愿意或不能配合研究者；合并其他系统严重疾病影响本研究正常进行者；入选时有呼吸道感染或日常口服激素等药物者；合并有其他免疫性疾病患者。

本研究得到了3组入选者家长的知情同意，医院伦理委员会也批准了本研究。3组入选者的身高、体重、性别、年龄等比较均无显著差异(P＞0.05，表1)。

1.2 样本采集 分别留取3组入选者的空腹静脉血4 ml(避免溶血)，室温静置2 h，2000 r/min离心15 min，分离血清，-80℃冰箱保存，统一检测。

1.3 检测指标 采用ELISA法测定血清ECP与IgE浓度，试剂盒来自上海锐聪实验室设备有限公司和美国赛默飞世尔公司；使用ACTS血细胞分析仪（美国贝克曼库尔特公司）检测外周血EOS计数。参考娄庆[8]的方法，采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）确定诊断临界值。

1.4 统计学方法 应用SPSS22.00统计软件分析，计量数据以均数±标准差表示，计数数据以例和百分率表示，3组间数据的比较采用方差分析，两组间数据比较采用χ2检验或t检验，假设检验水平为α=0.05。

2 结果

2.1 3组血清ECP、IgE和外周血EOS水平比较3组ECP、IgE和外周血EOS水平均表现为哮喘组＞CVA 组＞正常组(P＜ 0.05，表 2)。

表13 组一般资料比较

表23 组血清ECP、IgE和外周血EOS水平比较

2.2 鉴别诊断 在CVA与哮喘组患儿中，以ECP 15 μg/L、IgE 500 ng/ml和 EOS 计数 0.20×109/L 作为诊断临界值，血清ECP、IgE和外周血EOS联合检测鉴别诊断CVA与哮喘的敏感性、特异性、准确性分别为91.6%、90.0%和86.7%。

3 讨论

咳嗽具有防御功能，是机体的保护性反射，但长期咳嗽可导致各种并发症的发生。CVA是儿科常见的就诊原因之一，也是主要的咳嗽类型。CVA的发生机制与哮喘相似，如果不对CVA进行早期干预，大约有30%的CVA患儿会出现喘息症状，并发展为典型哮喘[9-10]。ECP是一组分子量为21～29 kD的单链碱性含糖蛋白质，可引起多种病理生理改变，导致气道反应性增高，而检测血清ECP可直接反映气道内EOS的活化程度。哮喘是由外源性致敏原引发的，属于IgE介导的Ⅰ型变态反应性疾病。IgE通过与免疫细胞结合，使之致敏，当致敏原再次进入机体时，可以使致敏细胞释放炎症介质而导致CVA发作，并有可能发展为哮喘[11]。

尽管目前CVA的发病机制尚没有完全明了，但是气道重构是机体对损伤性刺激的一种修复反应，可表现为细胞外基质的沉积以及肺弹性支持力的丧失。EOS具有吞噬作用，是引起气道变态反应、气道高反应性的关键细胞。本研究显示，3组的EOS计数为哮喘组＞CVA组＞正常组(P＜0.05)，表明CVA与哮喘是同一病变过程的不同表现形式。患者哮喘发作时，其机体处于高度敏感致炎的状态，能够刺激机体分泌大量EOS；CVA只是没有明显气道痉挛，而患者的特应性体质没有改变，因此，EOS计数少于哮喘组。

CVA与哮喘都是由EOS、T淋巴细胞、肥大细胞等效应细胞分泌一系列炎症介质而诱发的气道慢性炎症[12-14]。IgE与肥大细胞等炎症细胞结合，可引起气道乃至全身的炎症；ECP主要是由活化的EOS分泌的，其在变态反应中起重要作用[15-17]。本研究发现，以 ECP 15 μg/L、IgE 500 ng/ml和 EOS 计数0.20×109/L作为诊断临界值，血清ECP、IgE和外周血EOS联合检测鉴别诊断CVA与哮喘的敏感性、特异性、准确性分别为91.6%、90.0%和86.7%，表明三者联合检测，可有效鉴别诊断CVA与哮喘。

综上所述，CVA与哮喘患儿血清ECP、IgE和外周血EOS水平均高于正常值，且哮喘患儿上述指标均高于CVA患儿。血清ECP、IgE和外周血EOS联合检测可有效鉴别诊断CVA与哮喘。