高效液相色谱法在药物分析实验中的应用

龚逸奕

【摘要】2015年药典和加10年药典相比，越来越多的药物的检验技术依赖于高效液相色谱法，这也在客观上要求医药类职业学院要加强高效液相色谱法的讲授。在药物分析这门课程中，地西泮注射液含量测定，诺氟沙星胶囊含量测定，阿司匹林片剂中杂质含量测定这几个实验都要求用HPLC进行，这也是医药化工行业的标准操作规范。因此，笔者通过在教学中总结出几条经验，为以后实验教学质量的改进提供一定的理论依据。

【关键词】药物分析 HPLC 含量测定 经验总结

高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）技术始于20世纪60年代末期，是以气相色谱和经典液相色谱法为基础的新型分析技术网。高效液相色谱具有分辨率高、速度快、分析精准等优点，从而使其在药物分析研究中对于物质的分离和分析占据越来越重要的作用，成为目前医药行业研究中的一种重要分析手段，也是各大高等学校药学等相关专业药物分析课程中的一个重点内容。随着科学技术的突飞猛进和国家经济建设的快速发展，高效液相色谱作为一种重要的分离分析技术，需求和应用越来越广泛[1]。国家对高等教育的投入日益增大，高校的办学规模、教学质量和基础设施建设都有了明显的改善和提高[2-5]，同时对实验设备的经费投入也逐年增加。我校根据医药行业的实际情况，大力支持发展HPLC的实验教学，购人国产普源仪器八套及进口岛津，安捷伦仪器各两套，基本能够满足学生的日常教学要求。但是，在实际教学过程中，还是会遇到各种问题，以下是笔者的一些教学经验。

一、培养学生预习复习习惯

高职学校的学生数理化成绩普遍不高，因此，大多数学生对课堂内容掌握不

深，对于高效液相色谱的基本原理基本不懂，有些学生只是死记硬背所有的操作步骤，由于所有的记忆没有建立在理解的基础上，因此课程结束以后，便会忘记所有课程内容，对今后的学习和工作完全没有帮助。针对于此，笔者要求学生课前预习溶剂组织器，高压泵，自动进样器，紫外检测器的工作原理及操作药典，并要求课代表实现把学生分成若干小组，分组检查，上课时，我再对全体学生进行抽查，不合格的学生不得进行操作，本次实验成绩为零分。

二、要求学生进行样品前处理操作

前处理工作往往相当耗费时间，因此在一些实验安排中该部分工作都由教师提前完成了，导致很多分学过高效液相色谱实验的同学都不能很好掌握。一般前处理包括试剂的纯化、样品溶解、样品的过滤等步骤。这些前处理非常重要，一方面有利于仪器的保护，特别是直接关系样品分析的有效性。因此，我们综合考虑实验学时，要求对样品的过滤必须进行，让学生熟悉该过程，并且在过滤过程中讲授其它前处理方法和步骤。另外，通过前处理操作可以使学生掌握超声仪，超滤装置等仪器的使用，还能训练学生进行容量瓶的使用，微孔滤膜的选择，流动相及色谱柱的选择，为将来的检验岗位工作提供一定的经验。

三、分组教学，逐个辅导和考核

目前我校的实验条件还无法做到一人一组的教学，一般将学生分为6组，每组四人进行教学工作，但是在實际教学工作中，难免出现有个别同学得不到操作机会，导致在实验考核过程中什么都不会，为了避免此类情况的发生，笔者将本门课程所要进行的四节HPLC实验课进行标记，每次的主操作人员必须不同，例如：在进行阿司匹林片剂中杂质含量测定时，主操作人员是学生A，在进行诺氟沙星胶囊含量测定时，主操作人员就是学生B，以此类推，这样每个学生都会得到均等的练习机会。并且在分组教学的过程中，教师详细讲解第一个实验操作，接下来的几个实验可以辅导学生单独完成，这样更培养学生独立思考的能力和团结协作的精神。实验考核可采用单独考核的方式，每个学生必须单独完成过关，包括理论考试，前处理操作考试和样品检验考试，尽量做到使每一个学生熟悉每一个缓解。

四、学生申报相关大学生课题

对于求知欲比较强，有进一步学历发展需求的学生，可以鼓励其报课题，课题内容可与HPLC相关，这样可以通过查阅资料及反复操作，进一步加深对HPLC的认识，并且将实际运用和科学研究联系起来，全面加强学生的科研及实际操作水平。目前，学生正在进行《饮料中咖啡因含量测定》及《常见汽水中苯甲酸含量测定》两项大学生课题，大量的学生参与到了其中，为学生的未来发展提供了中药的助力。

五、结语

笔者通过和教研室相关教师的讨论，共同提出了以上实验教学改革方案，通过最后实验考核结果，明显发现学生操作能力的提升，通过对从事相关岗位的回访，学生对以上教学改革也颇为满意。我们在接下来的教学改革过程中坚持以研究问题为中心，开设综合性、实用性实验，提高大专生的实际操作和自主学习能力。结合高效液相色谱实验，教会学生“提出问题分析问题解决问题”的系统学习方法，培养学生系统全面的分析解决问题的能力；培养相关专业学生的使用高效液相色谱仪的实践动手操作能力，使学生在进入实习后可以独立操作高效液相色谱仪。

参考文献：

[1]陈立仁，蒋生祥.高效液相色谱基础与实践[M].北京：科学出版社，2001：4-6.

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[3]程宝晶，徐良梅，李仲玉，等.大型仪器开放共享的探讨[J].实验室研究与探索，2010，29（7）：334-335.

[4]卞宁生，徐铮，李翔，等.教学型大型仪器实验室资源共享平台的构建与管理[J].实验室研究与探索，2009，28（3）：288-290.

[5]刁叔钧.高校天型仪器设备共享管理机制的探讨[J].实验技术与管理，2010，27（7）：194-196.