汉族和维吾尔族宫颈癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞与TGF-β1及IL-10的表达及意义

陈志刚，阿曼古丽，陈志芳，李宏

（1.石河子大学医学院第一附属医院医学实验室，新疆 石河子 832008；2.石河子大学医学院第一附属医院妇科，新疆石河子 832008；3.新疆医科大学第一附属医院妇科，新疆 乌鲁木齐 830054）

宫颈癌是维吾尔族的高发疾病，发病率为476/10万，死亡率为17.27/10万，我国是一般水平的四倍。CD4+CD25+调节性T细胞是近年发现的具有免疫调节功能的T细胞亚群，其在宫颈癌中的作用尚不清楚。Treg细胞与肿瘤的关系已成为近年免疫学的研究热点。近年来已有国内外研究报道多种肿瘤患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达增加，并与临床分期和预后相关[1-2]。但是有关维吾尔族宫颈癌患者外周血Treg细胞的研究却鲜有报道。本文对汉族、维吾尔族宫颈癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞及血清中细胞因子TGF-β1、IL-10表达与免疫功能下降的关系进行研究，探讨Treg细胞在宫颈癌患者免疫负调节中的作用及民族间的差异性。

1 资料与方法

1.1 临床资料 病例组为本院2015年1月～2017年5月病理活检确诊的汉族、维吾尔族宫颈癌组各25例，年龄30～66岁，平均年龄（48.9±8.7）岁。对照组为在本院体检中心体检的汉族、维吾尔族健康女性各25位。对照组判断标准为妇科检查加TCT检查证实为正常人群，年龄29～62岁，平均（47.9±8.1）岁，两组临床资料比较差异无统计学意义。

1.2 方法 Treg细胞的检测于晨时空腹采集维吾尔族、汉族正常人群以及宫颈癌患者外周静脉血2 ml进行流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg的含量。采用先分离人外周血单个核细胞，加入荧光标记的抗细胞表面特异性抗原CD4/CD25抗体，染色后用流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比率。通过ELISA检测血清中Treg细胞相关细胞因子TGF-β 1、IL-10的水平，试剂盒购自于美国Linco公司。

1.3 统计学方法 数据处理用SPSS 17.0统计软件，组间比较用t检验。

2 结果

2.1 两组外周血Treg细胞和TGF-，组、IL-10的比较 宫颈癌组外周血Treg细胞和TGF-β1、IL-10表达水平均高于对照组（P＜0.05），见表1。

表1 宫颈癌患者外周血Treg细胞和TGF-β1、IL-10的表达Table 1 Expression of TGF-β1，IL-10 andregulatory T cells of peripheral blood in cervical cancer patients

2.2 各组不同民族间外周血Treg细胞表达和TGF-β1、IL-10水平比较 ①各组内不同民族间比较。除病例组维吾尔族较汉族Treg细胞比例增加外，对照组和病例组内汉族和维吾尔族Treg细胞表达和TGF-β1、IL-10表达水平比较差异均无统计学意义。②组间同一民族比较。汉族和维吾尔族的病例组Treg细胞比例和TGF-β1、IL-10表达水平均较对照组升高（P＜0.05），见表2。

表2 汉族、维吾尔族宫颈癌患者外周血Treg细胞及TGF-β1、IL-10表达比较Table 2 Comparison of theExpression of TGF-β1,IL-10 and CD4+CD25+regulatory T cells of peripheral blood in cervical cancer patients of the Hans and Uygurs

2.3 Treg细胞与TGF-β1、IL-10表达水平的相关性分析宫颈癌外周血Treg细胞和TGF-β1相关性（r=0.66）、IL-10（r=0.75）表达水平具有明显相关性（P＜0.05）。

3 讨论

在人体免疫中，Treg细胞主要维持机体的免疫稳态，人体患肿瘤后，Treg细胞升高可抑制人体对肿瘤抗原的免疫应答，起到负向免疫调节作用。多项研究表明，Treg细胞在肿瘤外周血及组织中表达升高，并在肿瘤发病和预后方面具起重要作用[1-3]。 Treg细胞通过对机体抗肿瘤免疫应答的抑制作用，导致了肿瘤细胞的免疫逃逸。其发生机制可能的是：增殖活化的Treg细胞能够通过细胞间直接接触来介导免疫抑制,影响CD8+T及NK细胞的活化、增殖；抑制APC产生协同刺激分子，从而抑制效应性T细胞的增殖和IL-2的产生[4]。TGF-β1和IL-10是介导免疫抑制的细胞因子，在Treg细胞的募集和扩增中起重要作用。 TGF-β1和扩可抑制细胞毒性T细胞的成熟和巨噬细胞的激活；IL-10可降低抗原特异性T细胞增殖，阻止T细胞介导的CD4+细胞活化。还有研究证明，阻断IL-10能够阻断Treg细胞对机体免疫耐受的诱导[5]。

本研究显示，汉族、维吾尔族宫颈癌患者Treg细胞表达和TGF-β1、IL-10含量相比对照组显著增高，这和陈志芳等[6]报道相同。说明随着Treg细胞及IL-10、TGF-β1表达增高使效应T细胞活性下降，引起肿瘤免疫逃逸。分析TGF-β1、IL-10和Treg细胞的相关性显示，TGF-β1、IL-10和Treg细胞有明显相关，显示在宫颈癌免疫逃逸过程中二者可能参与了对Treg细胞的反馈调节，起到抑制性细胞因子的作用，进而促进了宫颈癌的发生及发展。本研究还显示，维吾尔宫颈癌患者Treg细胞表达高于汉族宫颈癌患者，这在以前文献未见报道，我们认为可能是宫颈癌患者细胞免疫水平低下，体内发生免疫抑制，提示这可能是宫颈癌细胞发生免疫逃逸的机制之一[7]，由于本研究样本较少，还需要今后进一步验证。

总之，宫颈癌患者外周血Treg细胞比例升高，可能是引起疾病发生的一项重要免疫指标。TGF-β1、IL-10表达升高抑制了效应T性细胞增殖，有助于肿瘤细胞的免疫逃逸[8]。而汉族、维吾尔族宫颈癌患者Treg细胞表达不同仍需深入研究。