番茄下胚轴和子叶组织培养及植株再生试验研究

周尧

摘 要：以无菌播种下的番茄无菌苗作为研究对象，通过采用正交试验的方法，对番茄下胚轴和子叶组织培养以及植株的再生体系进行详细分析，对试验结果进行科学探讨。在构建植株再生体系的基础上，促进了番茄植株的茁壮生长。

关键词：番茄；下胚轴；子叶；组织培养；植株；再生体系

文章編号： 1005-2690（2018）02-0100-02 中图分类号： S641.2 文献标志码： B

在转基因技术迅速发展的前提下，人们对番茄的研究也越来越多，积极促进了改良番茄新品种更好的发展。番茄作为一种蔬菜性作物，在基因工程方面得到了很好的发展。不仅是因为番茄的栽培过程简单，更重要的是人们对番茄遗传理论方面的研究较为深入[1]，这都为基因工程的稳定发展奠定了基础。构建番茄植株再生体系，促进了番茄下胚轴和子叶组织培养工作的顺利进行，并提供了可靠的参与依据，通过采取诱导方式来获得再生植株，为番茄遗传转化提供了方便。

1 试验材料与条件

1.1 研究材料

本次研究选取了来自中国蔬菜花卉研究院的番茄品种，主要有美丽樱桃番茄、中杂9号、中蔬4号、毛粉802[2]、串珠樱桃番茄及丽春番茄等6个品种的下胚轴、叶片以及茎段作为外植体。

1.2 组织培养分析

将番茄无菌苗在清水中浸泡48 h，消毒3 min，使用无菌水对其进行5次冲洗。在无菌的条件下将番茄苗接种到培养基上，温度为25～30 ℃[3]，使其在黑暗的环境中发芽，并在发芽后，及时将其放入培养箱内。光照16 h，光照强度达1 500～1 900 lx，在光照培养后的第6～8天就可以获得无菌番茄苗。

1.3 除掉外植体

当无菌番茄苗的苗龄达到10 d就可以将其下胚轴以及子叶等外植体除掉，切去叶柄和叶尖，剩余的部分为5～8 mm的切段。当不定芽长到2 cm时，及时将不定芽剪掉并用于培养基接种，20 d后统计生根结果。在此过程中需要明确：生根率=生根芽数量/幼芽数量×100%，及时观察根的形态，并测量根长度。

1.4 栽培条件及其成活率

将需要移栽的番茄苗移到自然温度条件下放置4 d，保证植株的自然光照，第4天加入少量水，使其与空气进行更好的接触。第6天取出植株，将其根部清洗干净，然后栽入穴盘中。在移栽中要及时舍弃劣质苗，优先选用根系发达的试验苗，保证其成活率。认真做好保湿遮阴工作，只有这样，方可确保移栽成活率达到85%以上。20 d后，将小苗移到大田进行栽培，能够达到99%的成活率。

2 试验结果分析

2.1 激素对番茄叶茎的影响

试验结果表明，番茄下胚轴和子叶外植体的叶芽分化能力很强，当苗龄达到10 d时，外植体边缘有明显的膨大以及弯曲现象，逐渐产生了愈伤组织。伴随着愈伤组织一天天长大，出现了绿色的芽点，随后芽点分化为单叶，此时每块愈伤产生了4～5个芽点，其叶芽分化率达100%，仅有一部分的愈伤组织能实现诱导生根。

2.2 无菌培养基对番茄种子的影响

添加过蔗糖+MS的培养基，种子发芽率仅为20%；仅添加蔗糖的培养基，其发芽率为62%；而添加琼脂的培养基，其发芽率却达到了100%。从以上数据看出，蔗糖和无机盐对番茄种子的发芽起到了很重要的促进作用，是番茄种子发芽的敏感要素。研究表明，种子的萌发率对培养基产生了决定性的影响，同时在添加蔗糖和无机盐的前提下，培养基形成了一定渗透压[4]，从而促进了种子萌发。

2.3 培养基对植株再生的影响

只有保证了番茄苗生长环境以及温度适宜，才能实现番茄苗的正常分化。在培养基中，番茄生根可以有效形成相对粗壮的根部，这种根部植株的成果率较高。同时多次实践也说明，优良的培养基对植株生长起到了很好的诱导效果，经过诱导的培养基其生根率达到了82%。同时相关人员发现，在本次试验中，番茄试管苗长势良好，对其经过组织培养后可以保证其生根率达100%，蔗糖、无机盐、无机酸这种组合对番茄苗的生根更有效。

3 小结

由于不同品种对激素以及培养基的要求有所不同，因此要想实现番茄下胚轴和子叶组织培养的平衡发展，一定要明确培养条件，同时加大对试验结果的研究力度，充分考虑多方面因素，构建植株再生体系，并且在诱导分化的情况下，成功建立番茄下胚轴和子叶组织培养再生体系，从而有效提高种子成活率。

参考文献：

[ 1 ] 郏艳红，王姝，刘仲齐.番茄下胚轴和子叶组织培养及植株再生的研究[J].天津农业科学，2012，18（01）：16-18.

[ 2 ] 赖小芳，陈伟强，王健康，等.番茄“7728”组织培养及植株再生研究[J].上海农业学报，2017（04）：35-39.

[ 3 ] 薛萍，肖艳双，徐岩，等.番茄不同基因型对植株再生能力的影响[J].陕西农业科学，2016，62（05）：38-39.

[ 4 ] 仇燕，刘红霄，杨松烨.番茄高效再生体系的建立[J].河北科技大学学报，2012，33（01）：83-88.

（收稿日期：2018-01-15）