TP-IgM-WB在排除早期先天梅毒中的应用

宋潇，王洪军，赵延明，杨嘉林，盖希余

（黑龙江省皮肤病防治所，黑龙江 哈尔滨 150001）

先天梅毒（Congenital syphilis）又称胎传梅毒（prenatal syphilis）是胎儿被母体血中的梅毒病原体通过胎盘感染所致，可引起死产、早产等，是一种严重影响婴幼儿身心健康的疾病[1]。先天梅毒患儿大多症状不明显，多为隐性感染，由于母体内梅毒特异性IgG抗体分子量较小可自由通过胎盘进入胎儿体内，致使临床早期诊断胎传梅毒困难较大，往往需要通过长期的随访才能最终确诊，从而错失最佳治疗时间。近年来，梅毒发病率持续增高，胎传梅毒逐年攀升，它影响了梅毒患儿家庭的生活质量，必须要引起高度重视。早期诊断、及时治疗、及早排除可疑的梅毒患儿，减少其家庭精神负担有着非常重要的社会意义。目前，国内在先天梅毒检测方法上，以梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST）为主[2]，但梅毒螺旋体免疫蛋白印迹试验（Treponema pallidum IgM Western blot，TP-IgM-WB）曾有过相关研究[3-4]，具备较好的敏感性和特异性。本研究采用16例疑似先天梅毒患儿血标本分别行TRUST、TPPA检测和TP-IgM-WB检测，评价疑似患儿血清梅毒（TP-IgM-WB）在排除早期先天梅毒中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 回顾性分析2013年6月～2016年12月到本所性病门诊进行确诊先天梅毒的1月龄内可疑患儿血样，共计16例。

1.2 疑似先天梅毒随访标准 参照我国预防艾滋病、梅毒、乙肝母婴传播工作实施方案要求，患儿符合梅毒TRUST、TPPA同时阳性，或TPPA单项阳性，纳入疑似先天梅毒随访病例范畴，如随访期间出现滴度不降反升或由阴转阳，可确诊为先天梅毒，随访至18月龄时如TPPA转为阴性，可排除先天梅毒。

1.3 标本采集 采集疑似先天梅毒患儿外周静脉血3 ml，分离血清后置于-20℃冰箱中冻存待检。

1.4 试剂与检验方法 按实验室规范进行TRUST、TPPA、TP-IgM-WB的检验，TRUST试剂由上海荣盛生物技术有限公司生产，TPPA试剂由日本富士瑞必欧株式会社生产，TP-IgM-WB试剂产自于德国欧蒙医学实验室诊断试剂有限公司，使用的3种试剂均在有效日期到达前。

1.5 统计学方法 运用SPSS 16.0软件统计分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

16例可疑梅毒患儿在首诊时TRUST、TPPA结果全为阳性，TRUST滴度均未达到母体4倍及以上，未达到胎传梅毒诊断标准，全部需要进行血清学随访，具体滴度为1∶1（7例43.75%），1∶2（5 例 31.25%），1∶4（3 例 18.75%），1∶8（1 例6.25%），经过3、6、12月随访，TRUST、TPPA全部转阴，转阴情况见表1。

表1 16例疑似梅毒患儿血清学试验转阴情况Table 1 16 cases of suspected syphilis children serological test negative situation

16例可疑梅毒患儿首诊时的TP-IgM-WB结果全部阴性，45 kD、15 kD、47 kD、17 Kd未出现显色反应，蛋白印记条带上阳性对照质控线均出现显色，说明试验有效。

疑似患儿随访后的TRUST、TPPA结果与TP-IgM-WB结果相符合，差异无统计学意义。

3 讨论

目前我国先天梅毒的诊断主要以实验室梅毒血清学和临床相结合的方法为主，存在着不足[5]。有临床症状的早期胎传梅毒或患儿血清TRUST滴度大于等于母体4倍的情况下很容易进行确诊，但在实际临床工作中，多数梅毒患儿出生后并没有明显的胎传梅毒症状，同时梅毒血清学TRUST滴度数值和与母体结果一致或低于母体数值，不容易进行及时确诊，可能导现漏诊的情况发生。TPPA、TRUST等作为常用梅毒抗体血清学检测方法，检测的IgG和IgM的混合抗体，其中IgG分离量小于IgM可以自由通过胎盘而IgM则不能通过，所以不能单单通过胎儿出生时的血液TPPA和TRUST阳性结果来确诊先天梅毒[6]。分别在3个月、6个月、12个月 、18个月监测TPPA和TRUST血清学变化，对于这些疑似先天梅毒患儿是非常必要的，在血清学结果随访3个月时如为阴性，并无先天梅毒临床表现，可以除外先天梅毒感染；3个月后若TRUST滴度一直不转阴，维持在较低滴度数值，则在每3个月时进行TPPA随访至18月龄，若随访期间任意一次TPPA结果阴转，就可以排除先天梅毒。但是，这种长期的随访容易致使真正的先天梅毒患儿错过最好治疗时机，另外，还有依从性不好的家庭也容易出现失访情况。所以，及时有效的排除先天梅毒感染，对无症状的疑似先天梅毒及时确诊是至关重要的。

梅毒螺旋体蛋白印迹试验是检测梅毒特异性IgM或IgG抗体，其敏感性高、特异性强。Dettori等[7]认为免疫印记法用于梅毒诊断优于FTA-ABS（荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验）和TPHA（梅毒螺旋体血球凝集试验）方法，对于早期梅毒的阳性率为100%。Marangoni等[8]发现，WB的敏感性、特异性均为99%，高于FTA-ABS(敏感性为90%，特异性为89%)。做到早期诊断先天梅毒，为临床实现及时有效干预可减少先天梅毒的危害[9]。

考虑TP-IgM的检测在确诊早期梅毒中具有重要的意义[10]，本研究针对2013年6月～2016年12月到本所性病门诊进行确诊先天梅毒的可疑患儿，其TP-IgM-WB结果与TRUST、TPPA结果进行对比，对于常规TRUST、TPPA方法16例疑似梅毒患儿均需进行随访，经过3、6、12月随访后，TRUST、TPPA全部阴转，与首诊时的TP-IgM-WB阴性结果全部符合。结果表明，TP-IgM-WB法应用于早期排除先天梅毒感染有较高价值，可有效避免对疑似梅毒患儿的长期随访过程，值得临床上大力推广应用。