饲料添加凝结芽孢杆菌及枯草芽孢杆菌对生长猪的生长性能影响

王乙茹，白华毅，王桂瑛，杨保和，廖国周，窦舒民，魏丽萍，刘元述，李云辉，程志斌*

（1.云南农业大学，云南 昆明 650201；2.云南快大多畜牧科技有限公司，云南 玉溪 653100;3.昆明三正生物科技（集团）有限公司，云南 昆明 650217；4.云南省西双版纳州勐腊县农业和科技局，云南 勐腊 666300）

饲用凝结芽孢杆菌具有饲用乳酸菌（产酸、抑菌）与饲用芽孢杆菌（耐热、抗逆）的共同优势[1-3]。2013年12月我国农业部颁布的《饲料添加剂品种目录》规范凝结芽孢杆菌可应用于生长育肥猪[4-5]。然而，目前凝结芽孢杆菌应用于生长育肥猪饲料中的试验报道较少[6-7]。这显然不利于凝结芽孢杆菌这一新型饲用微生态制剂的应用推广。

此外，枯草芽孢杆菌是我国饲料工业与养殖业推广最早、使用最广的饲用微生态产品[8-10]。当前应用的饲用微生态商品往往是多菌种的复合（组合）产品[11-12]。因此，本试验探索性研究单一或组合使用饲用凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌对30～60 kg生长猪的效果，为安全饲用微生态制剂及应用方案推广，奠定科学基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

饲用凝结芽孢杆菌制剂80×108cfu·g-1，饲用枯草芽孢杆菌制剂200×108cfu·g-1，均由昆明三正生物科技（集团）有限公司提供。

1.2 试验动物与试验设计

本试验挑选体重相近（30.2±0.3 kg）的杜×长×大（DLY）健康商品阉公猪28头，随机分为4个处理组，每个处理组7头，代谢笼单笼饲养。依据添加剂使用的不同，试验设计见表1。

表1 试验设计

1.3 试验饲粮

试验饲料参照国家农业部《猪饲养标准NT/T 65-2004》，同时考虑云南省市场实际情况，基础饲粮组成及营养水平见表2。试验饲料为颗粒饲料，制粒温度75℃，由云南快大多畜牧科技有限公司生产。

表2 基础饲粮组成及营养水平

1.4 饲养管理

饲养试验在云南省禄劝县畜牧兽医总站猪场进行。试验期间每天8:00、12:30、18:00定时饲喂，自由饮水，免疫、消毒、卫生等饲养管理按常规进行。饲养试验至对照组平均体重约达60 kg结束，试验期42 d。

1.5 测定指标

1.5.1 生长性能

测定猪体重、采食量，计算平均日增重、平均日采食量、饲料增重比等指标。

1.5.2 饲料表观消化率试验

采用内源指示剂法测定试验猪对饲料主要营养组分的表观消化率[13]。试验35 d开始，预饲期3 d，之后连续收集4 d粪样，-20℃保存。待试验结束后，粪样统一解冻，于60±3℃烘干，粉碎后待检测。实验室分析测定饲料干物质、粗蛋白质、粗脂肪、总能等表观消化率，在云南农业大学云南省动物营养与饲料科学重点实验室完成。

1.6 统计分析

试验数据采用SAS统计软件进行单因素统计分析，并进行Duncan's多重比较，结果以“平均值±标准误”表示。

2 试验结果

2.1 饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌对生长猪生长性能的影响

饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌对生长猪生长性能的影响见表3。

由表3可知，试验组1猪的平均日增重显著高于其他3个处理组（P＜0.05），且其他3个处理组平均日增重差异不显著（P＞0.05）。试验组1饲料增重比显著低于其他3个处理组（P＜0.05），且其他3个处理组饲料增重比差异不显著（P＞0.05）。此外，试验全期4个处理组的末重和平均日采食量差异不显著（P＞0.05）。

2.2 饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌对生长猪饲料养分表观消化率的影响

饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌对生长猪饲料养分表观消化率的影响见表4。

由表4可知，试验组1干物质表观消化率与试验组3差异不显著（P＞0.05），但显著高于对照组和试验组2（P＜0.05）。试验组1总能表观消化率最大（P＜0.05），试验组2最小（P＜0.05），试验组3与对照组差异不显著（P＞0.05）。此外，4个处理组粗蛋白质、粗脂肪的表观消化率指标，差异不显著（P＞0.05）。

表3 饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌对生长猪生长性能的影响

表4 饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌对生长猪饲料养分表观消化率的影响

3 讨论

理论上30～60 kg的生长猪肠道消化生理、免疫系统发育已较完善，和幼龄仔猪相比较不易发生饲料消化不良及腹泻等肠道疾病[14-16]。因此无需在生长猪饲料中添加饲用抗生素及化学合成抑菌药物[17-18]。由于饲料原料品质不稳定、养殖条件及饲养管理水平参差不齐等客观因素，迫使广大饲料企业配方师还是在饲料中使用饲用抗生素或化学合成抑菌药物，以保障企业饲料产品的市场竞争力[2,6]。这显然不符合未来“减抗、无抗”生猪养殖的发展趋势[19-20]。依据农业部《饲料添加剂品种目录（2013）》，饲用凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌应用于生长育肥猪饲料的规范，本试验以杆菌肽锌为对照组，探索性研究单一或组合添加饲用凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌，对30～60 kg阶段生长猪生长性能的影响，为高效“无抗”猪的养殖饲料提供借鉴方案。

本试验基础饲粮采用云南地区的典型商业饲料，对照组饲粮的杆菌肽锌添加量为40 g·t-1，符合安全使用规范[21]。科学考虑试验结果的可比性，试验组1饲用凝结芽孢杆菌添加剂量、试验组2饲用枯草芽孢杆菌添加剂量，均设置为2×106cfu·g-1（全价配合饲料），以比较观察两个饲用微生态制剂的实际养殖效果。在平均日采食量差异不显著的条件下，单一添加凝结芽孢杆菌的试验组1猪只平均日增重最高、饲料增重比最低，且两个指标显著优于添加杆菌肽锌的对照组。结果表明，选择品质稳定的饲用凝结芽孢杆菌产品，并在30～60 kg的生长猪饲料中添加量达2×106cfu·g-1（全价配合饲料），能够保障生长猪正常的生长性能。本试验研究结果与课题组前期的报道及李建国研究结果一致[6-7]。凝结芽孢杆菌在猪肠道内增殖、增生的过程中，产生L-乳酸，不仅具有直接杀菌抑菌功效，而且凝结芽孢杆菌能够分泌消化酶，有利于补充和提高肠道消化酶，改善饲料转化效率[22-27]。据此，本试验进一步分析了试验猪对饲粮养分的表观消化率，试验组1饲料干物质和总能的表观消化率两个指标显著优于对照组。说明在30～60 kg生长猪的一般商业性颗粒饲料产品中，单一使用饲用凝结芽孢杆菌2×106cfu·g-1能够获得较好的实际养殖效果。

此外，本试验还发现，总体上添加相同剂量饲用枯草芽孢杆菌（2×106cfu·g-1）的试验组2（单一添加枯草芽孢杆菌）和试验组3（同时添加枯草芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌）的猪生长性能与对照组差异不显著，甚至试验组2和试验组3的饲料增重比数值还略高于对照组。综合分析可能是以下原因影响了本次试验结果：饲用微生态制剂的菌株特性影响使用效果的发挥。

本试验采用的商业饲料产品由麦麸、油米糠、DDGS等多种非常规饲料原料组成，存在有害细菌、霉菌感染较高的风险。杆菌肽锌是目前使用最为普遍的饲用抗生素，有较好的抑菌效果，这可能是对照组猪保持较好生长性能的主要原因[21]。研究表明，饲用枯草芽孢杆菌调控肠道菌群平衡的机理基于“肠道占位”理论[10,12]。虽有研究表明特定的枯草芽孢杆菌菌株具有抑菌功效，但至今枯草芽孢杆菌分泌的抑菌物质及其作用机理不明确，这也证明并非所有的枯草芽孢杆菌菌株都具有直接抑菌作用[10,28,29]。因此，企业选用不同枯草芽孢杆菌菌株生产的饲用枯草芽孢杆菌添加剂产品，其效果的差异性显而易见。因此本次试验的试验组2和试验组3总体生长性能略低于对照组。林维雄等研究饲粮中添加饲用枯草芽孢杆菌1×106cfu·g-1对20～100 kg生长育肥猪的生长性能效果，结果表明，20～45 kg阶段，饲用枯草芽孢杆菌提高了猪的平均日增重，但未改善饲料增重比指标；45～75 kg阶段与75～100 kg阶段，饲用枯草芽孢杆菌对猪的平均日增重及饲料增重比指标均无显著改善效应[30]。姜军坡等进一步增加了枯草芽孢杆菌在饲粮中的添加量（10倍），研究饲用枯草芽孢杆菌1×107cfu·g-1对50～80 kg生长育肥猪生长性能的影响，结果表明，高剂量的饲用枯草芽孢杆菌提高了平均日增重，但也没有改善饲料增重比[31]。以上试验证明，商业饲用微生态制剂的菌株特性影响了不同饲粮条件下的应用效果。

不同饲用微生态制剂之间的协同效应与颉颃效应决定了饲用微生态制剂产品的应用效果。与对照组相比，单一添加凝结芽孢杆菌的试验组1改善了生长猪的生长性能，但同时添加凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的试验组3却未能改善生长猪的生长性能。综合分析发现，本试验使用的凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌两个菌株之间可能存在颉颃效应，这一现象类似饲用抗生素之间的配伍。本试验得到了姚晓红等和赵钰等的体外实验支持，采用牛津杯法几乎同一时间研究并报道了凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的颉颃效应，这与本次动物试验的试验组3效果总体低于试验组1相吻合[22-23]。以上结果进一步表明，当前市场大量销售的凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌、甚至包括其他复合饲用微生态制剂产品的组合方案，其确切效果及协同或颉颃机理有待试验科学评估。如果将两种或多种益生菌简单组合使用，不科学考虑多种菌之间的颉颃效应，在实际养殖生产中未必能够获得良好的生产效益与经济效益[32]。

4 结 论

本试验结果表明，不添加饲用抗生素及任何化学合成抑菌药物的基础上，生长猪商品全价颗粒饲料中添加饲用凝结芽孢杆菌2×106cfu·g-1能够获得较好的生长性能，表现在平均日增重与饲料增重比的改善。然而，与使用杆菌肽锌相比，单一添加同样剂量的饲用枯草芽孢杆菌、或组合添加枯草芽孢杆菌与凝结芽孢杆菌，没有获得生长性能的进一步改善。因此，在充分了解单一饲用微生态制剂功效的基础上，深入研究不同益生菌株之间的协同与颉颃效应，不仅具有科学理论意义，更具商业应用价值。