食品中合成着色剂柠檬黄的测定仪器条件对比

□ 叶 琳 广东省肇庆市质量计量监督检测所

柠檬黄（tartrazine），化学名称是1-(4-磺酸苯基)-4-(4-磺酸苯基偶氮)-5-吡唑啉酮-3-羧酸三钠盐，溶于水后呈现出鲜艳嫩黄色。由于柠檬黄安全、无毒、稳定，大部分不会在人体内积储且小部分经代谢的产物对人体无害，所以它是一种安全的食用合成着色剂。根据GB 2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中规定，不同类型的食品中柠檬黄的最大使用限量为0.04～0.5 g/kg。在GB 5009.35-2016《食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》[1]中规定了柠檬黄的检测仪器条件为二极管阵列检测器（DAD），波长范围400～800 nm，取428 nm；或者紫外吸收检测器（UVD），波长254 nm。本文将对这两种仪器条件进行对比分析。

1 原理

食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。

2 仪器和设备

高效液相色谱仪，带二极管阵列检测器（DAD）及紫外吸收检测器（UVD）。

3 试剂和材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

3.1 标准品

柠檬黄（CAS:1934-21-0）。

3.2 标准溶液配制

3.2.1 合成着色剂柠檬黄标准贮备液（1 mg/mL）

准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄0.1 g（精确至0.000 1 g）,置100 mL容量瓶中，加pH值为6的水到刻度，配成水溶液（1.00 mg/mL）。

3.2.2 合成着色剂柠檬黄标准工作液

临用时将标准贮备液加水稀释，经0.45 μm 微孔滤膜过滤。配制成每毫升相当 1.0、2.5、5.0、10、15 μg 的柠檬黄着色剂。

4 仪器条件

C18色 谱 柱，4.6 mm×250 mm，5 μm；进样量 10 μL；柱温 35 ℃；二极管阵列检测器（DAD）检测波长428 nm；紫外吸收检测器（UVD）检测波长254 nm。

5 测定

将柠檬黄标准工作液注入高效液相色谱仪，根据保留时间定性，外标峰面积法定量。同时进5针5.0 μg/mL的标准工作液计算精密度[2]。

6 结果

使用二极管阵列检测器（DAD），检测波长为428 nm的峰型及响应值如图1所示。

同条件下使用紫外吸收检测器（UVD），检测波长为254 nm的峰型及响应值如图2所示。

图1 使用DAD检测波长为428 nm的峰形图

图2 使用UVD，检测波长为254 nm的峰形图

因此在检测食品中的柠檬黄时，在其他条件相同下，使用二极管阵列检测器（DAD），检测波长为428 nm比使用紫外吸收检测器（UVD），检测波长为254 nm的标准曲线相关系数更高，峰型更好，响应值更高。