不同产地黄芩对小鼠急性肝损伤保护作用的实验研究

刘岩　计小清　赵印涛　辛思源　杜英杰　孔令娟　高占华

摘要：本文通过四氯化碳（CCl4）对实验小鼠造成急性肝损伤，观察不同产地、不同用量的黄芩保护小鼠实验性肝损伤作用的区别，结果证明黄芩对CCl4所致小鼠的肝损伤，可能通过增加了小鼠肝细胞的抗损伤能力起到相应的保护作用。

关键词：黄芩；CCl4；急性肝损伤；小鼠

中图分类号：G642.423 文献标志码：A 文章编号：1674-9324（2018）27-0264-02

黄芩[1]是唇形科Labiatae植物黄芩的干燥根，最早收载于《神农本草经》，味苦性寒，具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效。现代药理学研究证明，其具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、保肝、利胆等功效。肝脏是有毒物质或药物在人体内代谢、转化的重要场所，是人体重要的代谢器官，因此外源性物质很容易攻击肝脏，从而引发慢性或急性的肝损伤。人肝脏损伤的特点，与CCl4所导致的肝损伤动物模型十分相近，因为CCl4引起的急性肝损伤，与人类肝脏受损的实际情况非常相似，在实验中应用较为广泛。因此，本研究通过CCl4对实验小鼠造成急性肝损伤，观察不同产地、不同用量的黄芩保护小鼠实验性肝损伤作用的区别。

一、材料与方法

（一）药品及试剂

黄芩分别取自河北省承德市、山西省运城市、山东省临沂市、甘肃省定西市。取各产地黄芩均为15g，分别制成100ml药液作为高剂量组（150mg﹒ml-1）；取高剂量药液50ml稀释至100ml作为中剂量组（75mg﹒ml-1）；取中剂量药液50ml稀释至100ml作为低剂量组（37.5mg﹒ml-1）。橄榄油化学纯（成都市鑫龙试剂厂，生产批号20140615）；CCl4分析纯（成都市鑫龙试剂厂，生产批号20140809）。SOD（生产批号20141021）、MDA（生产批号20141019）试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，ALT（生产批号211448G）、AST（生产批号211106G）试剂盒由北京利德曼生化股份有限公司提供。

（二）实验动物

健康昆明种小鼠共112只，雌雄各半，体重为（25±3）g，[许可证号：SCXK（京）2012-0001]，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。小鼠常温饲养，常规饮食、饮水，适应性饲养1周。

（三）主要仪器设备

日立7600-020全自动生化分析仪；722分光光度剂（上海欣茂仪器有限公司）；LDZ5-2低速自动平衡离心机（北京医用离心机厂）。

（四）方法

取实验小鼠随机分为14组，每组8只，分别为实验对照组、模型组、山西运城（低、中、高）、河北承德（低、中、高）、山东临沂（低、中、高）和甘肃定西（低、中、高）剂量组。实验对照组和模型组小鼠用生理盐水灌胃，各给药组按照0.2ml﹒10g-1灌胃，各组小鼠均给药1周。末次给药后2h，实验对照组按10ml﹒kg-1给予橄榄油腹腔注射，模型组和各给药组小鼠腹腔注射0.1%的CCl4橄榄油溶液，造模后实验小鼠禁食不禁水24小时。各组实验小鼠禁食不禁水24小时后断头取血，常规制备血清。然后按照各试剂盒说明书方法，分别检测各组小鼠血清ALT、AST活性和SOD、MDA含量。

（五）数据处理

数据以X±S表示，应用SPSS—17.0统计软件进行方差分析。

二、结果

模型组小鼠血清ALT、AST含量显著高于实验对照组（P<0.01）。各给药组小鼠血清ALT、AST含量均低于与模型组，其中山西运城（中、高）、承德（低、中、高）、山东临沂（高）、甘肃定西（高）剂量组小鼠血清ALT含量与模型组比较均显著下降（P<0.01），山西运城（中、高）、承德（中、高）、山东临沂（高）、甘肃定西（高）剂量组小鼠血清AST含量与模型组比较均有显著性差异（P<0.01）。模型组小鼠血清SOD含量明显低于实验对照组（P<0.05），各给药组小鼠血清SOD含量均高于模型组，其中山西运城（高）、河北承德（中、高）、甘肃定西（高）剂量组小鼠血清SOD含量明显高于模型组（P<0.05）。模型组小鼠血清MDA含量与实验对照组比较明显升高（P<0.01），各给药组小鼠血清MDA含量与模型组比较均有所降低，其中山西运城（高）、河北承德（中、高）、山东临沂（高）、甘肃定西（高）剂量组小鼠血清MDA含量与模型组比较均存在显著性差异（P<0.01）。

三、討论与结论

肝脏的主要功能是以代谢为主，在人体内，以储存肝糖、分泌性蛋白质的合成、去氧化等为主要作用，肝脏一旦出现损伤，人体的物质代谢等功能将发生紊乱，甚至会危及生命[2]。因此，肝脏对人体至关重要。

本实验结果显示，模型组与实验对照组小鼠比较，血清ALT、AST含量均明显升高，说明CCl4对肝细胞造成了明显的损伤作用。不同产地、不同剂量给药组小鼠血清ALT、AST含量均低于模型组，且产自河北承德的黄芩效果尤为明显，并呈剂量相关性。因此，表明黄芩能增加小鼠肝细胞的抗损伤能力，在一定程度上对肝脏具有保护作用。

肝损害的程度及治疗后肝功能恢复的情况，可由肝组织内MDA含量的变化来反映。自由基是人体正常生化过程的中间产物，同时机人体还含有一些清除氧自由基的酶，如SOD，疾病的发生可能是由自由基产生过多或者机体内的酶含量过少导致，SOD能抑制自由基启动的脂质过氧化反应，并能清除自由基，但是当抗氧化酶活力不足时，清除机体自由基时就会产生障碍，最终自由基含量升高，从而引起细胞膜破裂和细胞功能的丧失，因此SOD的变化可以间接地反应疾病情况下自由基的变化。本研究结果表明，各给药组SOD含量较模型组均有所升高，而MDA含量均有所下降，而产自河北承德的黄芩效果更为明显，且呈剂量相关性。表明黄芩的保肝作用与其能抑制自由基脂质过氧化存在一定相关性。

综上所述，黄芩对CCl4所致小鼠的肝损伤，可能通过增加了小鼠肝细胞的抗损伤能力起到相应的保护作用。在不同产地的黄芩中，山西运城和河北承德中、高剂量组的黄芩保肝作用比低剂量组效果更好，说明黄芩对肝损伤小鼠的保护作用与其产地及剂量均呈一定相关性。同时，黄芩对小鼠肝损伤的保护作用与其能够提高肝脏的抗氧化能力也具有一定关系。

参考文献：

[1]党珍，张艳萍，王西芳，等.陕西子洲地产黄芩资源调查研究[J].现代中医药，2017，5（37）：79-81.

[2]夏娜，陈义磊，陶海燕，等.药桑多糖对四氯化碳所致大鼠肝损伤的保护作用[J].食品科学，2015，36（13）：247-251.