马蹄蕨药材质量标准研究

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1.广西壮族自治区中医药研究院，广西 南宁 530022；2. 广西中药质量标准研究重点实验室，广西 南宁 530022

马蹄蕨别名观音座莲、牛蹄劳，为观音座莲属植物福建观音座莲AngiopterisFokiensisHieron.的根茎，主要分布在福建、广东、广西、贵州、湖北等地，具有凉血止血、收敛消肿等功效，主要用于肠炎、淋巴结肿大、风热咳嗽、月经过多、功能性子宫出血、风湿骨痛、毒蛇咬伤、痈疮肿毒等[1]。马蹄蕨主要成分为黄酮类、有机酸类、甾体类及变型二肽类化合物，具有较强的抗氧化活性[2-4]。目前未见马蹄蕨质量标准研究的报道，笔者主要对马蹄蕨药材性状、显微鉴别、薄层鉴别、水分、灰分和浸出物等进行系统研究，为系统评价马蹄蕨质量提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器 LY-HPCCD 万能视频成像装置(成都励扬精密机电有限公司)；XS-205分析天平(梅特勒托利多仪器有限公司)；SX2-2.5-10马弗炉(沈阳市节能电炉厂)；DFY-500高速万能粉碎机(温岭市林大机械有限公司)。

1.2 试药 马蹄蕨采自广西百色、南宁等地(见表1)，经本院黄云峰副研究员鉴定为观音座莲属植物福建观音座莲的根状茎。对照药材(自制，编号MTJ-1，经广西中医药大学韦松基教授和广西中医药研究院赖茂祥研究员鉴定为观音座莲属植物福建观音座莲AngiopterisFokiensisHieron.)。所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 性状鉴别 本品呈块状，马蹄形，一面稍平整，有纵皱纹，另一面隆起，有皱缩的叶柄残痕，宽4～8 cm，长5～10 cm，表面黑褐色或灰褐色，粗糙，质坚韧，不易折断。切面灰白色，可见棕褐色散列的维管束，中部分布较多。气微，味微苦涩。

表1 马蹄蕨样品信息

2.2 显微鉴别

2.2.1 根茎横切面 表皮细胞1列，下皮细胞数列，棕色多角形，细胞壁较厚。皮层薄壁细胞，排列疏松，内含棕色物质和淀粉粒；有限周韧型维管束散在分布，外有略栓化的内皮层，韧皮部较窄，木质部由多角形的管胞组成。如图1所示。

2.2.2 粉末 灰白色，淀粉粒较多，层纹可见，直径21～86 μm。梯纹管胞，淡黄色，直径23～61 μm。表皮细胞黄棕色，多角形。纤维少见，末端顿尖，直径11～23 μm。如图2所示。

2.3 薄层色谱鉴别 取本品粉末2 g，加丙酮20 mL，回流提取1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取马蹄蕨对照药材2 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2015年版通则0502)试验，吸取上述2种溶液各5～10 μL分别点于同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以环己烷-乙酸乙酯(5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点(如图3所示)。

2.4 检查

2.4.1 水分 照水分测定法(中国药典2015年版四部通则0832第二法)测定。共考察测定了8批样品的水分含量，测定两次取平均值。结果见表2。

2.4.2 灰分 测定照灰分测定法(中国药典2015年版四部通则2302)测定，共考察测定了8批样品的总灰分含量和酸不溶性灰分含量。结果见表2。

2.4.3 浸出物 照醇溶性浸出物测定法(中国药典2015年版四部通则2201)项下的热浸法，以乙醇为溶剂，共测定了8批马蹄蕨药材样品的浸出物含量。结果见表2。

表2 马蹄蕨样品水分、灰分、浸出物测定结果

由表2测定结果得知，8批马蹄蕨药材水分含量最高为14.5%，最低含量为9.8%，因此，水分含量拟定不超过15.0%；总灰分含量试验结果为：最高总灰分为5.3%，最低总灰分含量为3.7%，因此，将本品总灰分暂拟定为不得超过6.5%；酸不溶性灰分含量试验结果为：最高酸不溶性灰分为1.7%，最低酸不溶性灰分含量为 0.36 %，因此，将本品酸不溶性灰分拟定为不得超过 2.5%；醇溶性浸出物含量试验结果，最高含量为16.9%，最低含量为7.8%，故制定马蹄蕨药材醇溶性浸出物含量时，以乙醇为溶剂，不得少于7.0%。

3 讨论

本研究从性状鉴别、显微鉴别、检查和浸出物等方面对8批马蹄蕨药材进行分析，考察相关指标，建立了马蹄蕨药材质量标准。马蹄蕨性状特征主要有：根状茎马蹄形，一面稍平整，另一面隆起，有皱缩的叶柄残痕，表面粗糙，质坚韧，切面可见棕褐色散列的维管束；而其显微鉴别特征有：根茎横切面基本薄壁组织细胞内含棕色物质和淀粉粒，有限周韧型维管束散在分布，外有略栓化的内皮层。粉末中淀粉粒较多，多为单粒，较大，直径21～86 μm；管胞为梯纹管胞。

本研究还考察了薄层色谱法的耐用性，结果表明，在温度为4℃、30℃，相对湿度为35%、60%时，斑点均清晰，分离度良好，说明薄层色谱法耐用性好。