芊玖舒胶囊提取工艺研究

潘丽丽，安崇惠，李 明，江 帆

(1.贵州工业职业技术学院 化学与材料工程学院，贵州 贵阳 551400；2.贵阳青青生物科技有限公司，贵州 贵阳 550001；3.贵州师范大学 贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室，贵州 贵阳 550001)

芊玖舒胶囊是贵阳青青生物科技有限公司根据《脾胃论》的葛花解酲汤及明朝《普济方》中的“葛花丸”为基础方化裁而成，使用葛根、枳椇子、乌梅等六味药食两用药材，通过现代生物提取纯化和制剂手段研发的一种胶囊剂保健食品，具有抗氧化、滋补肝脏等功效，能改善长期大量饮酒导致的化学性肝损伤。本研究以总黄酮、葛根素含量作为评价指标，采用正交试验法，以加水量、提取时间、提取次数为考察因素，筛选芊玖舒胶囊的水提取工艺，为优化制备工艺提供参数依据，以提升该产品的质量，保障其功效稳定。

1 仪器与试药

RE-2000旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；KQ-500DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；电子天平ALC-210.4(赛多利斯科学仪器北京有限公司)；DK-98-ⅡA电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司)；DFT-200手提式高速万能粉碎机；98-1-B型电子调温电热套(天津市泰斯特仪器有限公司)；LC-20A高效液相色谱仪(日本岛津公司)；Cary-100紫外可见分光光度计(美国瓦里安有限公司)；LC-20A高效液相色谱仪(日本岛津公司)。

葛根素对照品(批号110752-200410，中国药品生物制品检定所)；芦丁(批号100080-200707，中国食品药品检定研究院)；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯；HPLC用水为乐百氏纯净水，其余用水为实验室自制超纯水。

2 方法与结果

2.1 药材吸水率考察

将六味药材都粉碎成粗粉，按处方比例混合均匀。取药材混合物约100 g，精密称定，共三份。分别加水500 mL，充分振摇后，放置24 h，浸泡至透心，滤过，再称取每份药材质量，按式1计算吸水率，结果见表1，可知药材的吸水率约为2倍，故在第一次煎煮时，应多加药材2倍量的水。

(式1)

表1 药材粗粉吸水率考察

2.2 提取工艺条件的筛选

表2 提取因素水平表

以水作为提取溶剂，采用正交设计试验考察提取工艺参数，选择加水量、提取时间、提取次数三个影响因素，每个因素设3个水平，按L9(34)正交表(见表2)安排试验。在工艺研究中，以功效成分总黄酮含量、葛根素含量作为提取工艺筛选的评价依据，并进行综合评分，将总黄酮、葛根素的权重系数分别定为50、50，综合评分Z=(X/Xmax×50+Y/Ymax×50)。利用综合评分值采用SPSS 18.0软件进行统计分析，从而筛选出最佳水提工艺，结果见表3、表4。

总黄酮的测定方法：参照《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》[1]中“保健食品中总黄酮的测定”。葛根素的测定方法：参照《GB/T 22251-2008 保健食品中葛根素的测定》[2]。

表3 正交试验结果

注：综合评分Z=(X/Xmax×50+Y/Ymax×50)。

表4 综合评分值方差分析

注：F0.05(2，2)=19.000；F0.01(2，2)=99.000。

由表3中直观分析结果可知，影响提取效率的主次顺序为：B>A>C，即提取时间>加水量>提取次数，提取时间的影响最大；最佳水提工艺为A1B1C2，即加6倍量水，提取2次，每次1 h。表4方差分析结果则表明，加水量、提取时间、提取次数对提取效果均无显著性影响(P>0.05)。所以结合药材吸水率、工业大生产的实际要求，从节约成本的角度考虑，最终确定较优提取工艺为：葛根、枳椇子、大枣、乌梅、砂仁、甘草拣选，粉碎成粗粉，加8倍量水浸泡1 h后，加热煎煮1 h，滤过，药渣再加6倍量水，煎煮1 h。

2.3 提取工艺验证

为验证上述试验结果的准确性，按已确定的工艺，分别取1个处方量药材，进行三批产品提取工艺验证，结果见表5，可知该提取工艺稳定、合理可行，具有重现性和可操作性。

表5 验证试验结果

3 讨论

现代药理学研究表明，产品配方中葛根富含的葛根素、大豆苷、染料木苷等异黄酮类物质，具有维持心血管稳定、抗氧化、解酒保肝等作用[3]；枳椇子含有山奈酚、洋芹素、二氢杨梅素、槲皮素等多个黄酮类化合物，具有抗肝纤维化、抗脂质过氧化、利尿、降压等作用[4-5]；大枣含有芦丁、槲皮素、当药黄素等黄酮类化合物，具有抗氧化、镇静、舒张血管等作用[6]；甘草分离得到的黄酮类化合物包括甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A/E等，具有抑菌、保肝、抗病毒、抗肿瘤等作用[7]；乌梅含有柠檬素-3-O-鼠李糖苷、山柰酚-3-O-鼠李糖苷、染料木素等多种黄酮类化合物，具有抗肝纤维化、抗菌消炎、抗疲劳等作用[8-10]；砂仁含槲皮苷、异槲皮苷[11]。综合考虑配方中各味药材的有效成分特性、芊玖舒胶囊功效和生产实际，选择总黄酮、葛根素含量作为芊玖舒胶囊提取工艺的考察指标是科学合理的。选用纯水作为提取溶剂，与有机溶剂相比，更加安全、经济、环保，具有吸收快、生物利用度高等优点，可提高产品工艺的质量可控性。但芊玖舒胶囊为复方制剂，成分复杂，其提取效果尚需结合功能学试验和人体试食试验进一步研究。