枸杞沙棘浓浆缓解视疲劳作用研究

2018-09-20李燕君谭梅张凤萍吕晓华

食品研究与开发 2018年19期

李燕君，谭梅，张凤萍，吕晓华，*

（1.四川大学华西公共卫生学院，四川成都610041；2.格尔木云朵枸杞有限责任公司，青海格尔木816099）

视疲劳指以眼部症状为基础，由眼或全身、精神（心理）等因素而引起的一系列疲劳综合征，临床表现为视物模糊、眼干涩、酸胀、流泪等症状[1]。随着各种电子视频产品的推广普及，目前视疲劳在各年龄人群中愈来愈常见。枸杞和沙棘药食兼用的历史悠久，既是食品又是药品。枸杞富含枸杞多糖、黄酮、叶黄素、玉米黄素，沙棘富含维生素A、维生素C、维生素E及黄酮类物质，可望成为开发缓解视疲劳保健食品的优选原料[2-3]。目前，虽已有研究表明枸杞、沙棘对改善视力、缓解视疲劳有较大作用，但该方面的系统研究较少，本文通过人体试饮试验评价枸杞沙棘浓浆的缓解视疲劳作用，为青海地区枸杞和沙棘资源的开发利用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 样品

枸杞沙棘浓浆由格尔木云朵枸杞有限责任公司提供，人体推荐剂量为75 g/d。参照GB 5009.12-2016《食品安全国家标准食品中铅的测定》、GB 5009.11-2014《食品安全国家标准食品中总砷及无机砷的测定》、GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》、GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》、GB 4789.10-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》等相关标准检测样品中铅、砷、菌落总数、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌。

1.2 研究对象

1.2.1 纳入标准

1）年龄在20岁～80岁；2）每天用眼时间超过6 h；3）具有一定的阅读能力，自愿且知情同意参加本研究者；4）能遵从研究方案，试验期间能坚持饮用枸杞沙棘浓浆。

1.2.2 排除标准

1）患有外伤性、感染性眼部疾患，进行眼部手术不足3个月者；2）患有角膜、晶体、玻璃体、眼底病变等内外眼疾患者；3）患有肝、肾、造血、心脑血管等系统疾病者；4）妊娠或哺乳期妇女、对枸杞、沙棘类产品过敏者；5）近期正在服用或服用过与缓解视疲劳功能有关的物品，影响到对结果的判定者；6）长期服用或使用有助于视力改善的药物、保健食品或其他治疗方法，且目前尚未结束者；7）试验期间，不能坚持饮用受试样品，或资料不全影响观察结果者。

1.3 主要仪器和试剂

1.3.1 主要仪器

BC-5380型全自动血液细胞分析仪：迈瑞南京生物技术有限公司；奥林巴斯AU400全自动生化仪：日本奥林巴斯集团；百胜DU 6型彩色超声诊断仪：意大利百胜（深圳）医疗设备有限公司；PhilipsSonos 5500型彩色多普勒超声诊断仪：荷兰皇家飞利浦电子公司；ECG-9620P2三导自动分析心电图仪：上海光电医用电子仪器有限公司；Waters2695型高效液相色谱仪：美国Waters公司。

1.3.2 主要试剂

血细胞分析用稀释液、血细胞分析用溶血剂：迈瑞南京生物技术有限公司；葡萄糖测定试剂盒（生产批号160991）、高密度脂蛋白胆固醇试剂盒：中生北控生物科技（北京）有限公司；总胆固醇试剂盒、甘油三酯试剂盒：北京柏定生物工程有限公司；β-胡萝卜素标准品：Sigma公司。

1.4 研究内容

1.4.1 功效成分检测

参照GB 5009.86-2016《食品安全国家标准食品中抗坏血酸的测定》、GB 5009.83-2016《食品安全国家标准食品中胡萝卜素的测定》、GB 5009.82-2016《食品安全国家标准食品中维生素A、D、E的测定》、NY/T 1676-2008《食用菌中粗多糖含量的测定》、GB/T 20574-2006《蜂胶中总黄酮含量的测定方法分光光度比色法》等相关标准，检测枸杞沙棘浓浆中的维生素C、β-胡萝卜素、α-生育酚、粗多糖、总黄酮、玉米黄素、叶黄素含量。

1.4.2 人体试饮试验

根据纳入标准和排除标准选取试饮志愿者43人，其中男性21人，女性22人，（50.1±29.9）岁。试饮志愿者本人签署知情同意书，按75 g/d饮用枸杞沙棘浓浆，连续60 d。

1.4.2.1 安全性指标

1）血、尿常规检查，体格检查。

2）肝、肾功能检查。

3）胸透或X光片、心电图、腹部B超检查（于试食前检查一次）。

1.4.2.2 功效性指标（于试食开始及结束时检查）

1）视疲劳问卷调查：症状询问、用眼情况。

2）视力检查（近视、远视、散光等）。

3）明视持久度。观察“品”字图，测定时间设为3 min，观察到“品”字的时长即为明视时间。

1.5 功效判定标准

1.5.1 症状改善有效率

眼酸痛、眼胀、畏光、视物模糊、眼干涩、异物感、流泪，全身不适等8种症状中有3种改善，且其他症状无恶化即判定症状改善。

1.5.2 症状平均积分

根据调查问卷计算每位志愿者试饮前后的症状积分。

1.5.3 明视持久度

试饮者自身比较，明视持久度差异有显著性（P＜0.01），且平均明视持久度提高大于等于10%为有效。

1.5.4 视力改善率

以试饮后较试饮前提高两行为改善，并以此为参考指标。参考指标不作为对缓解视疲劳功能是否有效的判定标准。

1.5.5 结果判定

试饮者自身比较，症状改善且症状总积分差异有显著性（P＜0.01），及明视持久度差异有显著性（P＜0.01），且平均明视持久度提高≥10%，可判定该受试物具有缓解视疲劳功能。

1.6 统计分析

试验数据采用PEMS for Windows 3.1统计软件进行分析，以表示。试验采用自身前后对照的配对设计，各指标进行配对t检验，检验水准α=0.01。

2 结果与分析

2.1 枸杞沙棘浓浆的理化和微生物指标

枸杞沙棘浓浆的食品安全性指标见表1。

表1 枸杞沙棘浓浆的食品安全性指标Table 1 Food safety index of goji berry and sea buckthorn concentration

如表1所示，枸杞沙棘浓浆样品铅、砷、菌落总数、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌等理化和微生物指标均在限量标准范围内。

2.2 枸杞沙棘浓浆的功效成分含量

枸杞沙棘浓浆的功效成分含量见表2。

表2 枸杞沙棘浓浆的功效成分含量Table 2 Functional component content of goji berry and sea buckthorn concentration

如表2所示，枸杞沙棘浓浆样品中维生素C、β-胡萝卜素、α-生育酚、粗多糖、总黄酮、玉米黄素和叶黄素等成分含量较高。

2.3 枸杞沙棘浓浆对志愿者视疲劳症状的影响

枸杞沙棘浓浆对志愿者视疲劳症状和视疲劳症状积分的影响见表3和表4。

表3 枸杞沙棘浓浆对志愿者视疲劳症状的影响Table 3 Effects of goji berry and sea buckthorn concentration on visual fatigue symptoms of volunteers

表4 枸杞沙棘浓浆对志愿者视疲劳症状积分的影响（n=43）（±s）Table 4 Effects of goji berry and sea buckthorn concentration on visual fatigue symptom score of volunteers（n=43）（±s）

注：*表示与试饮前比较，P＜0.01，差异显著。

症状试饮前积分试饮后积分眼胀 1.47±0.91 0.79±0.77*眼酸痛 1.28±0.88 0.46±0.70*畏光 1.21±0.94 0.63±0.69*视物模糊 1.72±0.80 0.93±0.63*眼干涩 1.63±0.93 1.00±0.87*异物感 0.95±0.75 0.47±0.59*流泪 1.23±0.92 0.53±0.59*全身症状 0.30±0.60 0.09±0.29*总分 9.79±3.98 4.91±3.08*

如表3和表4所示，试饮受枸杞沙棘浓浆60天后，试饮志愿者眼酸痛、眼胀、畏光、视物模糊、眼干涩、异物感、流泪，全身不适等8种症状均有所改善，症状改善有效率为76.7%。症状积分显著下降（P＜0.01）。

2.4 枸杞沙棘浓浆对志愿者明视持久度和视力的影响

枸杞沙棘浓浆对明视持久度和视力的影响见表5。

表5 枸杞沙棘浓浆对明视持久度和视力的影响（n=43）（±s）Table 5 Effects of goji berry and sea buckthorn concentration on visuognosis persistence and vision（n=43）（±s）

注：*表示与试饮前比较，P＜0.01，差异显著。

项目明视时间/s 明视持久度/% 左眼视力右眼视力试饮前 118.79±19.96 65.99±11.09 4.00±0.27 3.97±0.23试饮后 137.05±16.89* 76.14±9.38* 3.98±0.29 3.95±0.28提高值 16.26 10.15

如表5所示，试饮枸杞沙棘浓浆60天后，试饮志愿者明视时间延长（P＜0.01），明视持久度显著提高（P＜0.01），平均明视持久度提高10.15%。双眼视力无明显变化。

2.5 枸杞沙棘浓浆对志愿者血液安全性指标的影响

枸杞沙棘浓浆对志愿者血液安全性指标的影响见表6。

表6 枸杞沙棘浓浆对志愿者血液安全性指标的影响（n=43）（±s）Table 6 Effects of goji berry and sea buckthorn concentration on the blood safety indexes of volunteers（n=43）（±s）

项目试饮前试饮后红细胞/（×1012/L）4.56±0.394.66±0.42白细胞/（×109/L）6.17±1.526.00±1.06血红蛋白/（g/L）135.48±12.91136.12±10.33血清总蛋白/（g/L）74.58±4.0672.96±3.99血清白蛋白/（g/L）46.17±2.2646.26±3.35谷丙转氨酶/（U/L）20.38±2.6420.00±1.99谷草转氨酶/（U/L）21.77±7.7520.99±6.28尿素氮/（mmol/L）4.59±1.184.50±1.00肌酐/（μmol/L）74.80±17.8270.95±16.90血尿酸/（μmol/L）316.69±95.51299.54±100.64血清胆固醇/（mmol/L）4.51±0.834.47±0.56血清甘油三酯/（mmol/L）1.23±0.701.32±0.89血糖/（mmol/L）5.03±0.485.09±0.33

如表6所示，试饮前、后志愿者的血液安全性指标均在正常范围内，且前后无显著性差异。

3 讨论

本研究采用自身对照设计，试饮志愿者按75 g/d饮用枸杞沙棘浓浆，连续60 d。结果表明：试验结束时，试饮者视疲劳症状改善且症状总积分显著下降，明视持久度相比试饮前显著提高，且平均明视持久度提高10.15%。依据国家食品药品监督管理局国食药监保化[2012]107号“关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法的通知”，结果提示枸杞沙棘浓浆具有缓解视疲劳作用。

研究证明，多种营养素对缓解和改善视疲劳有较大作用[4]。本研究采用的枸杞沙棘浓浆含β-胡萝卜素、维生素C、维生素E、叶黄素、玉米黄素等营养成分，对维持眼睛健康、缓解视疲劳具有重要作用。β-胡萝卜素是维生素A原活性最高的一种类胡萝卜素，可在小肠上皮细胞内吸收分解，转化为满足机体需要的维生素A[5]。维生素A对维持正常的视觉功能具有重要作用，其机制是：参与感光物质视紫红质的合成，增强对弱光的感知；维持角膜上皮细胞的形态、正常增殖和分化；增加角膜相关黏蛋白的表达，保持上皮表面湿润，防止干涩[6-7]。在外界环境刺激下，眼部前段组织易受到氧化应激的影响，维生素C作为眼内重要抗氧化剂，不仅能吸收紫外光线，保护组织免受光氧化损伤，还可促进角膜胶原蛋白的生成，防止眼部组织损伤[8]。维生素E存在于感官细胞和视网膜上皮细胞中，通过其抗氧化作用，能避免晶状体发生过氧化反应[9]。叶黄素和玉米黄质是重要的类胡萝卜素，除了玻璃体、角膜和巩膜外，几乎存在于眼部所有组织中，尤其视网膜黄斑中的浓度最高。从饮食中摄取的叶黄素能选择性地集中在视觉系统，是神经视网膜和晶状体中独有的类胡萝卜素。研究表明，黄斑类胡萝卜素能吸收40%到90%的蓝光（取决于浓度），保护视网膜免受光化学损伤，降低氧化损伤，还可防止氧化诱导的细胞因子增加和上调炎症相关基因的表达，预防多种眼部疾病的致病性炎症，对眼睛起到重要的保护作用[11-12]。

枸杞沙棘浓浆是以新鲜枸杞、沙棘为原料加工、浓缩而成的一种口服液体保健食品，小袋独立包装，人体吸收快，携带、服用方便，既可冲水、也可直接饮用。枸杞沙棘浓浆营养丰富，且化学性质稳定，其主要原因是各种功效成分相互之间存在保护作用。维生素C和维生素E作为抗氧化剂，不仅能相互维持稳定性，还能有效保护β-胡萝卜素和叶黄素免受氧化分解，对其起到保护作用[13-14]。此外，沙棘自身有机酸含量较高，加工得到的枸杞沙棘浓浆呈酸性，有利于维生素C、维生素E和黄酮类化合物在溶剂中维持较高的稳定性[15-17]。枸杞沙棘浓浆不含添加糖，保持枸杞、沙棘的天然营养成分，不影响维生素、矿物质等营养素的摄入，有助于维持各种功效成分的稳定性[18]。枸杞沙棘浓浆营养丰富、口感酸甜且饮用方便，易被消费者接受。

因其独特的自然资源和地理优势，青海地区枸杞和沙棘资源丰富，果实个体大、肉质饱满，果品品质、营养成分及生物活性物质的含量远高于其他地区[19-22]。青海地区高品质的资源优势为开发缓解视疲劳保健食品提供了有利条件。