板蓝根口服液制备及其质量标准研究

强永在

（内蒙古医科大学附属医院药剂部 内蒙古 呼和浩特 010050）

板蓝根口服液由板蓝根单味药组成，具有清热解毒、凉血功效。临床上常用于治疗流感、扁桃体炎、腮腺炎等。文献有用HPLC法测定靛蓝、靛玉红的报道[1-2]，但靛蓝、靛玉红为脂溶性成分，而本制剂采用水提醇沉工艺，难于客观表征其内在质量，腺苷是板蓝根所含的一种天然成分，具有抗凝血、扩张冠状动脉、松弛支气管平滑肌、镇静中枢神经和抗心率不齐的作用[3]。腺苷性质比较稳定，具水溶性。因此，参照有关文献[4-5]，试采用高效液相色谱法测定板蓝根口服液中腺苷的含量，结果准确，操作方便，可用于该制剂的质量控制。现将实验开展情况及结果作一介绍。

1.仪器与试药

岛津SCL-10Avp 高效液相色谱仪；甲醇（色谱纯，天津市康科德科技有限公司）；其他试剂均为分析纯；水为蒸馏水；腺苷对照品（批号为110879-200202，含量测定）由中国药品生物制品检定所提供；板蓝根对照药材（产地：河北，批号：140311）。

2.板蓝根口服液的制备

将板蓝根饮片500g，加8～10倍量水，煎煮2次，第一次2h，第二次1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.1，放冷至室温，加入乙醇至含醇量为60%，静置12h，取上清液过滤，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05～1.10的清膏，加甜菊素0.4g，搅匀，加水调整总量至1000ml，过滤，灌装（10mL/支），灭菌，罐装，即得。按此工艺制备3批板蓝根口服液。

3.质量标准研究

3.1 定性分析

3.1.1 供试液的制备 板蓝根口服液成品液，作为供试液。

3.1.2 对照药材液的制备 取板蓝根对照药材5g，加水50ml，煎煮1h，滤过，滤液加乙醇使含乙醇量为60%，静置。取上清液，回收乙醇，浓缩至10ml，作为对照药材溶液。

3.1.3 薄层鉴别 按照薄层色谱法（中国药典2015年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取供试品溶液2～6μL，对照药材溶液2～4μL，分别点于同一含0.5%羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-醋酸-水（4:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷2%茚三酮乙醇溶液，于105℃烘约数分钟。结果供试品与对照药材色谱在相应的位置上显相同颜色的斑点。

3.2 相对密度及pH测定

相对密度按相对密度法（中国药典2015年版一部附录Ⅶ A比重瓶法）测定，每批口服液平行测定3次，记录结果。pH测定使用酸度计对口服液进行pH 测定， 每批口服液平行测定3次，结果见表1。

表1 3批板蓝根口服液的相对密度和pH值

3.3 定量分析

3.3.1 色谱条件

色谱柱：DiamonsidT M C18柱（5μm，4.6mm×200mm）；流动相：硫酸盐缓冲液（pH6.5）{取0.01mol/L硫酸二氢钠68.5ml与0.01mol/L硫酸氢二钠31.5ml混合}—甲醇（17:3）；流速：1mL/min-1；检测波长：260 nm；柱温：30℃；进样量：20μL。理论塔板数按腺苷峰计算应不低于4000。

3.3.2 对照品溶液的制备 精密称取腺苷对照品适量，加50%甲醇制成每1ml含50μg的溶液，取上述溶液适量加流动相制成每1ml含20μg的溶液，摇匀，即得。

3.3.3 供试品溶液的制备 精密吸取本品1ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.3.4 标准曲线的绘制 精密称取腺苷对照品10.6mg，置50mL量瓶中，加50%甲醇适量，超声溶解并稀释至刻度，遥匀，分别精密吸取1、2、3、4、6、8mL，置50mL量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，得腺苷对照品系列标准浓度的溶液，按上述色谱条件，分别进样20μL，测定峰面积，以峰面积积分值（y）为纵坐标、腺苷量（x）为横坐标绘制标准曲线，计算，得回归方程。结果表明腺苷溶液在4.14～33.12μg/mL之间有良好的线性关系。回归方程：Y=915006X-326170，R2=0.9991。

3.3.5 精密度试验 精密吸取腺苷对照品溶液20μL在同一实验条件下，重复进样5次，RSD值为0.47%（n=5）。结果表明本方法精密度好。

3.3.6 重复性试验 取同一批号样品，精密称取6份，按3.3.3项制备方法制备，按3.3.1项的色谱条件测定，结果：腺苷的峰面积的RSD为1.82%（n=6）。说明本方法重现性良好。

3.3.7 稳定性试验 取同一批号供试样品5份，按上述（3.3.3供试品溶液的制备方法），在常温下制备成供试液，在常温下放置12h，每间隔2h测定1次，连续共测定6次，RSD为1.5%， 结果表明样品溶液中的腺苷，在12h内稳定性良好。

3.3.8 回收率试验 取已知含量的板蓝根口服液共6份，分别精密加入一定量的腺苷对照品，混匀，按（3.3.3样品溶液的制备）项下制备方法，在腺苷的线性范围内分别制成低、中、高3种不同浓度的溶液。（每一种浓度2份）分别进样，测定腺苷的回收率，其结果见表2。

表2 加样回收率实验结果

3.3.9 样品含量测定

取3批板蓝根口服液，按供试品溶液制备方法制备，测定腺苷含量，结果见表3。

表3 3批样品含量测定结果

4.讨论

目前，板蓝根及其制剂的质量控制多以靛蓝、靛玉红的含量测定为指标，而靛蓝、靛玉红是脂溶性成分，不能被现行水提醇沉工艺提取出来，从而影响板蓝根口服液的临床疗效。故我们选择了含量较高、化学稳定性较好的腺苷作为板蓝根口服液的含量测定指标。

本文建立了板蓝根口服液中腺苷的定量分析方法，方法操作简单，重复性好，准确性高。为板蓝根口服液的质量控制提供了一个准确而可靠的方法。