日粮中添加稻壳粉对雏火鸡免疫性能、血清生化和激素指标及肠道组织结构的影响
2018-09-12杨海明王志跃鞠耿越廖正军
代 航, 鲁 曼,杨海明,2*, 王志跃,2,郁 钧,鞠耿越,廖正军
(1.扬州大学动物科学与技术学院,江苏扬州 225009;2.教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室,江苏扬州 225009;3.建湖县天和生态农业专业合作社,江苏建湖 224752)
火鸡原产于美洲,是一种肉用高档野味珍禽,具有食草性、节粮型等特点。在欧美国家很受欢迎,早已经进行规模化饲养(郭爱英等,2011)。我国于近年来才引进的火鸡,虽然饲养量不大,但因火鸡较耐粗饲,抗病力强,容易饲养,屠宰率比肉鸡高5%以上,肉中的蛋白质含量较其他禽类高20%,并且脂肪含量较其他禽类低21%,胆固醇含量低,是较为理想的滋补佳品,因此发展前景十分可观(罗治华,2009;何大参,1982)。
稻壳是一种价格低廉、产量丰富的农副产品,其中的化学成分主要是粗纤维、木质素、多聚戊糖等(AB等,1996),由于这些成分能占据稻壳的80%以上,所以稻壳的营养价值极低,一般常作为饲料的填充剂或稀释剂,在饲料中起到非营养性的作用(夏圣荣等,2016)。稻壳作为一种廉价的粗纤维饲料来源,其对火鸡血清生化和免疫的影响还鲜见报道。因此,本试验旨在研究雏火鸡饲粮中添加稻壳粉对雏火鸡血清生化指标、免疫性能、激素水平及肠道结构的影响,以期为后续研究提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验设计 试验采用单因子试验设计,选取体重接近的健康1日龄贝蒂娜雏火鸡100只,随机分成2组,每组5个重复,每个重复10只,公母各半。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂添加稻壳粉的日粮。试验期为8周,试验日粮根据美国NRC(1994)火鸡营养需要配制的玉米-豆粕型日粮,对照组和试验组日粮的组成以及营养水平见表1,配制成等能量、等蛋白的日粮。
表1 对照组和试验组日粮组成以及营养水平(风干基础)
1.2 饲养管理 育雏室前,严格按照卫生标准对育雏室和育雏笼进行打扫和消毒。在育雏笼进行育雏,育雏室最初温度保持在32~35℃,湿度保持在65%~70%。以后每周温度降低3℃,保持温度在20℃左右。5日龄前给予24 h光照,方便雏火鸡采食和饮水,7日龄减少为20 h,以后逐渐减少到14 h。光照强度在前5天内因雏火鸡的视力差,使用50 W白炽灯,4~14日龄减为25 W,以后可减到10 W。采用自由采食、自由饮水的方式饲养,每天记录采食量。免疫和饲养管理均按照雏火鸡的饲养管理的程序进行。
1.3 测定指标
1.3.1 血清生化指标 56日龄早晨称重,从各重复中随机选取2只与平均体重最为接近的雏鸡,翅静脉采血5 mL,缓缓注入促凝试管中,倾斜试管,静置 30 min后,3000 r/min离心 10 min,用移液枪吸取血清并将其注入血清管中,测定血清中碱性磷酸酶、总胆固醇、甘油三酯、钙、磷、总蛋白、球蛋白、白蛋白的含量。
1.3.2 免疫器官 将采血后的火鸡宰杀、放血、解剖后,取雏鸡脾脏、胸腺和法氏囊称重,根据脾脏、胸腺和法氏囊的重量与相应雏火鸡活体重量的比值计算脾脏指数、胸腺指数和法氏囊指数。
免疫器官指数=免疫器官重(mg)/活重(g)。
1.3.3 激素指标 将离心好的血清分装入1mL离心管中,-20℃保存,用于测定胰岛素(Ins)、生长激素(GH)、类胰岛素生长因子(IGF-I)。Ins、GH和IGF-I的浓度采用放射免疫分析法测定,试剂盒由北方生物技术研究所提供。
1.3.4 肠道结构 分离十二指肠、空肠和回肠,挤出肠道内容物,用生理盐水轻轻冲洗内容物。取十二指肠、空肠、回肠的组织样本,通过甲醛固定,酒精脱水和二甲苯透明,再通过浸蜡和包埋等处理,用Leica切片机切片(5 μm),后经苏木精-伊红染色,最后用中性树胶封片。
采用Image-prolus图像分析系统测量十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度、绒毛宽度、隐窝深度、肌层厚度,并计算绒毛高度/隐窝深度的比值(V/C)。
1.4 数据分析 试验数据以“平均值±标准差”的形式表示,以P<0.05作为差异显著性判断标准,数据应用SPSS 19.0统计软件进行独立样本t检验分析。
2 结果
2.1 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡血清生化指标的影响 由表2可知,在雏火鸡日粮中添加稻壳粉,试验组与对照组相比,试验组血清中碱性磷酸酶、钙和磷的含量分别降低4.09%、1.74%和3.26%(P>0.05),试验组血清中总胆固醇和甘油三酯含量分别增加2.25%和2.27%(P>0.05)。
表2 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡血清生化指标的影响
2.2 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡血清免疫指标的影响 由表3可知,在雏火鸡日粮中添加稻壳粉,试验组与对照组相比,试验组血清中总蛋白、白蛋白和球蛋白含量分别降低1.68%、1.37%和1.42%(P > 0.05)。
表3 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡血清免疫指标的影响
2.3 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡免疫器官的影响 由表4可知,在雏火鸡日粮中添加稻壳粉,试验组与对照组相比,试验组脾脏重、胸腺重和法氏囊重分别增加 36.08%、28.48%和 25.17%(P<0.05),试验组脾脏指数和法氏囊指数分别提高4.46%和4.97%(P>0.05),试验组胸腺指数降低1.32%(P > 0.05)。
表4 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡免疫器官的影响
2.4 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡激素水平的影响 由表5可知,在雏火鸡日粮中添加稻壳粉,试验组与对照组相比,试验组血清胰岛素和生长激素水平分别增加3.78%(P>0.05)和11.97%(P=0.067),试验组血清胰岛素样生长因子水平降低0.78%(P > 0.05)。
表5 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡激素水平的影响
2.5 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡肠道结构的影响 由表6可知,在雏火鸡日粮中添加稻壳粉,试验组与对照组相比,试验组十二指肠的绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度的比值(V/C)和肌层厚度分别增加23.34%、44.54%和 33.26%(P<0.05),隐窝深度减少15.66%(P<0.05),绒毛宽度增加31.54%(P=0.053)。试验组和对照组相比,试验组空肠的绒毛高度和肌层厚度分别增加26.07%和23.43%(P < 0.05),绒毛宽度增加 5.77%(P > 0.05),隐窝深度减少15.41%(P<0.05),V/C增加41.10%(P<0.01)。试验组和对照组相比,试验组回肠的绒毛高度和隐窝深度分别减少 2.17%和11.69%(P>0.05),绒毛宽度和V/C分别增加10.03%和11.07%(P > 0.05),肌层厚度增加12.04%(P < 0.05)。
表6 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡肠道结构的影响
3 讨论
3.1 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡血清生化指标的影响 碱性磷酸酶在机体代谢中起着关键的作用,其活性的高低会影响体内胆固醇、甘油三酯和游离脂肪酸的含量,还可催化焦磷酸分解,促进骨盐的沉积(刘涛等,2011)。 周世霞(2006)研究发现,不同纤维水平日粮对鹅血清中的碱性磷酸酶没有显著影响。曹向阳(2010)在粗纤维对固始鸡的研究上也证明了这一点。本试验中对照组和试验组血清中碱性磷酸酶的含量没有显著的差异,与上述研究结果一致。
血清中总胆固醇和甘油三酯是反映动物机体脂类代谢是否正常的重要指标。高文俊(2003)在提高鸡日粮中粗纤维水平的研究中发现,试验组机体血清中胆固醇和甘油三脂的含量与对照组相比显著降低,这与周世霞(2006)的研究一致,说明粗纤维有降低血脂的作用。而本试验研究发现,试验组血清中的胆固醇和甘油三酯含量没有显著降低,这一结果还有待研究。
饲粮中的纤维物质会影响矿物质及微量元素的吸收(彭艺等,2000)。 曹向阳(2010)研究发现,随着日粮中粗纤维的水平增高,鸡血清中钙和磷的含量逐渐降低。本试验也得到相同的结果,虽然没有达到显著水平,但是试验组雏火鸡血清中的钙、磷含量有所降低,原因可能是日粮中的粗纤维含量还没达到显著影响矿物质吸收的水平。
3.2 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡血清免疫指标的影响 血清中的总蛋白是由肝脏合成,其可参
与机体蛋白质的代谢,白蛋白是参与机体免疫机能的血清蛋白,球蛋白则可反映机体抵抗力的强弱。朱晓春等(2014)研究发现,不同纤维源对扬州鹅蛋白质代谢无显著影响。张玲等(2015)研究发现,高纤维水平日粮的仔鹅血清中总蛋白、白蛋白和球蛋白的含量有下降的趋势。本试验研究发现,试验组雏火鸡血清中总蛋白和白蛋白的含量有所下降,与对照组差异不显著。说明粗纤维对雏火鸡蛋白质的代谢有一定的影响,而没达到显著水平,说明雏火鸡对粗纤维有较强的耐受能力。
3.3 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡免疫器官的影响 脾脏、胸腺和法氏囊是禽类重要的免疫器官,其可参与机体的体液免疫和细胞免疫。免疫机能的强弱和免疫器官重量大小呈正相关 (黄冠庆,2003)。张权等(2010)研究表明,肉鸡日粮中添加竹源纤维提取物可以调节鸡的免疫器官发育。王晔和于辉(2015)研究表明,日粮一定的粗纤维水平对鹅的免疫器官发育有促进作用,免疫器官指数呈先上升后降低的趋势,且差异不显著。本试验研究发现,在雏火鸡日粮中添加稻壳粉使雏火鸡的脾脏、胸腺和法氏囊重量显著增加,而对雏火鸡的免疫器官指数没有显著的影响,原因是粗纤维的添加不仅促进免疫器官的发育,同时也促进了雏火鸡体重的增加。
3.4 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡激素指标的影响 胰岛素(Ins)能促进糖元、脂肪和蛋白质的合成代谢,生长激素(GH)和类胰岛素生长因子(IGFI)主要是调控动物的生长。刘长忠等(2008)研究发现,随着日粮纤维水平的增加,鹅血清中Ins、GH、IGF-I的浓度呈现先升高后降低的趋势,Ins各处理组之间差异不显著,GH和IGF-I的浓度以5%和7%的粗纤维水平为最高。本试验研究发现,在雏火鸡日粮中添加稻壳粉对雏火鸡血清中Ins、GH和IGF-I的浓度无显著的影响,但试验组GH的浓度有增加的趋势,与上述研究基本一致。
3.5 日粮中添加稻壳粉对雏火鸡肠道结构的影响 小肠是动物机体消化吸收营养物质的主要场所,其正常的结构和功能是营养物质被充分利用的重要保证。日粮中添加一定量的粗纤维有助于家禽维持消化道的正常生理结构和功能。谢燕娟等(2016)研究表明,在鹅日粮中添加稻壳粉可显著提高十二指肠和空肠的绒毛高度,降低空肠的隐窝深度,增加回肠的肌层厚度。Jankowski等(2013)在火鸡日粮中添加2种不同类型小麦,研究结果发现全谷物小麦组显著降低了十二指肠隐窝深度,增加了肌层厚度。李青竹等(2014)研究不同纤维源对吉林白鹅肠道形态学发育的影响,试验结果表明不同的纤维源均可增加小肠不同肠段绒毛高度/隐窝深度的比值,小肠各段消化与吸收营养物质的能力不断增强。本试验研究发现,在雏火鸡日粮中添加稻壳粉能显著增加十二指肠和空肠的绒毛高度、V/C和肌层厚度,降低隐窝深度,增加回肠的肌层厚度,这说明火鸡的食草性使其对粗纤维有一定的耐受性。日粮中添加粗纤维可以促进雏火鸡小肠绒毛的生长,刺激胃肠道的蠕动,增加肠道肌层厚度,从而增强消化吸收能力。
4 结论
在雏火鸡日粮中添加稻壳粉,对雏火鸡的血清生化指标没有显著的影响,能促进免疫器官的生长发育,提高免疫性能、血清中胰岛素和生长激素水平,显著改善小肠肠道结构,增强消化吸收能力,促进雏火鸡的生长发育。