塞曼背景校正法测定全血中的铅

赵军峰 李晓晖

(郑州市职业病防治院，河南 郑州 450053)

铅(Pb)是多系统、多亲和性的重金属元素，具有蓄积性，达到一定浓度，还会对人身体造成不可修复的伤害。血铅常作为人体铅暴露水平的重要指标[1]。测定全血中的铅通常采用石墨炉原子吸收法[2]，但由于血液基体成分复杂，产生严重的基体干扰，常用的基体改进剂有磷酸二氢铵、氯化钯、硝酸钯、硝酸镁、曲拉通X-100、抗坏血酸等[3-6]。本实验参照WS/T174-1999血铅的酸脱蛋白-石墨炉原子吸收光谱法，用1%硝酸和0.1%TritonX-100为血样稀释液，设置石墨炉分三步干燥两步灰化程序升温，采用塞曼背景校正横向加热平台石墨炉，有效地消除了石墨炉原子吸收法直接测定全血铅时的基体干扰。对血铅成分标准物质进行测定分析，结果满意。样品的回收率为95.8%～105.0%，相对标准偏差RSD=3.31%。

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂

1.1.1仪器 ZEEnit700原子吸收仪，铅空心吸收灯，平台石墨管，肝素钠真空采血管。

1.1.2试剂 硝酸(优级纯)，TritonX-100，小牛全血，1%硝酸-0.1%TritonX-100为血液稀释剂。血铅标溶液： 取中国计量科学院化学所的GBW(E)080129(100 μg/ml)铅标准溶液，用1%硝酸稀释至10.0 μg/ml，取1.00 ml 10.0 μg/ml的铅标准应用液置于100.00 ml的容量瓶中，用1%硝酸-0.1%TritonX-100混合液定容至刻度，即为100.0 μg/L的铅标准应用液。

1.2 仪器工作条件

仪器参数与升温程序见表1。

表1 仪器参数与升温程序

1.3 样品采集与保存

对采集静脉血的皮肤处依次用0.2% 硝酸、纯水、1%碘伏、75%医用酒精擦洗，用同一批次的肝素钠真空采血管采集静脉血2 ml，轻摇均匀，置于4℃ 冰箱保存，尽快测定。取2 ml 1% 硝酸置于同一批次的肝素钠真空采血管内作为采血空白样。

1.4 标准曲线制作

取6支5.00 ml容量瓶，分别加入0.00、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50 ml的100 μg/L的铅标准应用液，依次加入0.50 ml新鲜的小牛全血和0.50 ml的1%硝酸，用1%硝酸-0.1%TritonX-100混合液定容至刻度，摇匀备用。

1.5 样品测定

取0.50 ml血样于5.00 ml容量瓶中，加入0.50 ml 1%硝酸，用1%硝酸-0.1%TritonX-100混合液定容至刻度，摇匀，取样进行自动分析。

2 结 果

2.1 试剂空白本底检测

对本实验用到的1%硝酸和0.1%TritonX-100进行空白检测数据见表2，结果显示本实验用到的试剂符合血铅检测要求。

2.2 标准曲线

以峰面积值对血铅浓度做吸光度标准曲线，回归方程：y=2.549×10-3X+0.008109，相关系数r=0.9991。

2.3 检测限

连续5天对空白样本进行10次测量，计算得3倍标准差得到方法的检出限为0.4 μg/L，符合血铅测定方法的检测限不得大于6 μg/L的技术要求。

2.4 准确度试验

表3为两种不同浓度的血铅成分标准物质的测定结果。

表3 血铅成分标准物质测定结果(μg/L)

2.5 重复性试验

分别对高中低三种浓度的血样进行重复性试验，结果见表4。

表4 三种浓度血样重复性试验结果((n=6，μg/L)

3 讨 论

石墨炉原子吸收光谱法测定全血中的铅，大多采用加入基体改进剂来消除血样成分复杂带来的干扰。经过反复实验发现TritonX-100浓度增大背景吸收较高，浓度降低样品稳定时间较短，本研究采用1%硝酸-0.1%TritonX-100稀释血样获得较满意效果。

鉴于血样成分复杂，本研究降低升温速率，分别在70℃、90℃、110℃时干燥，避免样品干燥时飞溅。本研究通过测绘吸光度随灰化温度的变化曲线确定了最佳灰化温度，分别在350℃、500℃两步灰化，比较完全地清除了血样基体带进的干扰物。

通过实验，室温保持在26℃以下，血样经处理后能稳定2 h，室温超过26℃，处理后的样品不稳定。

本研究用1%硝酸-0.1%TritonX-100混合液稀释全血样品。采用横向加热技术，分三步低升温速率升温干燥，两步灰化，灰化比较完全，无残渣残留，通过塞曼背景校正，扣除背景干扰，提高了检测的准确度和精密度。根据文献[3-6]报道，我们分别用氯化钯、硝酸钯、抗坏血酸、磷酸氢二铵等作基体改进剂，发现与不加基体改进剂相比铅的吸收峰的峰形和面积变化不大，在测定过程中尽量少加试剂，因此采用不加基体改进剂，直接进样测定。