冠心病患者ADMA、eNOS和NO水平变化及与Gensini评分的相关性

沈云峰 张洪波 郭浩浩 刘 波

冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)是危害人类健康的常见疾病，主要危险因素有年龄、性别、吸烟、高血压、高血脂、糖尿病等。冠心病发生的最基本的病理过程是冠状动脉粥样硬化，病变的始动环节是血管内皮功能障碍。已有的研究[1-4]表明：不对称性二甲基精氨酸(Asymmetric Dimethylarginine，ADMA)作为一种内源性竞争性一氧化氮合酶(Nitric Oxide Syntheses，NOS)抑制剂，可以通过减少内皮型NOS(eNOS)的合成，明显抑制一氧化氮(Nitric Oxide，NO)的合成，诱发氧自由基生成，促进炎症反应，从而引发血管内皮功能障碍，导致心血管疾病的发生发展。ADMA是心血管疾病的重要标志物之一，可能成为心血管疾病风险因素与血管内皮功能障碍之间的桥梁。本文检测不同程度冠脉病变冠心病患者血清ADMA、eNOS及NO水平变化及其与冠状动脉Gensini评分的相关性，进一步丰富冠心病辅助诊断和防治监测的实验室资料。

1 资料与方法

1.1病例和分组

2015-07—2017-12在本院心血管科住院治疗患者共206例。依据冠状动脉造影结果分为对照组(未见冠脉狭窄或狭窄≤50%，n=84)和冠心病组，包括单支病变组(只有一支冠脉狭窄>50%，n=44)、双支病变组(有两支冠脉狭窄>50%，n=43)和多支病变组(多于两支冠脉狭窄>50%，n=35)。排除肝肾功能不全、瓣膜性心脏病、既往有冠状动脉介入治疗或冠状动脉旁路移植术病史、心肌梗死病史、左室功能不全、感染性疾病者。各组性别、年龄、体重指数(BMI)、吸烟史、高血压史和糖尿病史等的分布差异均无统计学差异(P>0.05)，见表1。

表1 各组一般资料比较

1.2血液指标检测方法

1.2.1标本收集：患者冠脉造影前，用真空采血管采集病人空腹12h静脉血，混匀静置15min后，3 400g 离心分离取血清，分存在EP管中，-25℃冻存待测。

1.2.2检测方法：ADMA和eNOS均采用ELISA测定，ADMA试剂盒由武汉新启迪生物科技有限公司提供(批号：20170925)，eNOS检测试剂盒由上海超研生物科技有限公司提供(批号：20171009)，检测仪器为上海科华公司的ST360酶标仪。NO采用硝酸还原酶法，试剂盒由南京聚力生物医学工程研究所提供(批号：20170910)，仪器为日本奥林巴斯公司的AU400自动生化分析仪。严格按照仪器和试剂说明书操作。

1.3冠脉造影及Gensini积分：应用荷兰飞利浦公司生产的飞利浦数字平板心血管造影系统,以标准Judkins法行冠脉造影术诊断冠心病。冠脉造影及病变程度判断按ACC/AHA造影指南[5]，选取左前斜、右前斜、头脚轴状位，对左右冠脉造影，用直径法分别对右冠脉、左主干、左前降支和回旋支血管进行测量，至少1支血管狭窄>50%诊断为冠心病；并用Gensini积分对每支冠脉血管狭窄程度进行定量评定，狭窄≤25%为1分，26%-49%为2分，50%-75%为4分，76%-90%为8分，91%-99%为16分，100%为32分；若1支血管多处狭窄，则以最狭窄处计分，每例患者冠脉病变积分为各支血管积分之和。

1.4统计学处理

2 结果

2.1各组患者血清ADMA、eNOS、NO水平和Gensini积分比较

各组间ADMA、eNOS、NO水平及Gensini积分差异均有统计学意义(P<0.01)。与对照组比较，单支、双支、多支病变组ADMA水平均显著升高(t值分别为5.65、11.62、21.52，均P<0.01)，且多支病变组>双支病变组>单支病变组，eNOS水平显著降低(t值分别为4.56、-14.58、-31.59，均P<0.01，NO水平亦明显降低(t值分别为4.21、-10.32、-17.65，均P<0.01)，且均呈多支病变组<双支病变组<单支病变组；Gensini积分显著升高(t值分别为20.34、32.65、43.51，均P<0.01)，且多支病变组>双支病变组>单支病变组。具体结果见表2。

表2 各组血液指标水平和Gensini积分比较

注：与对照组比较，1)P< 0.01；与单支病变组比较,2)P< 0.01；与双支病变组比较,3)P<0.01

2.2血清ADMA、eNOS和NO水平与冠状动脉Gensini积分的相关性

Pearson分析表明，随着冠心病患者病变冠脉支数的增加，其血清ADMA水平与Gensini积分同时增加，两者呈显著正相关(r=0.526,P<0.05)，而eNOS、NO水平则明显降低，与Gensini积分呈显著负相关(r分别为 -0.435和-0.356, 均P<0.05)。

3 讨论

NO 是一种自由基，由NOS催化精氨酸生成，是血管内皮细胞合成的一种重要内源性舒张因子，有减少氧自由基产生和低密度脂蛋白氧化等作用，能拮抗动脉硬化，修复病变血管，是内源性抗动脉粥样硬化的重要因子，其生成或生物利用度降低会导致内皮功能障碍并促进动脉粥样硬化[6]。作为NO合成的唯一限速酶[7]，其水平变化直接关乎NO浓度。ADMA是一种胍类物质，人体内大多数由含精氨酸残基的蛋白质经甲基化修饰和水解生成，由二甲基精氨酸二甲氨水解酶分解代谢。炎症、氧化应激等病理状态时，可以抑制该酶活性，致ADMA在人体内蓄积。由于ADMA是eNOS的内源性抑制剂，可与精氨酸竞争性结合NOS活性部位，对NOS产生竞争性抑制作用，使NO/NOS通路障碍，NO合成减少[8，9]。

随着ADMA的蓄积增多，eNOS竞争性减少，造成内皮细胞合成NO减少和血管顺应性降低，阻力增加，血流速度受限，从而有利于单核细胞和粒细胞向血管内皮黏附、平滑肌增殖、血管超氧自由基生成增多，进而引发血小板聚集、炎症反应，以及更多超敏C反应蛋白产生[10]；大量的终末攻击性因子导致血管内膜功能受损，血管损伤、痉挛、脂质异常，最终导致动脉粥样硬化的发生[11,12]。

本文结果表明冠心病患者血清ADMA水平高于对照人群，而且冠脉狭窄支数多者ADMA水平更高，并与冠脉狭窄程度(Gensini积分)呈正相关；但冠心病患者血清eNOS及NO水平低于对照人群，而且冠脉狭窄支数多者eNOS和NO水平更低，并与冠脉狭窄程度(Gensini积分)呈负相关。与上述理论分析完全一致，进一步验证了ADMA通过抑制eNOS，降低NO的合成，引起血管内皮功能障碍，导致冠状动脉发生及加重。所以，临床检测血清ADMA，eNOS和NO水平对冠心病的辅助诊断和防治监测有重要应用价值。

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