精子形态影响复发性流产夫妇夫精人工授精临床妊娠率的临床研究

苏生 梁宝珠 黄显文 李彩娟 余健伟

IUI是一种辅助生殖技术,通过非性交方式将精子送入到女性生殖道使女子受孕。宫腔内人工授精(intrauterine insemination,IUI)是用人工方法将精子注入女性子宫腔,其妊娠成功率更高,是目前公认的、经济有效、限制条件少的辅助生育手段［1］。顾名思义,夫精宫内IUI是用丈夫精子对其配偶进行IUI的方法,现广泛应用于男性生育能力不足、免疫因素、性交或射精障碍和部分不明原因［2］。目前国内对不孕不育、反复自然流产的病因学研究主要集中在女性因素,而作为提供胚胎基因半数的男性因素研究较少［3］。精子形态作为评价男性生育能力的重要指标,在IUI中也是预测妊娠成功率的重要参数［4］。为探究精子形态对复发性流产夫妇夫精宫腔内IUI妊娠率的影响,本研究以2016年4月～2017年10月在本院进行夫精宫内IUI的191个周期作为观察对象,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 以2016年4月～2017年10月在本院就诊,进行夫精宫内IUI 192个周期的有复发性流产病史的夫妇作为研究对象,根据丈夫精子形态分为精子形态正常率＜1%的A组(56个周期)、正常率≥1%～3%的B组(50个周期)、正常率≥3%～4%的C组(46个周期)以及正常率≥4%的D组(40个周期)。A组患者年龄26～43岁,平均年龄(35.71±5.26)岁,配偶平均年龄(33.83±5.06),不孕年限(4.84±1.22)年。B组患者年龄26～43岁,平均年龄(35.71±5.26)岁,配偶平均年龄(33.66±5.02),不孕年限(4.87±1.23)年。C组患者年龄26～44岁,平均年龄(35.72±5.29)岁,配偶平均年龄(33.71±5.10),不孕年限(4.83±1.24)年。D组患者年龄26～45岁,平均年龄(35.76±5.27)岁,配偶平均年龄(33.69±5.05),不孕年限(4.83±1.27)年。四组患者年龄、配偶年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。且本研究内容均经过患者的同意并签署知情同意书。

1.2 纳入及排除标准［5］在本院进行夫精宫内IUI的191个周期均有1年以上不孕不育史和复发性流产史,对其进行相应检查,排除排卵异常等女性相关因素,排除男性生殖内分泌异常、体细胞染色体异常、免疫感染等除形态外所有因素。

1.3 分组指标 用精子形态正常率对夫精IUI周期进行分组,精子形态检测根据世界卫生组织第5版的精液质量分析标准采用Diff-Quik快速染色法进行染色,自然干燥后,10×目镜100×油镜,计数200条以上精子进行形态评价,0.5 ml液化精液与10 ml生理盐水混匀,离心15 min(800 g离心力)弃上清,留取约0.5 ml的沉淀物,混匀。取一小滴精液(5～20 μl)于洁净载玻片上,用第二张载玻片的边缘在清洁载玻片表面拖拉精液,制成适当厚度,涂片。涂片于空气自然干燥后,10×目镜100×油镜检查,并计算正常精子形态百分率［6］。临床上认为≥4%为正常,≥3%～4%为轻度异常,≥1%～3%为中重度异常,＜1%为极重度异常。＜1%的极重度异常者建议行试管婴助孕,因IUI具有创伤少优点,签署知情同意书后仍可运行。

1.4 夫精宫内IUI方法

1.4.1 母体准备 IUI时间选择经监测排卵女方月经周期的第12～18天,若子宫内膜＞0.8 cm、卵泡直径＞1.8 cm、尿促黄体生成素(LH)阳性则可进行IUI；若尿LH阴性,应该注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)2000～10000 U或注射丙氨瑞林0.3 mg后36 h内进行IUI。

1.4.2 精子准备 男方禁欲2～7 d,手淫法取精置于无菌取精杯中,立刻放入37℃恒温箱保存,液化后进行密度梯度离心3 min(5000 r/min)去除精浆。制备后精子,前向运动精子(PR)精子≥1000万条,否则取消周期。

1.4.3 IUI 待授精母体取膀胱结石位,常规消毒后,用阴道窥器使宫颈暴露,对阴道进行消毒,用生理盐水擦拭宫颈外口和宫颈,取0.5～1.0 ml制备好的精子,缓慢注入宫腔,仰卧休息30 min,术后常规黄体支持治疗,术后15 d左右测尿HCG。

1.5 观察指标及判定标准 IUI后15 d测尿或血HCG观察妊娠成功情况,HCG阳性视为IUI成功妊娠［7］。

1.6 统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验;对四组IUI夫妇精子形体正常率与妊娠率进行单因素方差分析与Logistic回归分析。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 四组妊娠情况比较 A组、B组、C组和D组的妊娠成功率分别为3.57%、8.00%、15.22%和25.00%；精子正常率≥4%的妊娠成功率高于精子正常率＜1%、≥1%～3%、≥3%～4%,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 四组妊娠情况比较(%)

2.2 Logistic回归分析 Logistic回归分析结果显示,精子形态正常率是(OR=0.51,95%CI=0.30,0.79)是影响夫精宫内IUI妊娠成功率的影响因素,其中精子正常率≥4%是IUI妊娠成功的保护因素,＜1%是IUI妊娠成功的危害因素。

3 讨论

2010年WHO颁布的第5版《人类精液实验室检验手册》在严格的精子形态学分类标准的情况下,已证实精子形态正常率与生育能力之间存在密切的联系,并规定精子形态正常率＜1%生育能力不佳,＞4%为正常精子,具有较好的生育能力［8,9］。这对判断男性生育能力的预后有重要意义。本研究结果也显示,A组、B组、C组和D组的妊娠成功率分别为3.57%、8.00%、15.22%和25.00%；精子正常率≥4%的妊娠成功率高于精子正常率＜1%、≥1%～3%、≥3%～4%,差异具有统计学意义(P＜0.05)。Logistic回归分析结果显示,精子形态正常率是(OR=0.51,95%CI=0.30,0.79)是影响夫精宫内IUI妊娠成功率的影响因素,其中精子正常率≥4%是IUI妊娠成功的保护因素,＜1%是IUI妊娠成功的危害因素。这与以往权威报道相一致［10］。

综上所述,精子形态可作为复发性流产夫妇夫精宫内IUI妊娠成功率的预测指标,同时,为提高妊娠成功率,选取适宜方法手段以改善精子形态尤为重要,需进一步研究探讨。